ED 2 Biotec Vegetal 2016 1

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO 
INSTITUTO DE QUÍMICA - Biotecnologia Vegetal 
Prof.: Anita Ferreira do Valle 
Estudo Dirigido 2 
 
 
 
NOME:________________________________________ DATA: _______________ 
 
 
1° QUESTÃO) TEMA: CULTURA DE TECIDOS 
Defina os termos abaixo: 
 
Cultura de tecidos 
Cultura de Tecidos é um processo em que fragmentos vegetais ou suas partes, denominadas explantes, são isoladas do organismo e são assepticamente cultivadas em meio de cultura apropriado e condições adequadas
Explante 
Partes da planta que podem ser isoladas e cultivadas. São utilizadas para propagação da planta.
Sabe-se que a cultura de tecidos é muito importante para a manutenção de cultivares de alto valor agronômico e econômico de espécies nativas do Brasil. Além da manutenção de espécies, a cultura de tecidos ainda apresenta várias aplicações importantes. Cite outras 3 formas importantes de aplicação dessa técnica e justifique-as. 
Através da cultura de protoplastos pode-se hidridizar espécies romper barreiras genéticas. Através de cultura de anteras pode-se obter plantas haploides e, depois, homozigotas. Através de culturas de células em meio líquido pode-se obter mutantes. Com culturas de embriões e meristemas pode-se fazer criopreservação. Com culturas de meristemas apicais pode-se obter plantas livres de vírus. Com a embriogênese somática pode-se fornecer grande quantidade de plantulas. Com gemas axilares pode-se propagar milhares de planta com gene modificado ( resistência a herbicidas, insetos e patógenos).
 
2° QUESTÃO) TEMA: MICROPROPAGAÇÃO 
A micropropagação é a propagação vegetativa in vitro. É chamada de micro por causa do tamanho dos propágulos utilizados. É a aplicação de maior impacto na cultura de tecidos e a que é mais prática. A Embrapa utiliza esta técnica para propagação de diversas espécies, incluindo a bananeira. 
FASE 1: Seleção de explante (brotações novas, durante a parte ativa de crescimento, boa qualidade fitossanitária – ápices caulinares, gemas axilares e meristemas isolados), desinfestação e cultura em meio nutritivo sob condições assépticas
FASE 2: Multiplicação de propágulos (meio com aa, agua de coco, extrato de malte e Citocinina)
FASE 3: Transferência da parte aérea para meio de enraizamento ( meio de cultura contendo sacarose e carvão ativado) e subsequente transplantio das plantas obtidas para substrato ou solo.
Quais são os 2 objetivos que se pretende alcançar utilizando a micropropagação? 
Obtenção de plantas sem doenças e acelerar métodos convencionais de propagação vegetativa, além da padronização das plantas em grande escada. 
Cite e justifique três principais cuidados que precisam ser tomados na fase de transferência da muda para o telado ou estufa. 
Aclimatização – transferência da planta da condição in vitro para a casa de vegetação. Fase crítica devido a: aumento de taxa de transpiração e diminuição da umidade, indução da autotrofia, diminuição da concentração de nutrientes e presenã de patógenos da terra e no ar
Para o estimulo da autotrofia retira-se a sacarose e aumenta a concentração de co2, dando condições para fotossíntese
Nebulização ou irrigação do substrato com gotas pequenas para reduzir o estresse hídrico.
Pulverização de antibióticos 
Adubação para manutenção de nutrientes
Também é necessária a manutenção de tempetatura e luz ideais
Como seria possível realizar micropropagação fora do laboratório? Essas técnicas poderiam ser aplicadas para qualquer espécie? Justifique. 
 Realizando o enraizamento ex vitro, através da microestaquia (técnica suprime o enraizamento in vitro. Os tufos da parte aérea são limpos e colocados diretamente no solo). Tem como vantagem a formação de raízes mais complexas, evitando a formação de caule. E é feito com tratamento com auxina e sacarose.
Facilidade de uso em espécies lenhosas e herbáceas e ornamentais, que tem grande capacidade de enraizamento.
3° QUESTÃO) TEMA: CONSERVAÇÃO DE GERMOPLASMA 
Germoplasma representa o conjunto de materiais hereditários de uma espécie. A conservação de recursos genéticos implica na manutenção de coleções in sito, ou seja, nos seus locais de ocorrência. Nesse caso, podem ser mantidos indivíduos, sementes, embriões ou outras estruturas vegetais, sob diferentes condições, dependendo do material utilizado: em campo, em casas de vegetação, em câmaras secas, em baixa temperatura, em meios de culturas modificados ou criopreservadas. 
 
