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Coletânea/Adaptação 2014: Profª. Adair Alemany Uso de animais de laboratório (45 slides) Biossegurança Legislação • Legislação brasileira para uso de animais em pesquisa e ensino: - Lei Arouca -Lei 11.794, de 8/10/2008: Estabelece critérios para a criação e para a utilização de animais em atividades de ensino e pesquisa científica, em todo o território nacional Uso de animais em Laboratório Biossegurança Com o advento dessa lei foram criados: - Concea (Conselho Nacional de Experimentação Animal); - Ciuca (Sistema de Cadastro de Instituições de Uso Científico de Animais); - CEUAS (Comissões Éticas em Uso Animal). Uso de animais em Laboratório Biossegurança • Legislação brasileira para uso de animais em pesquisa e ensino : - § 1º. A utilização de animais em atividades educacionais fica restrita a: estabelecimentos de ensino superior; estabelecimentos de educação profissional técnica de nível médio da área biomédica. Uso de animais em Laboratório Biossegurança § 2º. São consideradas como atividades de pesquisa científica: Todas aquelas relacionadas com ciência básica, aplicada, desenvolvimento tecnológico, produção e controle da qualidade de drogas, medicamentos, alimentos, imunobiológicos, instrumentos, ou quaisquer outros testados em animais, conforme definido em regulamento próprio. Uso de animais em Laboratório Biossegurança § 3º. Não são consideradas como atividades de pesquisa as práticas zootécnicas relacionadas à agropecuária. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Princípio dos 3 Rs Replace – consiste na substituição do uso de animais por modelos alternativos não sensíveis, sempre que possível, ou por animais com sistema nervoso menos desenvolvido. Dessa forma, a lei vigente no país criou uma câmara permanente intitulada Métodos Alternativos, para a validação e a divulgação desses métodos. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Exemplos de métodos de substituição ao uso animal: Modelos computacionais e matemáticos; Teste in vitro; Cultura de células; Modelos e simuladores mecânicos; Filmes e vídeos interativos para demonstração em aulas. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Reduce – consiste na redução do número de animais por experimento, sem prejudicar a qualidade do resultado experimental. Esta pode ser obtida, por exemplo, com cálculos amostrais bem definidos e com a escolha do melhor modelo biológico a ser utilizado. Para o tratamento estatístico, podem ser considerados testes-pilotos, que muitas vezes, definem com mais precisão o número de animais a serem utilizados. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Refine – Os cientistas propõem que as técnicas e os procedimentos que serão realizados nos animais sejam menos invasivos e o mais refinados possível, sendo capazes de reduzir a dor, a angústia e o sofrimento animal. Esse refinamento abrange protocolos experimentais bem definidos de anestesia, analgesia, assim como a utilização, sempre que necessário, de anti-inflamatórios e antibióticos, no pré e no pós-cirúrgico. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Comportamento de ratos e camundongos Hierarquia social Cada animal tem seu papel como dominante ou dominado; Agressividade Entre ratos; Camundongos; Disputa por território; Mudança de grupo entre os machos; Defender filhotes entre as fêmeas. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Postura Em pé na gaiola, para exploração de ambiente e luta Uso de animais em Laboratório Biossegurança Coprofagia Ingestão das fezes Uso de animais em Laboratório Biossegurança Limpeza A secreção oleosa produzida pelas glândulas da pele é distribuída pelo corpo, mantendo a pelagem limpa e com brilho. A falta desse hábito indica que o animal está com algum problema. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Porfirina Pigmento de coloração avermelhada nos olhos e no nariz, indica sofrimento ou estresse. Pode ocorrer pela liberação da amônia no ambiente decorrente da falta de troca das gaiolas, pela falta da ventilação ambiental ou pela liberação de gases irritantes produzidos por produtos de limpeza. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Uso de animais em Laboratório Biossegurança Brincadeiras Espaço suficiente na gaiola Uso de animais em Laboratório Biossegurança Barbeamento Realizado pelo dominante pelo excesso de animais na mesma gaiola, idade de desmame ou dieta. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Comportamento materno Amamentação – 18 horas por dia; Lamber os filhotes (vias respiratórias e digestórias); Colocar os filhotes no ninho; Uso de animais em Laboratório Biossegurança Manuseio dos Neonatos Rápido, durante a troca das caixas. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Alojamento dos animais Devem ser alojados em grupo Enriquecimento Físico Estrutura adequada na gaiola, traz mais benefícios para os animais. Existem diversos tipos de enriquecimento para animais de laboratório que podem ser improvisados ou que são comercializados. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Rato em tubo de PVC Fêmea com filhotes em tubo de PVC Uso de animais em Laboratório Biossegurança Iglu para camundongos Abrigos para camundongos Uso de animais em Laboratório Biossegurança Algodão para construção de ninhos Uso de animais em Laboratório Biossegurança Papel-toalha na gaiola dos camundongos Uso de animais em Laboratório Biossegurança Máscara descartável amarrada na grade das gaiolas de camundongos Uso de animais em Laboratório Biossegurança Papel picado colocado na gaiola Uso de animais em Laboratório Biossegurança Imobilização e Contenção dos animais Troca de gaiolas Ratos – deve-se suspender o animal com as mãos atrás das patas dianteiras e da cabeça, pelo meio do corpo. Não é recomendável o manuseio pela cauda. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Camundongos - São manuseados pela base da cauda. Se o trajeto for longo, deve-se apoiar o animal Uso de animais em Laboratório Biossegurança Procedimentos para contenção dos animais Ratos Segurando o pescoço do animal com os dedos indicador e médio; Envolvendo-lhe o dorso abaixo dos membros anteriores. Uso de animais em Laboratório Biossegurança Contenção manual para ratos puxando-lhe toda a pele do dorso Uso de animais em Laboratório Biossegurança Contenção de camundongo puxando-lhe a pele do dorso Uso de animais em Laboratório Biossegurança Contensores artificiais Ratos Camundongos Uso de animais em Laboratório Biossegurança Uso de animais em Laboratório Principais vias de administração de substâncias Oral – substância misturada na comida ou água Subcutânea – raramente dolorida Biossegurança Uso de animais em Laboratório Intramuscular – para pequenos volumes Biossegurança Uso de animais em Laboratório Endovenosa – diretamente na corrente sanguínea Cauda de camundongo Cauda de rato Biossegurança Uso de animais em Laboratório intraperitoneal 3 1 2 4 Posição nº3 melhor local Injeção em ratos Injeção em camundongos Biossegurança Uso de animais em Laboratório intranasal Biossegurança Uso de animais em Laboratório Coleta de sangue – Não terminal Retro-orbital – procedimento não recomendado, sua utilização necessita ser bem justificada. Biossegurança Uso de animais em Laboratório Mandibular – limitada a camundongos adultosBiossegurança Uso de animais em Laboratório Veia safena – Utilizado para camundongos e ratos. Não necessita processo anestésico e o animal deve ser efetivamente contido. Veia safena lateral Biossegurança Uso de animais em Laboratório Veia da cauda – Pode ser realizado em camundongos e ratos, qualidade da amostra variável Biossegurança Uso de animais em Laboratório Punção cardíaca – Utilizado em camundongos e ratos e necessita anestesiar o animal. Coleta de sangue – Terminal Biossegurança Uso de animais em Laboratório Aorta abdominal Biossegurança Fontes de Pequisa / Coletânea •MASTROENI MF. Biossegurança aplicada a laboratórios e serviços de saúde. 2ª edição, Editora Ateneu, 2005. • BINSFELD PC. Biosseguranca em biotecnologia. Editora: Interciência, 2005. • HIRATA MH ; MANCINI FILHO J. Manual de biosseguranca. Editora: Manole, 2002. • Manual de Cuidados e Procedimentos com Animais de Laboratório do Biotério de Produção e Experimentação da FCF-IQ/USP Slides: Profª Drª Luciana Mantzouranis
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