RELATORIO TEC. SEMEADURA (1)

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FACULDADE DE TECNOLOGIA DE TERESINA-CET
BACHARELADO EM FARMÁCIA
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA CLINICA
ANA MARIA COUTO SOUSA
LEILA RAQUEL DA CONCEIÇÃO AQUINO
MYLENA PASSOS ARAUJO FERREIRA
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA: 
TÉCNICAS DE SEMEDURA
TERESINA – PI
2021
ANA MARIA COUTO SOUSA 
LEILA RAQUEL DA CONCEIÇÃO AQUINO 
MYLENA PASSOS ARAUJO FERREIRA 
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA:
TÉCNICAS DE SEMEDURA
Relatório apresentado à disciplina de Microbiologia Clinica pelo curso de Bacharelado em Farmácia da Faculdade de Tecnologia de Teresina-CET, ministrada pela Prof.ª Akeme Suzuki, como requisito parcial para obtenção de nota. 
TERESINA-PI 
2021
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO..................................................................................................3
2 OBJETIVOS......................................................................................................5
3 MATERIAIS E MÉTODOS................................................................................6
4 CONCLUSÃO...................................................................................................9
REFERÊNCIAS
	
1 INTRODUÇÃO
As técnicas de semeadura são o método pelo qual se transfere inóculos bacterianos de um meio de cultura ou material a ser analisado (secreções, alimentos) para um outro meio de cultura. Para garantir que apenas o microorganismo desejado seja semeado, são utilizadas as técnicas assépticas: procedimentos que devem ser adotados visando a não contaminação de materiais, meios e culturas.
Já os meios de cultura são composições de substâncias que fornecem nutrientes necessários para o desenvolvimento de microrganismos. Sendo favorecido o crescimento, é possível a identificação desses organismos através das suas atividades bioquímica e metabólica. Além dos nutrientes, existem condições ambientais para o crescimento microbiano, como temperatura, pH, umidade, presença ou não de oxigênio (condição aeróbia e anaeróbia), entre outros. Em síntese, meio de cultura é o preparo de um ambiente perfeito para que determinado microrganismo presente em uma amostra de material cresça e se desenvolva para análise posterior.
Entre as técnicas de semeadura em microbiologia mais utilizadas, podemos citar a de esgotamento. Nela, a suspensão bacteriana (que é o líquido com o microrganismo) é espalhada de forma aleatória em toda a placa, até que todo o material seja utilizado. Assim, é possível ter a certeza de que haverá realmente um crescimento bem distribuído e que garantirá uma boa análise mais tarde.
A outra técnica é a da alça calibrada estéril, na qual este acessório é mergulhado na suspensão do microrganismo e, depois, utilizado para espalhar a amostra na placa de cultura. Há, ainda, a aplicação das técnicas de semeadura por meio da incubação — em que os meios de cultura com o material são colocados em uma estufa para cultura com temperatura controlada.
Todas essas técnicas possuem características específicas e podem ser mais ou menos eficazes, dependendo de cada caso. Por isso, é importante que os cientistas que trabalham em laboratórios se mantenham sempre atualizados e estudem quais são as especificidades de cada um dos microrganismos avaliados.
O presente trabalho trata de um relatório de aula prática realizado no dia 06 de maio de 2021, no laboratório da faculdade CET, transmitido via aula online, onde através de aplicativo pudemos acompanhar a prática que ia sendo realizada pela professora sobre técnicas de semeadura. Portanto, é um trabalho que culmina da nossa compreensão à respeito da prática que assistimos online.
2 OBJETIVOS
· Analisar o meio de crescimento microbiano no meio de cultura;
· Compreender as técnicas de semeadura;
CONCEITOS IMPORTANTES 
· Isolamento de um microrganismo: O isolamento consiste na obtenção de uma cultura pura (colônias isoladas de um único microrganismo, separando-o de outros que se encontram no mesmo material).
· Finalidades do isolamento: Identificação de um microrganismo. A simples observação de caracteres morfológicos não é suficiente para a identificação e classificação dos microrganismos. Para isto, são avaliadas várias características como: características bioquímicas, sorológicas, de patogenicidade, etc. O estudo destas características está na dependência do microrganismo que se pretende identificar. 
· Semeadura: Consiste na inoculação ou plantio de um microrganismo em um meio de cultura, a partir de um material contaminado qualquer. 
· Repique: Consiste na transferência de um microrganismo de um meio de cultura para outro, considerando-se o esgotamento nutricional e acúmulo de metabólitos tóxicos no meio, considerando-se a dinâmica de crescimento bacteriano em sistema fechado.
3 MATERIAIS E MÉTODOS
3.1 Materiais 
· Placas de Petri contendo meio de cultura Ágar Simples (AS) por bancada; 
· Tubos de ensaio contendo caldo simples esterilizado; 
· Tubo de ensaio com 2 mL de cultura para repique diluída (10 -6)
· Swab de algodão para esgotamento em placa; 
· Alça bacteriológica; 
· Swab - Agulha bacteriológica
· Pipeta de vidro esterilizada.
· Balão de fundo chato
· Lamparina
· Espátula 
· Pinça
· Pipeta paster
3.2 Métodos 
Técnica de picada
Essa técnica ela é feita em meio de cultura semissólido, onde a inoculação vai ser feita em tubo. Primeiro, pega o meio de cultura semissólido para fazer o teste de motilidade, pega uma colônia isolada para fazer o repique, sendo que para o repique você vai utilizar um meio que já foi enrijecido. Com a amostra na ponta da agulha vai inserir no tubo até uma porção antes do fim. Em seguida, vai inserir a agulha bacteriológica em uma linha reta, essa linha reta é feita quando se deseja pequena massa de microrganismos. A técnica de picada é utilizada para verificar fermentação e motilidade das bactérias.
