Prévia do material em texto
1 FACULDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS DE LEOPOLDINA CURSO DE BIOMEDICINA DISCIPLINA DE HISTOLOGIA BÁSICA Vanessa Pinho Ribeiro, PhD 2019 MICROSCÓPIO DE LUZ DE CAMPO CLARO: ESTRUTURA, CARACTERÍSTICAS E MANEJO MICROSCÓPIO DE CAMPO CLARO: CARACTERÍSTICAS_____ 2 PARTE MECÂNICA • Base (ou pé) • Braço • Tubo (ou canhão) - Ligação da ocular ao revólver • Revólver - Suporte das lentes objetivas - Movimento giratório • Mesa (ou platina) - Apoio da lâmina a ser observada. - Sistema de pinças - Fixa a lâmina. • Charriot - Ajusta o campo visual para observação do material. - Movimenta a mesa na horizontal e na vertical. charriot Sustentação e suporte MICROSCÓPIO DE CAMPO CLARO: CARACTERÍSTICAS_____ PARTE MECÂNICA • Parafuso Macrométrico - Proporciona movimentos de grande amplitude. - Permite a focagem do material. • Parafuso Micrométrico - Proporciona movimentos de pequena amplitude. - Permite ajustar o foco ideal para o observador. • Fonte de iluminação - Lâmpada de halogênio charriot MICROSCÓPIO DE CAMPO CLARO: CARACTERÍSTICAS_____ 3 PARTE ÓPTICA MICROSCÓPIO DE CAMPO CLARO: CARACTERÍSTICAS_____ • Condensador - É uma lente que converge os raios luminosos para o material. - Local onde se localiza o diafragma. • Diafragma - Permite regular a quantidade de luz que chega ao material. A fonte de luz emite um raio de luz→ passa pelo condensador→ pelas objetivas → pelas oculares → chega ao olho do observador. Entre o condensador e as objetivas é posicionado o objeto a ser observado. PARTE ÓPTICA MICROSCÓPIO DE CAMPO CLARO: CARACTERÍSTICAS_____ • Lentes Objetivas - São Voltadas para o material a ser observado. - Estão fixadas no revólver. - Ampliam e projetam a imagem do material em direção à lente ocular. - Conforme se gira o revólver, muda-se a posição das objetivas. - Ampliação da imagem do seu material em: 4x, 10x, 20x , 40x ou 100x • Lentes Oculares (Funciona como uma lupa) - São voltadas para o observador. - Amplia a imagem obtida pela objetiva em 10 ou 12 x. 4 100x = Linha branca (ou preta) 40x = Linha Azul clara 10x = Linha Amarela 4x = Linha Vermelha AN = 1,25 AN = 0,10 AN = 0,25AN = 0,65 Abertura Numérica (AN) - Quantidade de luz que efetivamente penetra na objetiva. - Quanto maior for a abertura numérica, maior é o poder de resolução da objetiva. INFORMAÇÕES NA OBJETIVA MICROSCÓPIO DE LUZ: LENTES OBJETIVAS______________ CÁLCULO DA AMPLIAÇÃO DA IMAGEM _________________ Ampliação da OBJETIVA x Ampliação da OCULAR (=10x) CÁLCULO DA AMPLIAÇÃO DA IMAGEM Estrutura microscópica de uma folha OCULAR OCULAR OCULAR 5 MANUSEIO DO MICROSCÓPIO Oculares Tubo ou canhão Revólver com objetivas Coluna Mesa ou platina diafragma condensador Fonte de luz charriot Parafuso Macrométrico Parafuso Micrométrico - Ao pegar a lâmina, segure-a na parte fosca, onde está identificado o tipo de espécime a ser avaliado, para evitar a presença de marcas de digitais sobre o preparado, que dificulta bastante a focalização e ajuste da imagem. - Segure a lâmina com uma mão e com a outra mão, levante a pinça da mesa para fixar lâmina. Isto evita que a lâmina se solte durante a movimentação da mesa. COLOCAÇÃO DA LÂMINA NO MICROSCÓPIO _____________ 6 charriot PINÇA CENTRALIZE O CORTE NO MEIO DO CAMPO, UTILIZANDO O CHARRIOT. charriot GIRE O REVÓLVER DE MODO QUE A MENOR LENTE OBJETIVA FIQUE APONTADA PARA A MESA ASSIM MAIOR ÁREA DA LÂMINA SERÁ FOCALIZADA POSICIONAMENTO