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2 a LISTA DE EXERCÍCIOS EQB 367 FUNDAMENTOS DE ENGENHARIA BIOQUÍMICA CONTEÚDO: PROCESSOS CONTÍNUOS E ESTERILIZAÇÃO DE MEIOS E EQUIPAMENTOS 1) Meio estéril é alimentado a um fermentador de volume útil igual a 3,25 litros, a uma vazão volumétrica de 15 mL/min. Qual é a taxa de diluição deste sistema e quais os valores do tempo de residência e o tempo de duplicação do agente, nessas condições? 2) Estudos sobre o crescimento de Escherichia coli em biorreator operando continuamente resultaram nos valores dados abaixo para a concentração de substrato para cada estado permanente. D (h -1 ) 1,06 0,97 0,83 0,78 0,70 0,58 0,39 S (g/L) 2,0 1,0 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 Determine os valores da taxa específica máxima de crescimento (máx.) e da constante de saturação (KS). 3) Em um processo contínuo, conduzido em biorreator de mistura completa, operando em estado permanente, um micro-organismo X transforma um substrato S em um produto P. O fator de conversão de substrato em células (YX/S) é igual a 0,8 g de células/g de substrato consumido e o fator de conversão de substrato em produto (YP/S) é igual a 0,5 g de produto/g de substrato consumido. O biorreator é alimentado com mosto estéril, contendo 100 g de substrato/litro. A taxa de formação de produto é de 20 g/L.h e a concentração de células no efluente é igual a 35 g/L. Com base nestes dados, calcular: a. A taxa específica de crescimento () b. A taxa específica de consumo de substrato (-qS) c. A taxa específica de formação de produto (qP) d. O fator de rendimento de produto em relação à biomassa (YP/X) e. A concentração de substrato no efluente f. A concentração de produto no efluente 4) Em um cultivo contínuo de leveduras em reator com volume útil de 50 litros, sendo o mesmo alimentado com meio estéril contendo 20 g de substrato por litro, foram levantados os seguintes resultados para estados permanentes: F (L/h) 6,45 7,40 9,45 11,10 14,30 17,25 18,50 S (g/L) 0,42 0,49 0,74 1,04 2,08 5,55 10,00 X (g/L) 9,05 9,05 8,91 8,91 8,65 7,07 4,92 Com base nestes dados, determinar os valores de máx e KS para a levedura em estudo. 5) Com base no exercício anterior, sabendo-se que o cálculo da produtividade volumétrica em processos contínuos é dado pela expressão: QP = X.D Plote um gráfico cartesiano da produtividade relacionada com a taxa de diluição e determine graficamente o valor da produtividade máxima e da taxa de diluição correspondente à mesma. 6) Com base no exercício 4, suponha agora que ase experiência tenham sido feitas para se determinar também a vazão que promova o máximo de produtividade e que, nesta condição, perturbe-se o sistema aumentando em 3,25 vezes o valor da vazão de alimentação, com o objetivo de se determinar o valor de máx pelo método do wash out. Assuma que os valores da concentração da massa celular nos tempos correspondentes, após a perturbação, sejam os seguintes: t (min) 10 20 30 40 60 80 90 110 130 180 X (g/L) 7,59 6,87 6,21 5,62 4,60 3,77 3,41 2,79 2,28 1,38 Determinar por esta técnica o valor de máx, bem como a vazão que dê origem à produtividade máxima. Trace os gráficos relevantes. 