identificacão de streptococcus

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Identificação de Streptococcus
Os estreptococos podem ser diferenciados de acordo com sua aparência na placa de ágar sangue após incubação a 35°C em presença de 5% de CO2, podendo apresentar: hemólise total (beta), parcial (alfa, de cor esverdeada) ou nenhuma (gama).
 A identificação de espécie de estreptococos beta hemolíticos é feita através de aglutinação com soros específicos contra os antígenos de Lancefield (A, B, C, D, F e G), que constitui uma prova rápida, porém não acessível a todos os laboratórios em virtude do elevado custo. 
Teste de Bacitracina
É importante notar que as identificações devem ser feitas em ágar sangue sem tensão de CO2 ou os resultados podem ser conflitantes. ƒ 
Semear meia placa de ágar sangue com o estreptococo a ser identificado, como para um antibiograma; ƒ 
Colocar o disco de bacitracina 0,004 u como indicado; ƒ Incubar por uma noite a 35ºC sem CO2; ƒ 
Observar qualquer zona de inibição como resultado de sensibilidade. O Streptococcus pyogenes (grupo A) é assim rapidamente identificado. 
Teste de Sulfatometozaxol Trimetropin (STX)
ƒAdicionar na mesma placa de ágar sangue o disco de SXT; ƒ Incubar por uma noite a 35°C sem CO2. 
A sensibilidade a esta droga significa que o estreptococo não pertence ao grupo A, B ou D de Lancefield. ƒ 
Colocar um disco de Bacitracina 0,004 UI à direita e um de Sulfametoxazol-trimetoprim à esquerda. ƒ
Teste do Fator Camp
Inocular uma estria única de uma amostra de Staphylococcus aureus produtor de beta hemólise no centro de uma placa de ágar sangue preparada obrigatoriamente com sangue de carneiro. 
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Inocular as amostras a serem testadas em estrias formando um ângulo reto com a linha de inoculação da amostra teste de estafilococo. As estrias não devem se tocar, ficando a 1 mm de distância.
A maneira de inocular é fundamental para a observação do efeito esperado. ƒ
Incubar a placa a 35-37°C durante um período de 18-24 horas. ƒ A positividade da prova, Streptococcus agalactiae (grupo B), é evidenciada pelo alargamento da zona de lise, que adquire a forma de ponta de flecha característica, na área de intersecção entre as duas estrias. 
Teste de Pyr
Este teste determina a atividade do PYR também chamado pyrrolidonyl-aminopeptidase, uma enzima produzida pelo Streptococcus pyogenes e também pelo Enterococcus sp. 
Esse teste é tecnicamente, equivalente à prova da hidrólise da bile esculina e crescimento em 6,5% de NaCl, usados na identificação clássica dos enterococos, e mais específico que o teste da Bacitracina na caracterização presuntiva dos estreptococos beta hemolíticos do grupo “A”, tendo a vantagem de ser mais rápido. 
Em qualquer dos dois casos, o PYR constitui uma alternativa importante para esclarecer testes duvidosos. Na impossibilidade da realização de testes sorológicos de confirmação, reforçar o valor dos testes presuntivos clássicos de identificação do Streptococcus pyogenes. 
Teste da Bile esculina e NaCl 6,5%
A prova de bile-esculina baseia-se na hidrólise de esculina em presença de. As bactérias bile-esculina positivas crescem em presença de sais biliares. A hidrólise da esculina gera glicose e esculetina. A esculetina reage com íons férricos resultando em um complexo de cor preta.
O do caldo de NaCl a 6,5 % deve mostrar turvação para ser considerado positivo.
 
Todos os estreptococos do grupo D de Lancefield apresentam a bile esculina positiva, seja Enterococcus sp ou Streptococcus do grupo D não enterococo (Streptococcus bovis). 
Quanto ao teste da tolerância ao NaCl a 6,5%, somente os enterococos são positivos. 
1- Bacitracina
2-Optoquina
3- Fator Camp
Fator Camp
Teste da hidrólise do Hipurato
Os Streptococcus agalactiae (grupo B) são também capazes de hidrolisar através de uma enzima o hipurato em seus componentes: glicina e ácido benzóico, produzindo uma cor púrpura após adição de cloreto férrico.
Teste da Bile solubilidade
O teste da bile solubilidade também identifica o Streptococcus pneumoniae. Pode ser executado em placa ou em caldo. 
Placa
Inocular gotas de desoxicolato de Sódio a 2% sobre as colônias suspeitas; ƒ Incubar a 35°C por 30 minutos. ƒ As colônias positivas irão desaparecer por lise bacteriana. 
Caldo
Tomar um caldo turvo após 3 horas de incubação a 35°C; ƒ Inocular uma suspensão de desoxicolato a 10%; • Clareamento da turbidez reflete a lise bacteriana e confere um resultado positivo à prova.