DA LÂMINA NO MICROSCÓPIO _______ • Com o parafuso macrométrico, elevar a mesa ao máximo. • Neste momento não utilize a ocular! • Aproxime a objetiva da lâmina, movimente a mesa cuidadosamente, e mantenha uma certa distância a fim de evitar que a objetiva toque na lamínula. • Caso aproxime demais a objetiva, a lâmina poderá quebrar!!! • Ligue o microscópio com baixa intensidade de luz. Botão liga/desliga fonte de luz Botão liga/desliga fonte de luz Intensidade da fonte de luz POSICIONAMENTO DA LÂMINA NO MICROSCÓPIO _______ 7 1. Tomar a lâmina com a lamínula para cima e colocá-la na platina, prendendo-a com os grampos. 2. Movimentar o revólver, colocando em posição a objetiva de menor aumento (4X). 3. Movimentar o charriot, fazendo com que o preparado fique embaixo da objetiva (centro do campo visual da lente). 4. Com o parafuso macrométrico, elevar a platina ao máximo, observando que a objetiva não toque na lamínula, pois poderá quebrá-la. 5. Ligar o microscópio e ajustar o sistema de iluminação. 6. Abrir o diafragma e colocar o sistema condensador – diafragma na posição mais elevada 7. Posicionar os olhos na ocular e movimentar lentamente o parafuso macrométrico (abaixando a platina), até que se possa visualizar a imagem e focalizar a preparação. 8. Movimentar o parafuso micrométrico para aperfeiçoar o foco. 9. Caso haja a necessidade de visualização do tecido em maior aumento, movimentar o revólver, colocando em posição a objetiva de 10X (aumento médio). FOCALIZAÇÃO DO CAMPO NO MICROSCÓPIO ___________ 10. Ajustar o foco com o parafuso macrométrico e aperfeiçoar o foco com o parafuso micrométrico. 11. Caso haja a necessidade de visualização do tecido em maior aumento, movimentar o revólver, colocando em posição a lente objetiva de 40X (aumento grande). 12. Aperfeiçoar o foco com o parafuso micrométrico (não se utiliza mais o parafuso macrométrico),desde que a imagem esteja em foco com a objetiva 10X FOCALIZAÇÃO DO CAMPO NO MICROSCÓPIO ___________ Objetiva de 40x - Mexer apenas no parafuso micrométrico para ajustar o foco para o observador. Objetiva de 100x - É uma objetiva de imersão. - Deverá ser usada SOMENTE com aplicação do óleo de imersão sobre a lâmina, caso contrário será danificada. 8 ✓ Gire as lentes objetivas até que a de menor ampliação fique apontada para a mesa. DESLIGANDO O MICROSCÓPIO ________________________ ✓ Reduza a intensidade da luz. ✓ Desligue o equipamento. ✓ Cubra-o com a capa protetora. POEIRA E OUTRAS PARTÍCULAS FLUTUANTES DETERIORAM AS LENTES!!! LENTES SUJAS ✓ Nunca usar tecido que solte fiapos (ex: algodão) ✓ Limpar apenas com álcool-éter. ✓ Usar papel apropriado para limpeza das lentes. 1 - Não manusear o equipamento com as mãos sujas ou molhadas. 2 - Nunca forçar o microscópio ou suas partes. Todas as conexões devem funcionar suavemente. 3 - As lentes da objetiva nunca devem tocar a lâmina. Portanto, nunca focalizar levantando a platina com o parafuso macrométrico e olhando pela ocular ao mesmo tempo. 4 - Manter a platina sempre limpa e seca. 5 - Retire a lâmina do microscópio após o uso. Descarte ou guarde as mesmas em recipiente apropriado, a ser indicado pela professora. 6 - Habitue-se não deixar a fonte de luz acesa quando não estiver utilizando microscópio. 7 - Não tocar as lentes. Se estiverem sujas, peça a limpeza para a professora ou monitora da disciplina. CUIDADOS COM O MICROSCÓPIO _____________________ 9 Até a próxima aula, pessoal!