AULA 2 SEMEADURA

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Curso de Zootecnia - Disciplina de Imunologia e Microbiologia Zootécnia 
 
ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 2 – DATA:___/___/201__ 
 
TÉCNICAS DE SEMEADURA DE MICRO-ORGANISMOS 
 
FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA 
 
I. TÉCNICAS DE SEMEADURA 
O isolamento de um micro-organismo consiste na obtenção de uma cultura pura (colônias isoladas 
de um único micro-organismo, separando-o de outros que se encontram no mesmo material). A 
Semeadura consiste no plantio de um microrganismo em um meio de cultura, a partir de um material 
contaminado qualquer. Repique consiste na transferência de um microrganismo de um meio de cultura 
para outro. A identificação da maioria dos microrganismos depende de uma completa descrição de suas 
características morfológicas, fisiológicas, bioquímicas e antigênicas. 
 
a) Semeadura em profundidade ou “Pour Plate”: depois de preparadas as diluições, estas são 
inoculadas em quantidades de 0,1 ou 1,0 ml em placas de Petri estéreis, utilizando-se duas placas para 
cada diluição. Após colocar o material (amostra em estudo) na placa, agrega-se de 10 a 15 ml do meio de 
cultura fundido e resfriado a temperatura de 45ºC, agitando-se em movimentos rotativos. As placas assim 
preparadas devem ser incubadas a temperatura e condições recomendadas, devendo ser colocadas em 
posição invertida na estufa. Objetivo: contagem bacteriana. 
 
b) Semeadura em superfície ou “Spread Plate”: após preparar as placas com meio de cultura (15 ml) e 
uma vez preparadas as diluições escolhidas semeia-se 0,1 ml de cada uma das diluições, utilizando-se 
também duas placas por cada diluição. Distribuir toda alíquota semeada com uma alça de Drigalski. 
Objetivo: obtenção de crescimento confluente, ou para contagem bacteriana. Esta técnica é muito utilizada 
na realização de antibiogramas. 
 
 
 
 
 
 
Curso de Zootecnia - Disciplina de Imunologia e Microbiologia Zootécnia 
 
c) Esgotamento em estrias: transferir uma 
alçada da cultura para meio sólido em placa e 
estriar com a alça bacteriológica sobre o meio. A 
estria pode ser realizada em movimento de zig- 
zag (estria sinuosa) ou como uma linha reta sobre 
o meio (estria reta). Visa a obtenção de colônias 
isoladas. É importante não cruzar as estrias (não 
tocar a alça na estria anterior), para reduzir o 
inóculo a cada estria e obter as colônias isoladas. 
Objetivo: obtenção de colônias isoladas. 
 
 
PROCEDIMENTO PARA SEMEADURA DE MICRO-ORGANISMO EM MEIO SÓLIDO 
 
1. Limpar a bancada e as mãos com álcool 70ᵒ; 
2. Escolher o meio de cultura já preparado e esterilizado; 
3. Aquecer o meio de cultura, mas sem levantar fervura; 
4. Transferir cerca de 15 mL do meio para placas de Petri esterilizadas com todos os cuidados para 
não haver contaminação externa; 
5. Aguardar a solidificação do meio com as placas semi-tampadas; 
6. Após completa solidificação, semear o micro-organismo; 
7. Tampar a placa e identificar o material; 
8. Lacrar a placa com parafilm; 
9. Incubar invertido em estufa própria; 
 
Observação: 
• Bactérias: 48 horas a 37ᵒC 
• Fungos: 3 a 7 dias a 25ᵒC