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* * * Organização Gênica dos Seres Vivos Genes e Genomas de Procariotos e Eucariotos Prof. Henrique Santana Costa, M.Sc. * * * OS SERES VIVOS * * * OS SERES VIVOS Todo genoma (eucarioto ou procarioto) possui a função de servir como repositório replicativo da informação codificada pelo DNA que o constitui. Genomas procarióticos, contudo, são relativamente mais simples que genomas eucarióticos. * * * PROCARIOTO X EUCARIOTO Tamanho do genoma. Estrutura molecular. Distribuição de genes. * * * Cromossomo único → dsDNA circular Replicon Exceções Lineares Streptomyces lividans Rhodococcus fasciens Espiroquetas (Borrelia) CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Tamanho do Genoma Mycoplasma genitalium Myxococcus xanthus CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Cromossomo de E. coli Molécula de DNA fita dupla circular de 4,2 X 10³ pb. Por ser capaz de se auto-duplicar, o cromossomo bacteriano é considerado um replicon. Sua estrutura compacta dedica-se quase que exclusivamente à codificação de proteínas (genes estruturais). PROCARIOTO * * * ◙ Superposição de genes Organização gênica que permite que uma mesma seqüência codifique duas proteínas diferentes. Fenômeno freqüente em vírus, bactérias e organelas celulares (mitocôndrias). CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Códon de Iniciação → (Start Codon) Alternativo. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Alteração do Quadro de Leitura. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Colinearidade Equivalência entre a seqüência nucleotídica do gene e a seqüência de aminoácidos da proteína. Eucariotos possuem interrupções em suas seqüências nucleotídicas. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Colinearidade: Gene Proteína 3n nucleotídeos → n aminoácidos CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * GENES → EUCARIOTO X PROCARIOTO 5’ 3’ * * * GENOMA → EUCARIOTO X PROCARIOTO * * * Ausência de complemento diplóide. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO Quase todo genoma → codificação e regulação. Genoma E. coli Praticamente sem seqüências redundantes. Seqüências codificantes em ambas as fitas. Colinearidade entre genes e produtos protéicos. Unidades genéticas acessórias. * * * ◙ Organização dos genes em operons Genes que codificam produtos com funções relacionadas (componentes de uma mesma rota metabólica). Responsáveis pelo controle da expressão gênica. Mostram-se presentes apenas em procariotos. Seus produtos são regulados pela presença de substrato. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Unidades transcricionais policistrônicas (Operons). Regiões intercistrônicas → 1 a 30 pb (até 40 pb) CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Coorientação da transcrição e da replicação de genes A fim de evitar colisões entre a RNA-polimerase e o aparato protéico da replicação, as unidades transcricionais mais ativas estão orientadas em relação à origem de replicação. Replicação bidirecional → avançam em direções opostas ao longo do cromossomo (encontrando-se num sítio de terminação). CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Posicionamento de genes evolutivamente relacionados em sítios opostos do mapa genético Padrão de organização explicado (supostamente) por uma prévia duplicação do genoma. Genes que codificam proteínas envolvidas numa mesma rota metabólica. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Localização preferencial dos genes em sítios próximos à origem de replicação Maior concentração de genes próxima ao ponto no qual a replicação do DNA inicia do que próxima ao término da mesma. Aumento do nível de expressão gênica. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Elementos genéticos móveis Todo genoma de procarioto está contido num único cromossomo. Exceção → elementos genéticos móveis. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Bacteriófagos. Plasmídeos. Transposons. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Plasmídeos Elementos extra-cromossomais com capacidade de replicação autônoma constituídos por uma molécula de DNA fita dupla circular. Sua seqüência nucleotídica tem pouca ou nenhuma homologia com o cromossomo da célula hospedeira (elemento estranho a bactéria). CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO Conferem vantagens adaptativas às bactérias que os possuem. → produção de toxinas → produção de pilinas → produção de adesinas ■ Conferem resistência a múltiplos antibióticos (tornam problemático o tratamento quimioterápico de determinadas infecções.) * * * ◙ Plasmídeos Elementos extra-cromossomais com capacidade de replicação autônoma constituídos por uma molécula de DNA fita dupla circular. Sua seqüência nucleotídica tem pouca ou nenhuma homologia com o cromossomo da célula hospedeira (elemento estranho a bactéria). CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO Conferem vantagens adaptativas às bactérias que os possuem. → produção