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MEIO DE CULTURA Profª: Liliane Melo MEIO DE CULTURA Sistema utilizado para isolar micro-organismos em laboratório, o que permite o crescimento e multiplicação dos agentes. 2 ÁGAR Descoberto no Japão Derivado de algas Usado em alimentos MEIO DE CULTURA UM BOM MEIO DE CULTURA DEVE PREENCHER TODAS AS NECESSIDADES NUTRICIONAIS DOS AGENTES, SER ESTÉRIL E POSSUIR Ph ADEQUADO. MEIOS Os meios de cultura podem ser líquidos ou sólidos.Podem ser ainda: Não Seletivo Permitem o crescimento de um grande número de espécies. Seletivo Meio geral na qual são adicionadas substâncias que inibem ou reduzem certos grupos, salientando outros. PRINCIPAIS COMPONENTES Água destilada; Fonte de carbono ( energia: CO2, lipídeo, açúcar, álcool e outros) Fontes de Nitrogênio (crescimento: vitaminas) Extratos ( levedura, caseína do leite, hidrolisado de proteína de soja) Minerais ( P, Fe, Zn, Mn, Ca, Cu, Na) brain heart infusion 8 Eles apresentam na forma desidratada, devendo ser diluído em água deionizada. A esterilização deve ser feita em Autoclave ( 121°C-15 min.) PREPARAÇÃO E DESTRIBUIÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Os meios comerciais devem ser hidratados em pequena quantidade de água até que todo o meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante da água. Os meios preparados não comerciais, devem ser pesados separadamente em papel manteiga ou papel alumínio e adicionados em um único frasco (normalmente em béquer), hidratar em pequena quantidade de água até que todo o meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante dágua. Sempre que for necessário levar o meio para fundir, usar vidro Pyrex, aquecer sobre a tela de amianto ou similar e tripé, no bico de Bunsen. Usar sempre luvas térmicas apropriadas para laboratório para manipular vidrarias quentes; Sempre que for usado o termo "esterilizar em autoclave", o tempo de esterilização é de 15 minutos e a temperatura de 121ºC. Sempre que for usado o termo "esterilizar por filtração", usar o filtro com porosidade de 0,22 micra, recomendado para partículas bacterianas. Quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos não precisam estar esterilizados; Quando distribuir o meio após a autoclavação, os tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser estéreis. Os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilização seja por igual em todo o conteúdo dos tubos - tampas fechadas não permitem a entrada do vapor. MEIOS DE TRANSPORTE E CONSERVAÇÃO Cary-Blair Formulado a partir do meio Stuart, diferenciando na adição de solução salina de tampão fosfato inorgânico. – Transporte de material fecal. Salina tamponada Meio líquido tamponado que mantém a bactéria viável. – Transporte de material fecal. Meio Stuart Transporte de diversos materiais e conseqüente conservação dos microorganismos. Ágar Nutriente Uso mais freqüente é para a conservação e manutenção de culturas em temperatura ambiente. A carência de uma fonte de nitrogênio impede consideravelmente a multiplicação de microrganismos e a composição nutritiva 11
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