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FACULDADE MAURICIO DE NASSAU BIOLOGIA MOLECULAR EDUARDO MUNIZ FARMÁCIA PCR/CROMATOGRAFIA ALESSANDRA VEIGA MENDES ARLETE NUNES DOS SANTOS CARINE SILVA DE SOUZA TAIZA SANCHES CAMPOS TATIANA MANEIRA SALVADOR/BA 2017 INTRODUÇÃO Extração de DNA O código genético humano guarda diversas informações importantes sobre cada indivíduo. Essas informações estão contidas nos ácidos nucléicos, DNA, que carrega o código genético da célula, e RNA, molécula intermediária que converte esse código em sequências de proteínas e aminoácidos. O isolamento do ácido desoxirribonucléico ou do ácido ribonucléico pode ser realizado através de vários métodos, um deles é o PCR (Proteína C Reativa). PCR é uma técnica usada com o objetivo de produzir várias cópias de uma região específica do DNA. Ela pode ser usada em clonagens de DNA, análises forenses de DNA e diagnósticos. Análise Cromatográfica ou Cromatografia A cromatografia é um processo físico-químico de separação de misturas, mais especificamente, de sólidos em uma solução (mistura homogênea de duas ou mais substâncias). Esse processo fundamenta-se no fato das substâncias presentes na mistura terem diferentes propriedades e composições, assim, a interação delas com as duas fases imiscíveis (fase estacionária e fase móvel) será diferente também. Ou seja, a velocidade com que uma migra será maior e de outra, será menor. Estas duas fases mencionadas são caracterizadas da seguinte forma: Fase estacionária: fase fixa onde a substância que está sendo separada ou identificada fixa-se na superfície de outro material. Por exemplo, um papel de filtro. Fase móvel: nesta fase as substâncias que queremos isolar são “arrastadas” por um solvente fluido, que pode ser líquido ou gasoso. Por exemplo, vapor do álcool Etílico. Visto ser uma técnica bastante versátil e de grande aplicação, existem vários tipos de Cromatografia, que são classificadas de quatro maneiras: 1. Quanto ao tipo de Sistema Cromatográfico: 1.1. Em coluna: cromatografia líquida, gasosa e supercrítica. 1.2. Planar: Centrífuga, em papel e camada delgada. 2. Quanto ao tipo de fase móvel: Cromatografia Gasosa (CG), Cromatografia Gasosa de Alta Resolução (CGAR), Cromatografia Líquida Clássica (CLC), Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e Cromatografia Supercrítica (CSC). 3. Quanto ao tipo de fase estacionária: Líquida, sólida e quimicamente Ligadas. 4. De acordo com o modo de separação: Por adsorção, por partição, por troca iônica e por afinidade. Esse processo é muito utilizado na Química para identificar substâncias orgânicas presentes nas plantas. CONCLUSÃO O objetivo da prática foi nos mostrar como ocorrem o processo extração de DNA, através do PCR, e o processo de cromatografia. Ambos são de extrema importância para o profissional farmacêutico. As técnicas permitem identificar causas de doenças genéticas, distinguir e analisar vírus e bactérias e até mesmo gerar produtos benéficos, tais como insulina, antibióticos, dentre outros. Após a realização da PCR, os produtos da reação foram analisados por eletroforese. O processo não foi bem sucedido por falta de material, o solvente utilizado estava vencido e não tinha o suficiente para realizar a atividade.