7) As tabelas a seguir apresentam a variação do número de micro-organismos presentes em um meio após diferentes tempos de esterilização a diferentes temperaturas. T = 100 °C N (céls/mL) ϴ (min) 2,29x10 23 0,5 2,19x10 23 1 2,10x10 23 1,5 2,00x10 23 2 1,92x10 23 2,5 1,83x10 23 3 T = 110 °C N (céls/mL) ϴ (min) 1,84x10 23 0,5 1,41x10 23 1 1,08x10 23 1,5 8,31x10 22 2 6,38x10 22 2,5 4,89x10 22 3 T = 120 °C N (céls/mL) ϴ (min) 5,09x10 22 0,5 1,08x10 22 1 2,29x10 21 1,5 4,87x10 20 2 1,03x10 20 2,5 1,19x10 19 3 T = 130 °C N (céls/mL) ϴ (min) 2,24x10 10 0,5 2,1x10 -3 1 1,97x10 -16 1,5 1,84x10 -29 2 1,72x10 -42 2,5 1,61x10 -55 3 A partir desses dados, determinar: a) N0 b) os valores de K para as diferentes temperaturas c) a equação que relaciona a variação de K com a temperatura d) o tempo de redução decimal para cada temperatura e) o grau de esterilidade (N0/N) após 20 minutos de esterilização a 120 °C 8) Determine a probabilidade de falha (P) e o tempo de esterilização (ϴ) para as diferentes situações, considerando K=20 min -1 : a) Em uma unidade industrial, ocorre 1 falha a cada 200 reatores esterilizados e a concentração inicial de contaminantes é de 10 20 células/reator. b) Uma indústria possui fermentadores de 100 m 3 de volume útil. A cada 100.000 m 3 esterilizados pode haver apenas 1 esporo de micro-organismo contaminante. A concentração inicial de contaminantes é de 10 6 esporos/mL. 9) O tempo necessário para se esterilizar uma quantidade de meio suficiente para preencher um reator em uma unidade industrial é de 5 minutos. Sabendo-se que ocorre uma falha de esterilização a cada 150 horas, qual é a probabilidade de falha (P) desse processo? 10) Um esterilizador contínuo de meio processa 4.500 L/h, visando a destruição de contaminantes, cujo tempo de redução decimal é igual a 0,222 min. O grau de esterilidade exigido no processo é No/N = 10 14 , e o esterilizador é construído com tubo de aço carbono de 6,0 cm de diâmetro. Qual deverá ser o comprimento do esterilizador em metros, para atender às condições dadas? 11) Um reator opera em regime contínuo. Meio é alimentado ao reator a uma vazão de 12500 L/h. A esterilização é feita continuamente, em esterilizador tubular de diâmetro interno igual a 0,8 m e volume de 2,51 m 3 , a uma temperatura de 118 °C. A equação abaixo mostra a variação da constante de destruição térmica (em min -1 ): K = 7,566 x 10 38 exp(-68700/1,98.T) Calcular: a) O tempo de esterilização b) O grau de esterilidade N0/N c) O comprimento do esterilizador 12) Um biorreator contínuo com volume útil de 50.000 litros é alimentado com mosto cujo teor em substrato é 11,11 g/100 ml. Atingindo o regime permanente, verifica-se que a velocidade de consumo de substrato no interior do biorreator é dS/dt = 40 x 10 -5 Kg/L min, e que a concentração de substrato no mosto fermentado que deixa a dorna é um décimo da do mosto de alimentação. O mosto que alimenta o biorreator é previamente processado em esterilizador contínuo, onde o tubo de espera, cujo diâmetro interno é 10 cm, tem um comprimento de 88 metros. É desprezível a condensação de vapor d’água no ejetor. A esterilização visa a destruição de esporos de um contaminante para o qual foram levantados os seguintes dados da variação da constante K da velocidade de destruição térmica com a temperatura T: Sabendo-se que o mosto a ser esterilizado contém 10 5 esporos do contaminante por ml e que o nível de esterilidade exigido é tal que em cada 10.000 m 3 de mosto esterilizado possa haver apenas um esporo de micro-organismo contaminante, pede-se: a) O tempo em que o mosto permanece na temperatura de esterilização b) A temperatura de esterilização 13) Uma indústria opera com esterilização contínua de mosto a 150 o C (K= 24,6 min –1 ) , para assegurar um grau de esterilidade (No/N) igual a 10 16 . Um problema no sistema acarretou a diminuição da temperatura para 120 o C (K= 13,8 min -1 ), mas, por questões operacionais, o tempo e a vazão de esterilização permaneceram os mesmos. Calcular o grau de esterilidade para esta nova situação. 