Aula parasitologia Leishmaniose

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LTA –SINAIS CLÍNICOS
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LTA – OBTENÇÃO DO MATERIAL
- Escarificação → lesões fechadas → linfa
 raspar delicadamente a mm da borda.
-Punção Aspirativa com sol. salina após injeção de 3 mL sol.salina na lesão ou linfonodo (seringa de 5 mL e agulha de 25x8 mm). 
-Biopsia Cutânea → raspar lesões recentes →
Fragmento →formol 10% + parafina → cortes histológicos H/E (hematoxilina – eosina) ou Giemsa 
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LTA – OBTENÇÃO DO MATERIAL
Aposição em lâmina (imprint ou touch preparation) → biopsia → compressão → fragmento tecido (sol. Salina) → lâmina seca e desengordurada.
Esfregaço
Assepsia → Água e Sabão
 → Álcool Etílico 70%
Anestesia Local → Lidocaína 1 – 2 % 
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LTA – COLETA DE MATERIAL
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LTA – RESULTADOS
-Demonstração direta → esfregaço material das técnicas anteriores → fixar metanol →
 corar Giemsia ou Leishman e MOC → formas amastigotas. A= 1000x ou +.
-Histopatológico → MOC → formas amastigotas. A= 1000x ou +.
-Cultivo em ágar-sangue difásicos → sólida NNN + líquida LIT-BHI ou Schneider → 5 dias, t= 24-26°C. Anterior → sol. Salina + antibióticos → 24h, t= 4C. Formas promastigotas. A= 1000x ou +.
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LTA – RESULTADOS
- Punção Aspirativa em Tubo de Vácuo → tubos selados (Vacutainer®) com meio de cultivo → condições de campo. Formas promastigotas. A= 1000x ou +.
Inoculação em Animais → hamster (Meso-
cricetus auratus) → macerado frag. biopsia →sol. salina → inoculação patas posterio-res ou extremidades → 2-9 meses → exame clínico. 
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LTA – RESULTADOS POSITIVOS
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LTA – IMUNOLÓGICO + RESULTADOS
-Intradermorreação de Montenegro (IDRM) → Atg padronizado Leishmania → 240 µg N total ou 40 µg N protéico/mL → injeção intradérmica 0,1mL antebraço → 48-72 h → reação endure-cida → Ø ≥ 5 mm → positivo.
-Cães → Atg padronizado Leishmania + 2,0 mg N protéico/mL. 
-Elisa (Imunoenzimático)
-RIFI (Reação Imunofluorescência Indireta)
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LTA – RESULTADOS POSITIVOS