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Centro Universitário Estácio de Belo Horizonte Unidade Floresta Fundamentos de Microbiologia e Imunologia RELATÓRIO Aula Prática no. 5 - Antibiograma – Teste de sensibilidade dos microrganismos aos agentes antimicrobianos 3° Período/ Turma: 323/Enfermagem Matutino BELO HORIZONTE, ABRIL DE 2019 SUMÁRIO 1 – INTRODUÇÃO ..................................................................................... 3 2 – OBJETIVOS .......................................................................................... 4 3 – MATERIAIS UTILIZADOS ..................................................................5 4 – RESULTADOS E DIRCUSSÃO .......................................................... 6 5 – CONCLUSÃO ....................................................................................... 7 6 – BIBLIOGRAFIA ................................................................................... 8 1 – INTRODUÇÃO O sucesso na terapêutica antimicrobiana de uma infecção bacteriana depende da sensibilidade do agente á droga utilizada; Algumas bactérias apresentam um perfil de sensibilidade previsível e constante, no entanto muitas outras são altamente suscetíveis ao desenvolvimento ou aquisição de resistência a diversos antimicrobianos. Atualmente, o uso adequado e criterioso de antimicrobianos é muito importante para prevenção da seleção de amostras bacterianas multirresistentes. O teste de sensibilidade a antimicrobiano ou antibiograma permite o esclarecimento objetivo do perfil de sensibilidade do patógeno e a utilização de drogas eficazes no tratamento. O antibiograma ou TSA é indicado para qualquer microrganismo relacionado ao processo infecioso, mas principalmente aqueles cuja sensibilidade a drogas normalmente empregadas na terapia não seja previsível como por exemplos: S. aureus, bacilos gram negativos não fermentadores (Pseudomonas), bacilos Gram negativos fermentadores (enterobactérias) etc. A seleção dos antimicrobianos para a realização dos antibiogramas de rotina deve seguir a alguns princípios. Uma das estratégias adotadas é o recolhimento que alguns agentes antimicrobianos podem ser agrupados em classes, baseando-se no espectro de atividade. Assim, um só representante de classe necessita ser testado, a não ser quando dentro de uma mesma classe de antimicrobianos não exista a possibilidade de equivalência. 2 – OBJETIVOS Inibir o crescimento de bactérias em cultura, essencial na escolha do agente a ser usado na terapia do doente. 3 – MATERIAIS UTILIZADOS 1 Cultura bacteriana crescida por 18 horas (105 células por mL); 1 Placa com meio de cultura Muller-Hinton); Embalagem com discos de antibióticos; 1 swabs e 1 pinça esterilizados; 1 Bico de Bunsen; 1 caixa de Fósforo; 1 Estante para tubos de ensaio; 1 Frasco de Solução Fisiológica; 1 Alça de platina 50ml; 1 Tubo de ensaio com tampa de rosca. 4 – RESULTADOS E DISCUSSÃO Com a alça de semeadura, transfere-se 3 a 4 colônias com a mesma morfologia e inocula-se em 2,0 a 3,0 mL de solução fisiológica estéril, caldo MH ou caldo TSB. Aguarda-se 15 minutos observando a turbidez da solução. Utiliza-se como referência de turbidez o tubo 0,5 da escala de McFarland. Com um swab estéril, semeia-se a solução no Agar Mueller - Hinton. Aguarda-se 5 minutos à temperatura ambiente para que o inócuo seja completamente absorvido pelo ágar. Coloca-se o disco com o auxílio de uma pinça previamente flambada. Os discos devem ter uma distância de 2,5cm - Máximo de 12 discos em placas de 15 cm e 5 discos em placas de 9 cm Após 15 minutos da colocação dos discos, as placas são invertidas e incubadas • Incubar de 18 a 24 horas à 35 +/ - 1º C. • Medir o diâmetro dos halos. • Classificá-los quanto a resistência, sensibilidade intermediária e sensibilidade. Respostas das perguntas Que procedimentos deveriam ser tomados para a determinação da concentração inibitória mínima (MIC) dos antibióticos testados? R: Que fatores podem interferir no perfil de sensibilidade a antibióticos em uma linhagem bacteriana? Que fatores podem interferir no perfil de sensibilidade a antibióticos em uma linhagem bacteriana? R: É um exame rotineiramente feito em microbiologia clínica da capacidade de um antibiótico de inibir o crescimento de bactérias em culturas. Este teste é essencial na escolha do agente a ser usado na terapia do doente. A resistência a antibióticos expresso por uma linhagem bacteriana pode ser considerada um fator de virulência? Justifique. R: Sim, porque através dessa constatação podemos então perceber que a bactéria é resistente ao antibiótico inserido em seu meio. Podendo então entrar com outro antibiótico mais forte. Quais são os halos para os demais antibióticos (Resistente, Intermediário e Sensível), que não estão descritos na Tabela de Kirbe & Bauer acima. R: Ampicilina, Amoxicilina + Ac. Clavulânico, Cefalotina, Cefoxitina, Cefuroxina e Meropenem. 5 – CONCLUSÕES Verifica-se a presença ou ausência de halo de inibição ao redor dos discos. Medir-se o DIÂMETRO dos halos e verifica-se se o microrganismo é resistente, parcialmente resistente ou sensível. 6– BIBLIOGRAFIA As informações contidas neste relatório foram extraídas da apostila de aulas práticas – Fundamentos de Microbiologia e Imunologia (SDE3898).