Técnica de difusão 
Nessa técnica iremos utilizar um meio de cultura liquido com auxílio da alça bacteriológica. Retira uma amostra das colônias da placa e vai inocular na cultura que esta liquida. A principal finalidade dessa técnica é observar as propriedades bioquímicas antes do teste microbiológico, e tem como favorecer o crescimento bacteriano por meio de enriquecimento.
Método de estrias múltiplas para isolamento
Consiste em espalhar o material com o auxilio de uma alça bacteriológica fazendo estrias sucessivas até o esgotamento do material de modo a obter perfeito isolamento das bactérias.
Método de semeadura por profundidade
Para realizar essa técnica iremos preparar as soluções, pega 1 ml da suspensão bacteriana e 20 ml do meio fundido e misturar com 1 ml da suspensão bacteriana e plaquear. Com essa técnica vamos ter crescimento tanto na superfície do meio de cultura quanto na parte interna do meio de cultura, ela também é utilizada para quantificar os microrganismos.
Para realizar a semeadura por profundidade deve pesar 0,4 de ágar nutriente, numa proveta coloca 50 ml de água destilada, no vidro relógio com auxílio de uma espátula coloca 0,4 de ágar nutriente e leva para pesar, depois transferi para o balão de fundo chato, acrescenta aos poucos a água destilada e vai agitando para fazer a hidratação, esse processo deve ser feito até não ter mais aglomerado do ágar nutriente no fundo do balão. Em seguida, leve o balão para o aquecimento.
Após o meio de cultura ter sido fundido deixe esfriar um pouco e depois coloque uma rolha na boca do balão.
Pegue duas placas de petri e coloque o meio que foi fundido e deixe enrijecer. Para o meio de derramamento vai deixar o meio de cultura que foi fundido esfriar e quando estiver em temperatura adequada acrescente 1 ml do seu inoculo para 20 ml do meio de cultura.
A primeira semeadura será por esgotamento por estrias.
Primeiro transferi uma quantidade da cultura para o meio sólido da placa, flamba a alça bacteriológica dentro do perímetro da chama e deixe esfriar. Colete uma amostra de colônia isolada, divida a placa em quatro quadrantee estriar em zig zag, gira a 90°, flamba a alça novamente para reduzir a quantidade de bactéria espere esfriar e gire a placa a 90°. Faça estrias paralelas ao primeiro quadrante, flamba novamente a alça bacteriológica e faça novas estrias em zig zag, gire novamente a 90° e faça o último quadrante. Flamba novamente e faça estrias zig zag. Feixe a placa e deixe de cabeça para baixo.
Semeadura por espalhamento
Primeiro transfira uma quantidade da cultura para a placa e deixe enrijecer, pegue o inoculo, flamba em seguida, pegue a amostra e coloque em um canto da placa e com auxilio de uma alça faça estrias bem próximas em zig zag até você perceber que não há mais líquido. O liquido será absorvido pelo meio de cultura.
Nesse método temos o espalhamento por toda a extensão do meio de cultura.
O método de derramamento vai usar o inóculo que está em suspensão, ou seja, 1 ml de suspensão e em seguida 20 ml de ágar fundido é adicionado por cima. A placa deve ser suavemente submetida a movimentos rotatórios visando uma perfeita mistura da cultura com o ágar. Essa técnica é a mais utilizada para o isolamento de bactéria.
Semeadura em meio liquido
Ao utilizar meio líquido, deve -se contaminar a alça bacteriológica com uma amostra de colônia de bactéria e introduzir no meio que não foi inoculado, para que o microrganismo esteja difuso no líquido. Este é o método para crescimento bacteriano em meio líquido.
4 CONCLUSÃO
Com a aula prática pudemos compreender um pouco sobre os métodos que são utilizados para fazer a semeadura, as técnicas empregadas e o passo a passo de cada um dos processos, conforme os exemplos feitos pela professora. De maneira geral o grupo não obteve muito sucesso na compreensão do conteúdo, tendo em vista que se trata de um assunto complexo cujo entendimento torna-se mais difícil em decorrência da forma online.
Porém ficou claro que não é um procedimento simples, que exige bastante cautela, atenção e responsabilidade por parte do técnico que for manipular essas técnicas em laboratório, pois trata-se de um microrganismo com potencial contaminante.
REFERÊNCIAS
DINIZ, Cláudio Galuppo. Roteiro de aulas práticas. UFIF. 2018. Disponível em: < https://www.ufjf.br/microbiologia/files/2013/05/ROTEIRO-PARA-AULAS-PR%C3%81TICAS-bacteriologia-2018-vers%C3%A3o-02-2018.pdf>. Acesso em 29 de maio de 2021.
PROLAB. Conheça técnicas de semeadura em laboratório de microbiologia. Disponível em: https://www.prolab.com.br/blog/curiosidades/conheca-tecnicas-de-semeadura-em-laboratorio-de-mi. Acesso em 29 de maio de 2021.
UNIRIO. Disciplina de Microbiologia. Técnicas de semeadura. Disponível em: http://www.unirio.br/ib/dmp/nutricao-integral/aulas-praticas/Tecnicas%20de%20Semeadura%20-%202019.2.pdf. Acesso em 29 de maio de 2021.