CONTROLE DE MICRORGANISMOS

Prévia do material em texto

CONTROLE DE MICRORGANISMOS
Conjunto de ações dirigidas para prevenir, minimizar ou eliminar os perigos inerentes às atividades de ensino, pesquisa, produção, desenvolvimento tecnológico e prestação de serviços com o objetivo de reduzir os riscos para a saúde do homem, animais, a preservação do meio ambiente e a qualidade dos resultados.
Considerar: tipos de MO envolvidos, relação de patogenicidade, virulência, propagação (vias), riscos para a coletividade e possibilidades de controle (EPI, processos tecnológicos, quarentena, tratamento, etc).
Métodos: físicos, químicos e biológicos 
Seleção de melhor método depende da natureza do: local, material, agente e finalidade.
Métodos para demonstrar a eficácia de um agente antimicrobiano: avalia os sobreviventes
Bactérias/fungos – mortos: não crescem ou reproduzem em meios apropriados;
Vírus – inativado: incapaz de infectar uma célula hospedeira adequada.
Fatores que influenciam a ação dos processos de controle e a escolha do agente
Tipos de microrganismo e tamanho da população
Concentração ou intensidade do agente antimicrobiano
Período de exposição (esterilização – 106 ou 1012)
Temperatura e pH do ambiente;
Tipo de amostra ou ambiente;
Presença de solventes, matéria orgânica, concentração de sais, açucares, inibidores, etc.
Processos
Esterilização: processo capaz de matar ou remover todos os MOs de um ambiente, inclusive os mais resistentes. Procedimento absoluto ou não relativo, não existe esterilização parcial;
Desinfecção: capaz de reduzir a níveis seguros Mo indesejáveis, matando-os. Os desinfetantes não precisam ter necessariamente atividade esporocida.
Conservação: processo com atividade “stática”, mas com o tempo pode causar a morte de alguns MO. Em geral mantém os níveis baixos de MO.
Sanitização: redução de contagens MOs a valores seguros para a saúde publica. Compostos com atividade microbiana cujos resíduos podem ser ingeridos em pequena quantidade. Ex: os resíduos de cloro que existem na água potável;
Antissepsia: conjunto de medidas utilizadas para inibir o crescimento de MO ou removê-los de um determinado local. Desinfecção para tecidos vivos como a pele e mucosas.
Assepsia: medidas utilizadas para impedir a penetração de MO em um ambiente que não os contenha.
Degermação reduz o nº de MOs.
Objetivo: manter MO em níveis aceitáveis 
Inibição do crescimento, redução do número, destruição ou remoção
Aplicações:
Ambientes domésticos e públicos;
Hospitais (UTI, SALAS CIRÚRGICAS, QUARTOS, COZINHAS, etc);
Indústrias de materiais de uso médico-hospitalar;
Indústrias de alimentos;
Laboratórios – Biossegurança níveis 1, 2, 3 e 4
Alimentos: prolongar a fase ...
Termos empregados no controle de MOs.
Contaminante: MO presente em um local indesejável/tempo;
Descontaminação: procedimento usado para remover ou destruir MO indesejáveis;
Os nomes dos tratamentos que causam a morte direta dos microorganismos possuem o sufixo -cida, significando morte.
Agentes:
Antimicrobianos (virais, bacterianos, fúngicos, protozoários)
Microbicidas (virais, bacterianos, fúngicos)
Microbiostáticos (virais, bacterianos, fúngicos)
Histórico
Preservação de alimentos e bebidas: fogo – 1,4 a 0,5 milhoes anos AC;
Povos antigos:
Egípicios: peixe/frango secos ao sol deserto; sal curados (nitrito);
Hebreus – fumigação com dióxido de S;
Romanos: técnicas de conservação de alimentos por baixas temperaturas (neve), defumação;
Séc. XVII: Leeuwenhock “animálculos”;
Séc. XVIII: acondicionamento hermético em vidro (enlatamento);
Geração espontânea: Spalanzani
Séc. XIX: Luis Pasteur – tratamento térmico para destruir MOs. Pasteurização (leite);
Tindalização (vapor d’água): Mos decompondo alimentos associados a doenças;
Semmelweiss: hipoclorito (antisséptico); Lister: cirurgia antisséptica;
Filtros e autoclave;
Padrão de morte em uma população de MOs
Morte em microbiologia: perda da capacidade de reprodução;
Os microorganismos em uma população morrem em uma relação constante, em um dado período de tempo;
A este padrão de morte denominamos morte exponencial;
Para avaliar a eficiência de um agente microbicida, uma amostra do material tratado é cultivada para determinar o número de sobreviventes (aqueles que podem crescer e multiplicar-se).
