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Importância do DNA e Biossíntese de Proteínas

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Curso: Biomedicina Disciplina: Biologia Molecular e Biotecnologia 
Prof. Luís Eduardo M. Bizzo
1- Qual a importância do DNA para as células?
DNA > ácido desoxirribonucleico “ Adenina. citosina, guanina, timina”
O DNA é um aglomerado de moléculas que contém material genético. 
Responsável pela produção de proteínas, o DNA tem importância para toda a formação e funcionamento do ser vivo. Essas proteínas têm diversas funções: as proteínas de transporte carregam substâncias como, por exemplo, oxigênio no sangue. Anticorpos, enzimas (realizam reações químicas no corpo) ou toxinas são exemplos de proteínas produzidas graças ao DNA. 
2- Cite ao menos três diferenças entre o RNAm e o RNAt.
RNAm - é responsável por codificar as proteínas;
a classe mais heterogênea, podendo apresentar estruturas que variam de 500 até mais de 6000 nucleotídeos;
Cada trinca é denominada códon e orienta a posição dos aminoácidos para que as proteínas sejam constituídas. Leva informação do núcleo ao Ribossomo. Lê em sentido 5’3 linha e traduz em 3’5
linha.
RNAt - faz o transporte de um aminoácido específico para a síntese de proteína;
Ligam-se ao RNAm por meio de seus anticódons. 
Um RNAt com anticódon UAC, por exemplo, encaixa-se apenas no códon AUG “ iniciador” do
RNAm. Lê em trinca. UAA “ STOP”
3- Explique por que muitos polipeptídeos, ao saírem do ribossomo, ainda não serão ativos.
4- Uma molécula de DNA com a sequência 3´-TACTTGTCCGATATC-5´ sofre mutação e fica com a sequência 3´-TACTTGTCCAATATC-5´. 
Para as duas sequências, normal e mutante, escreva a sequência de dupla fita do DNA, o RNA mensageiro transcrito (utilizando esta fita como molde) e o polipeptídeo traduzido.
5- Como as células humanas podem produzir cerca de 400.000 proteínas se possuem apenas 20.000 genes?
6- Por que dizemos que o código genético é degenerado?
Significa que um mesmo aminoácido pode ser codificado por mais de um códon, mas o contrário não ocorre. 
7- Na transcrição, existe um único filamento molde?
RNA polimerase é a principal enzima de transcrição.
A RNA polimerase usa uma das fitas de DNA (a fita molde) como uma referência para fazer uma molécula de RNA nova, complementar. (Não sei se é isso)
8- Como é possível distinguir as sequencias promotoras e reguladoras?
promotor é uma região do DNA que inicia a transcrição de um determinado gene. Os promotores estão localizados perto do sítio de início da transcrição de genes, na mesma fita e a montante no DNA (para 5' da fita código). Os promotores podem ter por volta de 100-1000 pares de bases de comprimento. 
9- Explique a função do processamento que pode sofrer o pré-RNAm
10- Cite todas as etapas que ocorrem na biossíntese de uma proteína.
11- Qual a importância dos fatores de transcrição?
12- Observe o quadro com o código genético. Que diferença existe entre os códons que codificam o mesmo aminoácido? onde é mais provável que uma mutação de substituição seja silenciosa?
13- Qual a relação entre promotores e fatores de transcrição? 
14- Cite quatro diferenças entre o DNA e o RNA. 
15- Por que das três temperaturas de cada ciclo da PCR apenas uma é variável entre as reações?
16- O que é um eletroferograma?
17- Quais as enzimas envolvidas na PCR? E na Tecnologia do DNA recombinante?
18- Como uma mutação não silenciosa poderia ser visualizada em uma eletroforese?
19- Qual a importância da Biologia Molecular na Biotecnologia?
20- Por que na PCR usa-se dois primers e no sequenciamento apenas um?
21- Cite as técnicas de separação (eletroforese e cromatografia) utilizam.
Eletroforese: é uma técnica usada para separar fragmentos de DNA de acordo com seu tamanho. 
Quando um gel é pigmentado com um corante que se liga ao DNA, os fragmentos de DNA podem ser vistos como bandas, cada uma representando um grupo de fragmentos de DNA de mesmo tamanho. 
Cromatografia: é uma técnica quantitativa, tem por finalidade geral duas utilizações, a de identificação de substâncias e de separação-purificação de misturas. Separa por cor/ tamanho, do maior para o menor. Separação por afinidade, assim é possível isolar a molécula de interesse.
22- Conceitue proteínas de restrição e explique como elas são utilizadas na tecnologia do DNA recombinante.
23- Imagine que um gene de 500 nucleotídeos (pares de base – pb) de comprimento tenha dois alelos, A e a. Uma enzima de restrição corta A em dois pedaços, um de 100 e outro de 400 pb, mas não corta a. Faça um gel com a visualização de três amostras, de uma pessoa AA, outra Aa e outra aa.

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