de toxinas → produção de pilinas → produção de adesinas ■ Conferem resistência a múltiplos antibióticos (tornam problemático o tratamento quimioterápico de determinadas infecções.) * * * ◙ Bacteriófagos Não possuem uma maquinaria própria (incapazes de se multiplicarem na ausência de um hospedeiro). Elementos extra-cromossomais que ganharam a capacidade de sintetizar um capsídeo protéico. Podem apresentar genomas de RNA, ssDNA circular ou dsDNA linear (colifagos). CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO Virulentos → multiplicam-se dentro da célula hospedeira dando origem a outros que são liberados após a lise celular (ciclo lítico). Temperados → podem se integrar no genoma bacteriano (linhagem lisogênica), ou entrar em ciclo lítico. * * * ◙ Bacteriófagos → replicons potencialmente letais. ◙ Plasmídeos → replicons não letais (dentro de suas células hospedeiras). CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO Etapas da infecção → colisão, adsorção e injeção do ácido nucléico. Ciclo lítico → O genoma do fago é expressado. Proteínas estruturais são sintetizadas e o genoma viral é encapsidado (produção de novas partículas virais). Ciclo lisogênico → O genoma do fago se integra, por recombinação, no genoma bacteriano. O genoma do fago pode eventualmente ser liberado (sendo capaz de iniciar um ciclo lítico). # Lisógena → Bactéria que carrega uma cópia do genoma viral integrada ao seu cromossomo. * * * ◙ Transposons → seqüências de DNA inseridas em novos sítios genômicos (catalisadas a partir de enzimas específicas - transponsases). → envolvem processos de recombinação e replicação gerando 2 novas cópias do elemento genético transponível original. # uma que permanece no sítio parental. # outra que aparece num determinado sítio alvo. Alteração da integridade de seus sítios-alvo. ativação de genes inativos deleções, inversões e fusões cromossômicas * Conferem significativa plasticidade genética nos genomas que as possuem. CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * ◙ Classificação Transposons simples (IS)→ carregam apenas a informação genética essencial para a transposição. Transposons complexos → carregam, também, informações não relacionadas a transposição . # resistência a antibióticos # capacidade de movimentação entre bactérias CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Cromossomo único → dsDNA circular Replicon Exceções Lineares Streptomyces lividans Rhodococcus fasciens Espiroquetas (Borrelia) CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * Tamanho do Genoma Mycoplasma genitalium Myxococcus xanthus CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO * * * PROCARIOTO X EUCARIOTO → cópia única (0 – 30 pb) * * * GENOMA → EUCARIOTO X PROCARIOTO * * * PROCARIOTO X EUCARIOTO * * * Número de Genes COMPARAÇÕES → EUCARIOTO Gráf1 517 4288 6340 13600 19000 30000 45000 50000 Número de Genes Plan1Mycoplama 517 E. coli 4288 Levedura 6340 Drosofila 13600 Ascaris 19000 Humano 30000 Arroz 45000 Milho 50000 Plan1 Número de Genes Plan2 Plan3 * * * Genes não interrompidos X interrompidos COMPARAÇÕES → EUCARIOTO * * * COMPARAÇÕES → EUCARIOTO Tamanho dos genes em kb * * * PARADOXO DO VALOR DE “C” * * * Presença de complemento diplóide. Quase todo genoma: não codificação e regulação. Abundância de seqüências redundantes. Seqüências codificantes em apenas uma das fitas. Existência de múltiplas cópias de algumas seqüências. Raramente apresenta unidades genéticas acessórias. CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO * * * Não há Colinearidade: Gene Proteína 3n nucleotídeos n aminoácidos CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO * * * Não há Operons. Exceção Caenorhabditis elegans Nematódeo: 25% dos genes CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO * * * CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO DNA de cópia única (45%). DNA Moderadamente Repetitivo (30%). DNA Altamente Repetitivo (25%). * * * GENOMA NUCLEAR HUMANO dsDNA. Genoma Linear. 23 cópias (46 Cromossomos). Características * * * GENOMA DE ORGANELAS dsDNA. Genoma Circular. Várias cópias por organela. Características * * * GENOMA HUMANO * * * Relacionados mas não idênticos → Globina Famílias Funcionalmente Similares CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO * * * Famílias gênicas codificadoras de RNA CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO * * * Famílias Funcionalmente Idênticas → Histonas Replicação dependente → restrito a fase S. Replicação independente → nível basal em todo CC. Replicação tecido-específico. CARACTERÍSTICAS → EUCARIOTO * * * Existem diferenças significativas entre genomas procariotos e eucariotos. Procariotos → genomas pequenos, circulares, poucos genes, operons e unidades genéticas acessórias. Eucariotos → genomas grandes, lineares, muitos genes, sem operons e sem unidades genéticas acessórias. Eucariotos apresentam genomas mais complexos que os procariotos. CONCLUSÃO
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