Resistência relativa dos MOs aos processos de controle
Mais alta resistência: endósporos bacterianos;
Resistência moderada: pseudômonas sp., mycobacterium tuberculosis, staphylococcus aureus, cistos de protozoários;
Baixa resistência: maioria das células vegetativas, esporos fungicos, vírus envelopados, leveduras, trofozoítos de protozoários.
AGENTES FÍSICOS PARA CONTROLE MICROBIANO
Métodos físicos: temperatura, disponibilidade de água (Aw), radiação, filtração e plasma.
Calor
O calor aparentemente mata os micro-organismos pela desnaturação de suas enzimas, que resulta em mudanças na forma tridimensional dessas proteínas, inativando-as.
Parâmetros de morte microbiana: Morte térmica
Ponto de morte térmica (PMT): temperatura mais baixa que mata os MOs sem uma amostra em 10min.
Tempo de morte térmica (TMT): menor período de exposição que mata ou inativa todos os organismos em suspensão em temperatura e condições definidas;
Tempo de redução decimal (TRD ou valor D): tempo requerido para matar 90% dos MO ou esporos em uma amostra a uma determinada temperatura.
Esterilização por calor úmido x calor seco
Calor úmido: O calor úmido mata os micro-organismos principalmente pela coagulação protéica (desnaturação), que e causada pela ruptura de ligações de hidrogênio que mantém as proteínas em sua estrutura tridimensional. Ex: fervura
A esterilização confiável com calor úmido requer temperaturas mais elevadas que a da água fervente. Essas temperaturas elevadas são mais comumente obtidas por vapor sob pressão, em uma autoclave. A autoclave é o método preferido de sanitização, a não ser que o material a ser esterilizado possa ser danificado por calor ou umidade.
Vapor de água sob pressão autoclavação
Vantagens: maior segurança, menor dano aos materiais, menor tempo gasto;
Desvantagens: não apropriada para materiais termossensíveis, custo.
Calor seco: por oxidação. Ex: método da chama direta.
Atividade de água
Concentração do soluto
Alto conteúdo de sal ou açúcar – usado para a preservação de alimentos;
Dessecação: remoção gradual de água das células (inibição metabólica), não é efetiva para o controle microbiano – muitas células retêm a capacidade de crescer quando da reconstituição;
Liofilização: congelamento combinado com dessecação “freeze drying”; estocagem eficiente para longos períodos (alimentos, culturas, soro, enzimas);
Esterilização por plasma
O plasma é produzido através da aceleração de moléculas de peróxido de hidrogênio e ácido peracético, por uma forte carga elétrica produzida por um campo eletromagnético (microondas ou radiofreqüência).
Os elétrons dessas moléculas são então jogados fora de seus átomos, aceleram partículas carregadas, recombinam-se com outros átomos ou elétrons, retornam para a baixa energia e produzem brilho visível.
Os parâmetros utilizados para a realização deste processo são: temperatura, pressão, concentração de peróxido de hidrogênio, energia do plasma e tempo.
Vantagens
Reação rápida com as unidades celulares (esterilização em curto espaço de tempo);
Ativação do gás de peróxido se dá por alguns minutos e volta ao estado normal sem deixar resíduos;
No final do processo, tem como produtos de degradação oxigênio e água, não necessitando de período de aeração;
Não requer controle exaustivo de monitorização;
Indicações
Esterilização: artigos sensíveis a altas temperaturas e a umidade. Sistema de esterilização atóxico, ambiental/te correto.
Materiais: alumínio, bronze, látex, PVC, silicone, aço INOX, teflon, borracha e outros. 
Não é oxidante. Impróprio para derivados de celulose;
Filtração
A filtração é usada para esterilizar os materiais sensíveis ao calor, como alguns meios de cultura, enzimas, vacinase soluções antibióticas.
Radiação
Radiação não ionizante
Ultravioleta (UV): não penetrante, usado para esterilizar superfícies, ar e filmes de água. Em alguns casos melhor considerar como desinfetante.
Radiação ionizante
Raios x, beta
Aprovados recente para uso em alguns alimentos: carne, trigo e temperos, frutas frescas e vegetais (reduzir taxa de deteriorização);