a) Determine que tipo de material poderia ser preservado in vivo, in vitro, ex situ, in situ, on farm e por criopreservação. Justifique a sua escolha. 
 In vivo: não recalcitrantes
In vitro: recalcitrantes
Ex situ: em um local diferente
In situ: no local de ocorrência – indivíduos, sementes, embriões ou outras estruturas vegetais
On farm: não consegue se propagar em nenhum outro lugar
Criopreservação: podem ser dissecadas
 
4° QUESTÃO) TEMA: CLONAGEM E TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA DE PLANTAS 
O Brasil é o maior produtor mundial de laranja, com 355 milhões de caixas produzidas em 2000/01, o que corresponde a cerca de 30 % da produção mundial. Além disso, o país é responsável por, aproximadamente, metade da produção mundial de suco concentrado, um dos principais produtos agrícolas exportados pelo Brasil. O volume de recursos movimentados pelo agronegócio citrícola supera R$ 5 bilhões por ano, gerando cerca de 400mil empregos diretos, somente no estado de São Paulo, o maior produtor do Brasil. 
A citricultura nacional apresenta vários problemas fitossanitários, entre os quais se destacam a larva minadora dos citros (Phyllocnistis citrella), a pinta preta (doença fúngica provocada por Guignardia citricarpa), a clorose variegada dos citros (CVC, causada pela bactéria Xyllela fastidiosa) e o cancro cítrico (causada pela bactéria Xanthomonas axonopodis pv. citri). 
O cancro cítrico tem provocado grandes prejuízos tanto no Brasil como em outros países produtores de citros. Essa doença afeta toda a parte aérea da planta, causando lesões em frutos, folhas e ramos. Os frutos ficam depreciados e caem precocemente, reduzindo a produção da planta. As portas de entrada para a bactéria do cancro são ferimentos em folhas causados pelo vento ou pelo ataque da larva minadora dos citros. 
As plantas cítricas contaminadas, bem como as não contaminadas, num raio de 30 metros são cortadas e incineradas. Somente no ano de 1999, foram gastos cerca de R$ 33 milhões na erradicação de pomares infectados nos Estados de São Paulo e Minas Gerais. 
 
a) Identifique opções que possam solucionar a questão da perda de frutos nas colheitas no Brasil. Use para compor a sua resposta técnicas como transformação genética (direta ou indireta) e hibridação somática. 
 A transformação genética é definida como a inserção de fragmentos específicos de DNA responsáveis por uma determinada característica genética, em um genoma hospedeiro, podendo ser indireta (com a utilização de um vetor, um exemplo é a utilização da Agrobacterium como hospedeiro) ou direta (com a utilização de técnicas químicas e físicas, como polietilenoglicerol, eletroporação ou aceleração de partículas), no caso de espécies pouco susceptíveis a infecção, como monocotiledonias. Com a utilização da transformação genética, uma nova caracteríscica pode ser induzida nos frutos brasileiros, dentre elas a resistência a larva.
A hibridização somática por meio de fusão de protoplastos é uma alternativa para a reprodução a fim de combinar dois genomas completos, é uma transformação empírica e não específica. Com esse procedimento é possível hibridizar genoma de dois frutos, com objetivo de obter um mais resistente.Neste caso, podem ser utilizados porta enxertos com os híbridos.
 
5° QUESTÃO) TEMA: RISCOS DA INTRODUÇÃO DE PLANTAS TRANSGÊNICAS NO AMBIENTE 
 
Cite 2 maneiras de identificar uma planta transgênica no ambiente. Justifique. 
Pode ser observado o fenótipo e a produtividade, no laboratório da pra ser ffeito o mapeamento gênico e a observação de genes marcadores e reporteresQuais os dois principais riscos do cultivo de uma planta transgênica no ambiente
Desequilíbrio ambiental, agressividade, fluxo genico