Introdução à Histologia

Prévia do material em texto

Aula 01 - Biologia Celular 
Prof. Jones 
→ Envolta por Membrana Plasmática e região nuclear bem delimitada por envoltório nuclear. 
→ Organelas membranosas responsáveis por ações metabólicas. 
→ Mitocôndrias responsáveis pela respiração celular, liberam energia 
(produção de ATP) a partir de glicose. 
→ Citoesqueleto estabelece, modifica e mantém a forma da célula. Formado por microtúbulos, 
filamentos de actina e intermediários. Responsável pelos movimentos de contração celular, emissão 
de pseudópodes e divisão celular. 
→ Núcleo envolvido por dupla membrana (as duas paredes do RER que o circunda). 
→ Cromatinas formadas por DNA e proteínas 
 
Fixação: Impede a proliferação de bactérias e a autólise. Aumenta a afinidade das células ao corante 
e a resistência da peça para ser estudada. Os fixadores se ligam a componentes estruturais do tecido 
(proteínas) e garantem a manutenção da peça. Uso de tetróxido de ósmio e formol. 
Para a visualização dos componentes do tecido, é necessário que seja atravessado pela luz. 
Para tal, a espessura deve limitar-se a poucos micrômeros. 
Microtomia: Micrótomo é o aparelho responsável pelo corte de tecidos. 
Microscópio Ótico: Utilizado parafina para a não degradação durante o corte. Corte feito por 
lâmina de aço (↓ fino). 
Microscópio Eletrônico: Utilizado resina mais resistente. Corte feito por lâmina de vidro ou 
diamante (↑ fino). 
Coloração (Histoquímica): Permite a observação dos componentes de tecido devido ao contraste 
entre estruturas ao ligarem-se diferentemente entre elas. 
HE (Hematoxilina-Eosina): Através dessa técnica, é possível 
diferenciar porções basófilas e acidófilas do tecido. 
Hematoxilina marca substancias basófilas (ácidos), por isso 
costuma corar o núcleo e o RER (onde há grande quantidade 
de proteína). Eosina marca substancias acidófilas (básica), 
portanto tem afinidade com o citoplasma, fibras colágenas e 
outras substâncias ácidas da célula. 
Há 2 outras classes de corante: 
 
Uma célula animal típica não é 
visível a olho nu. Por isso, faz 
necessário o uso da microscopia. 
 
 
Eosina → Ácido VOGAIS 
Logo, tem afinidade por estruturas básicas. 
Cor alaranjada/rosinha 
 
Hematoxilina → Básico CONSOANTES 
Logo, tem afinidade por estruturas ácidos. 
Cor roxa 
 
 
 
 
–
→ Corantes especializados que diferenciam componentes fibrosos da matriz extracelular. 
→ Sais metálicos que se precipitam nos tecidos. 
Técnica de coloração Histoquímica: A técnica visa contrastar as estruturas através da diferença de 
afinidade que o colorante tem com as estruturas. 
Técnica de coloração Imunocitoquímica: Utiliza a especificidade dos anticorpos para a localização de 
moléculas ou regiões moleculares. Para tal, é necessária a marcação dos anticorpos com marcadores 
detectáveis. 
→ Direta: Quando o anticorpo é marcado por um marcador e pode ser observado 
imediatamente. 
→ Indireta: Quando o anticorpo primário não pode ser diretamente marcado (devido à perda 
de função), é utilizado um anticorpo secundário para a localização do anticorpo primário. 
 
Microscópio Óptico: 
→ Possui uma parte mecânica (suporte) e uma parte óptica (condensador, objetiva e ocular) 
→ O condensador emite um cone de luz que atravessa a lâmina, penetra na objetiva e produz uma 
imagem aumentada que se projeta na ocular e é novamente aumentada. 
→ A ampliação dada é igual a ampliação da objetiva x ampliação da ocular. 
→ Limite de resolução depende a objetiva. 
→ Ocular não acrescenta detalhes, apenas amplia a imagem. 
Microscópio Eletrônico: 
→ Os elétrons são produzidos pelo aquecimento de um filamento de Tungstênio, entram no vácuo, 
passam por uma lente condensadora e é dirigida para o objeto que está acima da lente objetiva. A 
imagem aumentada pela objetiva é novamente ampliada e projetada em uma tela fluorescente. 
Microscópio de Transmissão: alto poder resolutivo. 
Microscópio de Varredura: capaz de formar imagens tridimensionais.