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MICROBIOLOGIA Metabolismo e crescimento bacteriano Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Fisiologia e metabolismo bacteriano A manutenção da vida bacteriana, assim como seu crescimento, requer condições ideais. Cada espécie bacteriana requer fatores gerais, específicos e em proporções diferentes. Estas condições envolvem: • Obtenção de macro e micronutrientes; • Temperatura; • pH; • Respiração; • Umidade; • Luz; • Obtenção de energia. https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/8/82/E_coli_at_10000x.jpg O metabolismo bacteriano é o resultado das reações anabólicas e catabólicas bacterianas. Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Nutrição bacteriana Para que as funções fisiológicas bacterianas ocorram, são necessários água, fatores de crescimento e nutrientes, entre outros fatores. Alguns nutrientes são requeridos por todas as espécies e outros de forma específica. Os nutrientes são classificados como macronutrientes, micronutrientes e fatores de crescimento. MICRONUTRIENTES MACRONUTRIENTES FATORES DE CRESCIMENTO NUTRIENTES Nutrientes requeridos em grande quantidade. Ex.: carbono, oxigênio, hidrogênio, nitrogênio e enxofre. Nutr ientes requeridos em pequena quantidade e por algumas bactérias. Ex: manganês, zinco, potássio, sódio, cloro, cobre, molibdênio, selênio e outros. Nutrientes necessários ao crescimento bacteriano. Ex: vitaminas, aminoácidos e nucleosídeos. Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Obtenção de energia As bactérias autotróficas produzem seu próprio alimento com uso de dióxido de carbono (CO2). As bactérias heterotróficas utilizam compostos orgânicos como fonte de energia. Bactérias, em geral, obtêm energia pela oxidação de substratos. • Fototróficas – utilizam luz como fonte de energia. • Quimiotróficas – utilizam compostos químicos como fonte de energia. http://estudmed.com.sapo.pt/microbiologia/metabolismo_bacteriano.htm De forma geral, quanto à forma de obtenção de energia, as bactérias são: Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Temperatura bacteriana De acordo com a faixa de temperatura metabólica, as bactérias do Domínio Eubactéria são classificadas em: psicrófilas, mesófilas e termófilas. As bactérias hipertermófilas fazem parte do Domínio Archea. A maior parte das bactérias patogênicas para o homem é mesófila. A faixa de temperatura de cada grupo varia de acordo com o autor. • Psicrófilas → abaixo de 150C • Mesófilas → entre 250C e 400C • Termófilas → entre 600C e 800C • Termófilas extremas/Hipertermófilas → acima de 850C Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I • Toda bactéria apresenta uma temperatura ideal de crescimento • Refrigeração: A refrigeração inibe o metabolismo de bactéria que crescem melhor no calor • Classificação das bactérias quanto à temperatura de crescimento: • Psicrófilas • Psicrotróficas • Mesófilas • Termófilas • Hipertermófilas TEMPERATURA Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I pH bacteriano O pH do meio também é importante para o crescimento bacteriano. Cada espécie bacteriana apresenta uma faixa de pH ideal para seu metabolismo, podendo ser: acidófilas, neutrófilas e alcalinófilas. A maior parte das bactérias patogênicas para o homem é neutrófila. http://image.slidesharecdn.com/ crescimentobacteriano-140718064655-phpapp01/95/noes-bsicas-do- crescimento-bacteriano-16-638.jpg?cb=1405666083 Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Respiração bacteriana De acordo com o uso de gás oxigênio e o padrão respiratório, as bactérias são classificadas em aeróbias e anaeróbias. As bactérias aeróbias usam gás oxigênio (O2) em diferentes teores de disponibilidade em sua respiração e as anaeróbias não o utilizam. Não usam, mas suportam a atmosfera de O2. AERÓBIAS ANAERÓBIAS ESTRITAS MICROARERÓFILAS FACULTATIVAS AEROTOLERANTES ESTRITAS Utilizam altos teores de O2. Utilizam baixos teores de O2. Na ausência de disponibilidade de O2, fazem fermentação. São consideradas aeróbias ou anaeróbias facultativas. Morrem na presença de O2. Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Reprodução bacteriana • Crescimento microbiano é o aumento na quantidade de células. • O crescimento ocorre por divisão binária (fissão binária). • Bactérias formam colônias e estas podem ser vistas a olho nu. • Cada bactéria possui taxa de crescimento e tempo de geração específicos. http://gerencia.ambientebrasil.com.br/midia/ imagens/81.gif http://static.hsw.com.br/gif/bacteria-2.jpg VARIAÇÃO NA FORMA, ELEVAÇÃO E MARGEM DAS COLÔNIAS http://lh4.ggpht.com/-0lnFKtdgXYo/UgGjyVg1FzI/AAAAAAAAOa8/csgOUZ-zDK8/colonia%25255B2%25255D.png?imgmax=800 Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Crescimento bacteriano • Taxa de crescimento – variação na quantidade de células por unidade de tempo. • Geração – intervalo em que uma célula origina duas novas. • Tempo de ge ração – t empo necessár io para a população bacteriana dobrar em número. • Crescimento exponencial – padrão em que o número de células é duplicado a cada período de tempo (2, 22, 24, 28,...) http://www.ebah.com.br/content/ ABAAAeu6QAE/fisiologia-microbiana? part=2 Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Curva de crescimento Em meio de cultura (sistema fechado), o crescimento bacteriano ocorre em etapas, denominadas: Fase lag, Fase log (ou exponencial), Fase estacionária e Fase de declínio (ou morte). N º de b ac té ri as Tempo (h) Lag Log Estacionária Declínio Fase Lag → Período de repouso e adaptação ao meio. Fase log ou exponencial → Período de divisão celular intenso. Fase estacionária → Período de equilíbrio, em que a quantidade de células novas equivale a de células mortas. Fase de declínio ou morte → Período com progressão de células mortas. Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Endósporos bacteriano Formadas por bactérias dos gêneros Clostridium e Bacillus, principalmente, em condições de carência de nutrientes e água. Podem permanecer por muitos anos de forma latente e, ao entrarem no organismo vivo, voltam à forma viva (vegetativa). http://ccgb.fiocruz.br/imgs/ccgb01.jpg Endósporo CÉLULA VEGETATIVA •Úmida •Metabolismo ativo •Pouco resistente ENDÓSPORO •Seco •Metabolismo inerte •Resistente Microbiologia AULA 6: BACTERIOLOGIA I Endósporos bacteriano Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Meios de cultura • O cultivo bacteriano pode ser realizado, fornecendo as condições ótimas para cada espécie bacteriana. • Os meios de cultura são substâncias suplementadas de nutrientes e elementos químicos, necessários ao metabolismo bacteriano. • Existem meios de cultura sólidos, líquidos ou semissólidos. • Os meios sólidos, em geral, são produzidos com a alga Agar agar e são específicos para gêneros ou espécies bacterianas. MEIO SÓLIDO MEIO LÍQUIDO http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/ files/2010/05/65bi.jpg http://www.prolab.com.br/blog/wp-content/uploads/2014/12/1- Meiodecultura1.jpg AULA 7: BACTERIOLOGIA II Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Meios de cultura Meios de cultura: http://www.biomedicinabrasil.com/2010/09/ meios-de-cultura.html#.Vk6QwnarTIU Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Meios de cultura Os meios de cultura podem ser enriquecidos, seletivos, diferenciais e redutores. Exemplos de meios de cultura: •Ágar sangue de carneiro •Ágar chocolate •Ágar manitol salgado •Ágar Mac Conkey •Ágar Mueller-Hinton, •Ágar salmonella-shigella Meios de cultura http://www.ufjf.br/microbiologia/files/2012/11/Meios-de-cultura-usados-no-laborat%C3%B3rio-e- colora%C3%A7%C3%B5es.pdf http://static1.squarespace.com/static/50e713f4e4b0888041877c38/t/524c4699e4b0ad97e93c2591/1432216489782/iStock_000019289346Large.jpg AULA 7: BACTERIOLOGIA II Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Meios de cultura http://www.cenapro.com.br/images/noticias/beleza-eswcondida-escola-focus.jpg Arte em meios de cultura: http://www.microbialart.com/galleries/ Crescimento bacteriano em diferentes meios de cultura AULA 7: BACTERIOLOGIA II Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Coleta de material Para a identificação bacteriana, é necessário a coleta do material. Em geral, a coleta de superfícies é feita com swab estéril. Urina e secreções são coletados em frascos, e sangue em tubos ou frascos de hemocultura. https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=3562 https://www.bd.com/scripts/brasil/productsdrilldown.asp? CatID=115&SubID=308&siteID=10056&d=brasil&s=brasil&sTitle=&metaTitle =Microbiologia&dc=brasil&dcTitle=BD+-+Brasil Coleta com swab Frascos de hemoculturaColeta de hemocultura http://www.sciencecodex.com/aggregated-images/tech/ jIv3x1W938BxXzHX.jpg Coleta com frascos Microbiologia AULA 7: BACTERIOLOGIA II Identificação bacteriana A identificação da espécie bacteriana pode ser feita por meio de testes bioquímicos, sistema automatizado, sistema API (Analytical Profile Index), laminocultivos ou culturas indicadoras. http://www.biomerieux.pt/upload/API_ID41.jpg http://www.interlabdist.com.br/produtos/ mostra_produto/1573,urilab-cromoclin-trio-c10un http://images.slideplayer.com.br/18/5764974/slides/ slide_1.jpg Testes bioquímicos Sistema API laminocultura
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