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RELATÓRIO DE GENÉTICA - EXTRAÇÃO DE DNA, COLORAÇÃO DE GRAM E VISUALIZAÇÃO DE CROMATINA SEXUAL. Professor(a) : Regiane Alunos(a) : Daniel Sampaio e Souza Roselina Barbosa Lislane dos Santos Francisco Célio Kahlil Rodrigo Luana Gomes 1)INTRODUÇÃO A cromatina sexual (corpúsculos de baar) é encontrado em indivíduos do sexo feminino , genótipo XX dos genes sexuais, visível nas células somáticas durante a intérfase. O corpúsculo de barr é compensação natural para dupla carga genética dos indivúduos femininos da espécie humana. É visualizada na periferia da célula conforme a imagem abaixo : 2)MATERIAL E MÉTODO MATERIAL 2x Espátulas 2x lâminas 1xBecker Alcool Etílico Cresil Violeta HClN5 Alcool/Eter MÉTODO A) CONFECÇÃO DO ESFREGAÇO 1-Dois alunos doarão seu material, retirado da mucosa bucal preferencialmente uma pessoa de sexo feminino e outro masculino. 2-Retirar da bochecha com movimento rotatório com auxílio de espátula. 3-As lâminas deverão ser identificadas com letra legível e deverá ser feito um esfregaço com a lâmina ao uso da espátula usado para retirar o material da mucosa bucal. B) COLORAÇÃO DA LÂMINA 1-Fixar por 30min no P.A e Éter (Solução de Alcool-éter - 1:1) 2-Retirar a lâmina do fixador e colocar por 10 min em HCL SN 3-Retirar a lâmina do HCL 5N, lavar bem em água corrente e deixar secar 4-Mergulhar a lâmina por 15 min. em corante Cresil Violeta a 1% ou Violeta Cristal a 1% 5-Retirar a lâmina do corante e mergulhar rapidamente em Álcool Absoluto e deixar a lâmina secar 6-Após este procedimento a lâmina está pronta para uso, as foi decidido aguardar 1 semana para sua verificação 7-Leitura da lâmina em objetivo de imersão de 100x 3)RESULTADOS E DISCUSSÃO Após aguardar 1 semana foi verificado a lâmina que correspondia à cromatina sexual e os cromossomos masculino e feminino sob coloração de Giensa, todavia não eram as lâminas confeccionadas em sala e estas haviam sido confeccionadas de outra forma : foi realizado o esfregaço e elas haviam sido tratadas por queda celular com a atividade da força gravitacional, o que explica o rompimento de algumas células.Dentre as lâminas fabricadas, foi observado uma célula somática feminina que continha o corpúsculo de Baar que é encontrado em indivíduos do genótipo XX dos genes sexuais. Esse se condensa de modo a ficar inativo evitando assim a carga dupla da expressão genética, o que causaria impasses metabólicos caso dois cromossomos sexuais X fossem expressados, fora isso também foi observado a presença do núcleo da célula. Na outra lâmina, que correspondia ao cromossomo masculino foi observado vários fragmentos de cromossomos masculinos dispersos no local de foco da lâmina, estes encontravam-se com uma coloração característica violeta , o que devia ser consequência do tratamento pela coloração, mas também a densidade molecular e suas interações moleculares justificam a coloração densa observada. 4)CONCLUSÃO Portanto, a importância da cromatina sexual está no fato de através dela diferenciarmos as células masculinas das femininas e também identificarmos a ocorrência de síndromes ou anomalias cromossômicas sexuais. Onde suas anomalias podem acarretar em doenças como a Síndrome de Klinefelter.O indivíduo portador da síndrome de Klinefelter apresentará cromatina sexual positiva. O cariótipo mais comum da síndrome de Klinefelter é 47XXY e exibe 1 corpúsculo de Barr, porém pode apresentar múltiplos corpúsculos.
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