14) A esterilização de um meio é realizada continuamente.O meio estéril, que contém substrato termossensível em concentração igual a 200 g/L, após uma etapa de resfriamento, alimenta um biorreator contínuo de volume útil igual a 100 m 3 , operando em estado permanente. No efluente do biorreator, a concentração de produto é 97 g/L, sendo a taxa de formação de produto igual a 40 g de produto/L.h. Sabendo-se que a temperatura de esterilização é 150 o C, que o grau de esterilidade (N0/N) é 2 x 10 32 , que o comprimento do esterilizador é de 3 m e que a variação da constante de destruição com a temperatura para o substrato e micro-organismo são dadas pelas equações abaixo, calcular: 1 KSUBSTRATO (min -1 ) = 4,42 x 10 15 exp ( - 33.222,52/RT) KMICRO-ORGANISMO (min -1 ) = 1,85 x 10 29 exp ( - 53.703,54/RT) Onde: T = temperatura absoluta em K R = 1,98 cal/mol K a) O tempo de esterilização b) A concentração de substrato no preparo do meio c) A vazão de operação do sistema d) A área da seção reta do esterilizador 15) Um biorreator contínuo com volume útil de 50.000 litros é alimentado com mosto cujo teor em substrato é 11,11 g/100 ml. Atingindo o regime permanente, verifica-se que a velocidade de consumo de substrato no interior do biorreator é dS/dt = 40 x 10-5 Kg/L min, e que a concentração de substrato no mosto fermentado que deixa a dorna é um décimo da do mosto de alimentação. O mosto que alimenta o biorreator é previamente processado em esterilizador contínuo, onde o tubo espera, cujo diâmetro interno é 10 cm, tem um comprimento de 88 metros. É desprezível a condensação de vapor d’água no ejetor. A esterilização visa a destruição de esporos de um contaminante para o qual foram levantados os seguintes dados da variação da constante K da velocidade de destruição térmica com a temperatura t: K (min-1) T (C) 0,092 103,0 0,53 11,6 3,1 120,7 60,0 137,0 Sabendo-se que o mosto a ser esterilizado contém 10 5 esporos do contaminante por ml e que o nível de esterilidade exigido é tal que em cada 10.000 m 3 de mosto esterilizado possa haver apenas um esporo de micro-organismo contaminante, pede-se: a) O tempo em que o mosto permanece na temperatura de esterilização b) A temperatura de esterilização c) A produção do fermentador, em volume de mosto fermentado por unidade de tempo. d) A velocidade específica de crescimento do micro-organismo no fermentador. 16) Em um biorreator de 50 m3 de volume útil, um produto P é obtido a partir de um substrato S, pela ação de um micro-organismo X, em processo contínuo operando em estado permanente. Meio estéril, com 130 g de substrato por litro é alimentado ao biorreator a uma vazão de 12.500 litros/hora. A esterilização é feita continuamente, em esterilizador tubular, de diâmetro interno igual a 0,80 m e volume de 2,51 m 3 , a uma temperatura de 118 o C. A equação abaixo mostra a variação da constante de destruição térmica (em min -1 ) com a temperatura absoluta (em K). K = 7,566 x 10 38 exp (-68.700 / 1,98 . T) O fator de conversão de substrato em biomassa (YX/S) é 0,205 g de células/ g de substrato consumido, o fator de conversão de substrato em produto (YP/S) é 0,50 g de produto/ g de substrato consumido e a concentração de substrato no efluente é igual a 5 g/L. Com base nos dados acima, calcular: a. O tempo de esterilização e b. O grau de esterilidade No/N c. O comprimento do esterilizador d. A taxa específica de consumo de substrato e. A taxa de crescimento f. A taxa específica de formação de produto
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