Roteiro de Prova Prática de Machos

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Roteiro de Prova Prática de Machos
Arrumando o laboratório para avaliação do sêmen
-Ligar o banho maria, centrífuga, microscópio, placa térmica, rabo quente, televisão.
-Colocar as ponteiras para pipetar, lâminas, lamínulas sobre a placa aquecida.
-Colocar água, formol e solução fisiológica no banho maria a 37°.
-Separar a câmara de Neubauer, teste de Ph, béquer, pipetas, palhetas para os exames necessários.
Colheita de Sêmen
Bovinos
Método= Vagina artificial, eletroejaculação e massagem das glândulas anexas.
Componentes= Tubo rígido com válvula, dentro do tubo tem uma mucosa de borracha e reveste dos dois lados, amarra bem dos dois lados para não vazar a água, cone e acoplada ao cone tem o tubo coletor. Por cima de tudo vai uma capa, que tem 3 funções: impedir que a luz incida sobre o tubo, mantém a temperatura, protege contra choques mecânicos. 
*O cone com o tubo coletor fica perto da válvula, para que ela fique longe do animal e não o machuque. 
*Água aquecida de 42° a 45°, pois a água aquecida e a pressão da água são o que estimula os nervos da base do pênis e faz ter a ejaculação.
*Antes de colher o sêmen tem que higienizar o prepúcio do animal, tem que cortar o pelo, lava a parte externa do prepúcio com água, seca e faz lavagem interna com pipeta e soro fisiológico, coloca dentro do prepúcio, com a outra mão fecha o canal e massageia, depois solta e vai sair um líquido turvo, faz outra lavagem e na terceira lavagem sai o líquido limpo já.
*Para usar a vagina artificial tem 3 jeitos= vaca no cio, vaca fora do cio, macho. Animais de campo não vão montar em vaca fora do cio, já animais de centrais sim.
*Tem que fazer o método da frustração(só faz em bovinos), que é a primeira monta você não encaixa a vagina, nem na segunda, só na terceira, para o macho ficar com mais vontade e ter um sêmen de melhor qualidade e volume. Tomar cuidado quando o touro acabar e der o escato(pular pra trás com as duas patas traseiras).
*Usar a vagina artificial quando o animal for dócil, se não tem que usar a eletroejaculação, prende o animal no tronco.
Ovinos e Caprinos
Método= Vagina artificial e eletroejaculação.
Componentes= Tubo rígido com válvula, dentro do tubo tem uma mucosa de borracha e reveste dos dois lados, amarra bem dos dois lados para não vazar a água, cone e acoplada ao cone tem o tubo coletor. Por cima de tudo vai uma capa, que tem 3 funções: impedir que a luz incida sobre o tubo, mantém a temperatura, protege contra choques mecânicos. 
*Antes de colher o sêmen tem que higienizar o prepúcio do animal, tem que cortar o pelo, lava a parte externa do prepúcio com água, seca.
*Água aquecida de 60° a 65°, pois eles precisam de muito estimulo, pode colocar ar também.
Equinos
Método= Vagina artificial.
Componentes= Tubo rígido com válvula, dentro do tubo tem uma mucosa de borracha e reveste dos dois lados, mucosa plástica ligada a uma garrafa térmica, pois o volume do sêmen é de 40 ml a 150ml, amarra bem dos dois lados para não vazar a água, tubo coletor. Por cima de tudo vai uma capa, que tem 3 funções: impedir que a luz incida sobre o tubo, mantém a temperatura, protege contra choques mecânicos. 
*Antes de colher o sêmen tem que higienizar o prepúcio do animal, tem que cortar o pelo, lava a parte externa do prepúcio com água, seca.
*Ele se prende a fêmea com a glande do pênis no fundo da vagina, pois a quantidade de sêmen dele é alta, depois que ele ejacular tem que tirar a água da vagina artificial pra sair a pressão e o pênis diminuir e sair.
*Tem que amarrar a cauda do animal e peiar ela.
*Água aquecida de 42° a 45°.
Cão
Método= Manipulação do pênis.
Componentes= Tubo coletor protegido por água a 37°C, dentro de mamadeira, acoplado a funil de plástico. Faz a manipulação na base do pênis, no bulbo. Tem que massagear o bulbo, quando o pênis tem ereção tem que parar a massagem, tracionar o prepúcio pra trás, depois que ele expõem o pênis, começa a fazer pressão no bulbo e aí ele começa a gotejar. São três frações, a primeira é só líquido seminal, a segunda o sêmen de qualidade e a terceira é pobre em espermatozoides.
Avaliação Macroscópica
-Aspecto= Soroso, cremoso ou leitoso.
-Cor= Branco, pérola ou amarelo.
-Odor= Suis generis.
-Volume= Ml.
-Movimento de Massa= Ausente ou presente. (Apenas em pequenos ruminantes).
-Ph= Utilizar ponteira aquecida para pipetar 20 ul de sêmen que estará no banho maria a 37°, e colocar na faixa de ra do Ph, uma gota em cada quadrado e analisar o Ph.
Avaliação Microscópica
-Turbilhonamento= Nota de 0 a 5. Colocar uma gota de sêmen na lâmina aquecida, colocar em cima da placa aquecida que fica ligada na tomada e visualizar na lente de aumento 4x. (Apenas em pequenos ruminantes).
-Vigor= 0 a 5. Força que os espermatozoides andam.PURO OU
DILUIDO
-Motilidade= 0% a 100%. Quantidade de espermatozoides que estão se movendo, não importa o lado. Colocar uma gota de sêmen na lâmina aquecida, colocar a lamínula por cima, visualizar na lente de aumento 10x.
-Movimento Retilíneo e Progressivo= 0% a 100%. Quantidade de espermatozoides que andam pra frente.
-Concentração= Câmara de Neubauer.
Proporção para diluir o sêmen:
1:10 
1:20 Cão/Equino/Suíno
1:50
1:100
1:200 Bovino
1:400
1:800 Pequenos Ruminantes
1:1000
Avaliação de Patologias
-Câmara Úmida – Fixação de lâmina= Serve para avaliar os defeitos de cauda dos espermatozoides. Colocar o sêmen diluído em formol salina a 37° na lâmina aquecida e colocar a lamínula por cima, vedar os quatro lados da lamínula com esmalte e esperar por 24 horas. Nesse exame deve ser contados 200 espermatozoides para ser avaliado.
-Esfregaço Panótico= Serve para avaliar os defeitos de cabeça dos espermatozoides. Colocar o Sêmen puro ou diluído em solução fisiológica em uma lâmina aquecida perto do lado fosco, fazer o raspado, esperar secar para que as células morram. Colocar a lâmina no corante 1 por 20 segundos e tirar por 5 segundos, colocar no corante 2 por 20 segundos e tirar por 5 segundos, colocar no corante 3 por 30 segundos, lavar a lâmina com água corrente e esperar ela secar. Nesse exame deve ser contados 200 espermatozoides para ser avaliado.
Congelação do Sêmen
Identificar= Nome – Raça – Local – Data – Partida 
Envase e Selar= Álcool polivilínico, esferas de metal e pressão.
Refrigerar à 5° na geladeira por 20 minutos.
Vapor de nitrogênio por 20 minutos, em cima das hastes. 
3,5 cm
6 cm
 Nitrogênio
Puxar as hastes para as palhetas caírem no nitrogênio a 196°