Prévia do material em texto
Laboratório de Bioquímica Clínica: Dosagem de Ferro Sérico Elaboração: Anaisa Martins Sandalo RA.:208638 Camila Almeida Reis RA.:209341 Elton Renato Bernardes RA.:206.241 Gisele A. Tanabe RA.: 150.302 Jeane O. S. Nascimento RA.: 209277 Thaís Ingrid RA.: 209511 Laboratório de Bioquímica Clínica: Dosagem de Ferro Sérico Trabalho apresentado à disciplina de Bioquímica Clínica do curso de Farmácia - Centro Universitário Católico Salesiano Auxilium - Araçatuba Prof.a Roseli Aparecida Cavestré Biondo Centro Universitário Católico Salesiano Auxilium – Araçatuba – SP CURSO DE FARMÁCIA Araçatuba – SP 2019 SUMÁRIO 1.INTRODUÇÃO O ferro é um dos micronutrientes mais estudados e melhor descritos na literatura, desempenhando importantes funções no metabolismo humano, tais como transporte e armazenamento de oxigênio, reações de liberação de energia na cadeia de transporte de elétrons, conversão de ribose a desoxirribose, cofator de algumas reações enzimáticas e inúmeras outras reações metabólicas essenciais. A maior quantidade de ferro do organismo encontra-se na hemoglobina; o restante distribui-se na composição de outras proteínas, enzimas e na forma de depósito (ferritina e hemossiderina). A deficiência de ferro é considerada a carência nutricional mais prevalente em todo o mundo, afetando principalmente lactentes, pré-escolares, adolescentes e gestantes. A anemia, diminuição anormal na concentração de hemoglobina no sangue, é considerada a principal consequência da deficiência de ferro. Em sua fase mais avançada, está associada a sintomas clínicos como fraqueza, diminuição da capacidade respiratória e tontura. Mesmo na ausência de anemia, a deficiência de ferro pode acarretar distúrbios neurocognitivos. Mas além da diminuição ferro que pode acarretar em algumas deficiências no organismo e desencadear uma anemia, o aumento de ferro também pode vir a trazer consequências como a hemocromatose caracterizada pelo acúmulo de ferro nos tecidos. Esse aumento ocorre quando o suprimento de ferro excede a necessidade do organismo. O ferro em excesso pode acumular-se em diferentes tecidos e causar lesões graves. Os tecidos mais acometidos são: coração, fígado e pâncreas podendo levar ao óbito por cirrose, hepatocarcinoma, insuficiência cardíaca ou diabetes. 2.OBJETIVO Consiste no aprendizado e desenvolvimento dos alunos na prática e realizações de exames, para calcular a dosagem de ferro sérico no soro, através do método da espectrofotometria e comparar os resultados com os valores de referência. 3.MATERIAIS E MÉTODOS 3.1 Metodologia: Goodwin Modificado O Ferro é liberado da Transferrina em meio ácido e reduzido ao seu estado ferroso por ação da Hidroxilamina. Posteriormente, reage com Ferrozine levando à formação de um complexo de cor violácea. 3.2 Reagentes Reagente Nº 1 - Tampão Redutor - Conservar entre 15 e 30°C. Contém: Ácido Succínico 250 mmol/L, Hidroxilamina 140 mmol/L, surfactante e estabilizador. Reagente Nº 2 - Reagente de Cor - Conservar entre 15 e 30°C. Contém: Ferrozine 12 mmol/L em solução de Ácido Acético Glacial. Reagente Nº 3 - Padrão - Conservar entre 15 e 30°C. Contém: Ferro 100 µg/dL. 3.3 Equipamentos e Insumos Operacionais: Espectrofotômetro ou colorímetro, banho-maria (37ºC), relógio ou cronômetro, pipetas, tubos de ensaio, estante para tubos de ensaio, Biocontrol N e Biocontrol P Bioclin. 3.4 Procedimento Iniciamos com a marcação dos tubos de ensaio; 1 branco (B), 1 padrão (P) e amostras (A). Branco Padrão Amostra Reagente n0 1 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml Água destilada 500 µl ------- ------- Amostra ------- ------- 500 µl Reagente n0 3 ------- 500 µl ------ Homogeneizamos e determinamos a absorbância da Amostra em 560 nm (540 - 580 nm), acertando o zero com o Branco. Este foi a absorbância A1. Voltamos ao tubo o branco e a amostra. Adicionamos então: Reagente de cor 1 gota 1 gota 1 gota Homogeneizamos suavemente e incubamos em banho-maria 37ºC, por 10 minutos. Determinamos as absorbâncias da Amostra e do Padrão em 560 nm (540-580 nm), acertando o zero com o Branco. Esta foi a absorbância da amostra A2. Para o cálculo dos resultados utilizamos a seguinte equação: Ferro sérico (µg/dL) = A2 – A1 x 100 Ap Valor de referência: Adulto Masculino - 65 – 170 µg/dl Feminino - 50 – 170 µg/dl Criança – 50 – 120 µg/dl 4. RESULTADOS Valores do Espectrofotômetro na primeira etapa: Absorbância da amostra (A1): 0,00 Valores do Espectrofotômetro na segunda etapa: Branco: 0 Padrão: 0,088 Amostra (A2): 0,198 Resultado do Ferro sérico 0,198-0 x 100 = 0,088 225 µg/dL 5.CONCLUSÃO Ao comparar o resultado da amostra, na qual obtivemos o valor de 225 µg/dL de ferro sérico, com os valores de referência, nos quais consideramos o valor de 50 – 170 µg/dl, pode-se observar um aumento relevante na concentração de ferro sérico no soro do paciente. O aumento de ferro no organismo pode trazer consequências como a hemocromatose, caracterizada pelo acúmulo de ferro nos tecidos. Esse aumento ocorre quando o suprimento de ferro excede a necessidade do organismo. O ferro em excesso pode acumular-se em diferentes tecidos e causar lesões graves. Os tecidos mais acometidos são: coração, fígado e pâncreas podendo levar ao óbito por cirrose, hepatocarcinoma, insuficiência cardíaca ou diabetes. Contudo, tal aumento pode dever-se a erros de pipetagem, tanto pela imprecisão do aparelho ou por falha mecânica do aluno em não utilizar o aparelho de forma adequada, uma vez que houve divergências entre os grupos que realizaram a pratica, podendo ser esta observada pela variância de absorbância da amostra padrão, assim sendo necessário a repetição do exame. 6. REFERÊNCIAS PROTOCOLOS CLÍNICOS DOS EXAMES LABORATORIAIS. Disponível em: <http://www.uberaba.mg.gov.br/portal/acervo/saude/arquivos/oficina_10/protocolos_exames_laboratoriais.pdf>. Acesso em 17/10/2019 FORTIFICAÇÃO DE ALIMENTOS COM FERRO E VITAMINA A. Disponível em: <https://docplayer.com.br/4138926-Fortificacao-de-alimentos-com-ferro-e-vitamina-a.html>. Acesso em 17/10/2019 Parâmetros para avaliação do estado nutricional de ferro. Disponível em: <http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-89102000000400019>. Acesso em 17/10/2019