APS GENETICA

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ATIVIDADE PRÁTICA SUPERVISIONADA 
Tecnologia Genética: diagnóstico molecular e bioinformática
	Implantação 20181
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	OBJETIVOS DE APRENDIZAGEM
	COMPETÊNCIAS RELACIONADAS
	 
	Identificar, entender, analisar, avaliar e aplicar de forma crítica os conhecimentos sobre as técnicas moleculares que permitam fornecer informações complementares ao diagnóstico clínico
	I, II, III, V, VI, VII,
	 
	 
	 
	 
	ATIVIDADES A SEREM DESENVOLVIDAS
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
	 
As Atividades Práticas Supervisionadas - APS têm seu detalhamento publicado no ambiente virtual de aprendizagem (Blackboard) da Unidade Curricular. São publicadas na primeira quinzena de aulas e devem ser realizadas pelos estudantes no decorrer do semestre letivo, em alinhamento com as aulas de processos molecuares.
 
As APS devem ser realizadas pelos estudantes no próprio ambiente virtual de aprendizagem (Blackboard) ou ter seu upload realizado lá, onde terão as rubricas de avaliação disponibilizadas após o encerramento do prazo estipulado para o estudante realizar o upload.
 
Texto Introdutório: A técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction – Reação em Cadeia da Polimerase) é atualmente amplamente utilizada para o sequenciamento de genes e diagnóstico de doenças hereditárias, identificação de impressões digitais do material genético e detecção e diagnóstico de doenças infecciosas.
Por ser um método direto de alta sensibilidade, a reação em cadeia de polimerase está sendo considerada uma grande aliada na detecção de doenças infecciosas. Sua versatilidade, que permite a aplicação em diversos materiais biológicos, aliada à rapidez de análise é outro diferencial da técnica (http://www.cjflash.com.br/cace/informe,biologia-molecular-por-pcr,7.html).
 
ATIVIDADE 1:
1) Assista os vídeos disponíveis nos links:
 
PCR: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/v/the-polymerase-chain-reaction-pcr
 
Eletroforese: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/v/gel-electrophoresis-dna
 
ATIVIDADE 2: Leia os textos disponíveis nos links:
 
Reação em cadeia da polimerase: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr
 
Eletroforese em gel:  https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/a/gel-electrophoresis
 
Sequenciamento de DNA: https://pt.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr- electrophoresis/a/dna-sequencing
 
ATIVIDADE 3: O aluno deverá responder as questões:
 
1- Qual seria o fluxo em um laboratório de biologia molecular para se obter o resultado de um paciente que está realizando uma pesquisa de bactéria por PCR?
a) Extração de DNA --> PCR --> Eletroforese
b) Eletroforese --> PCR --> Extração de DNA
c) PCR --> Eletroforese --> Extração de DNA
d) Eletroforese --> Extração de DNA --> PCR
e) PCR --> Extração de DNA --> Eletroforese
 
2- A reação da PCR consiste em amplificar um fragmento (região específica) de DNA milhões de vezes, para que isso ocorra precisamos preparar a reação previamente. Que reagentes são necessários para a montagem de uma reação de PCR?
a) água, buffer, MgCl, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA
b) água, buffer, helicase, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA
c) água, buffer, Mgcl, DNTPs, DNA polimerase, primers e DNA
d) água, buffer,  helicase, DNTPs, DNA polimerase, primers e DNA
e) água, buffer, primase, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA
 
3- Qual é o propósito para o qual a PCR é usado?
a) Analisar a expressão gênica do DNA
b) Extrair o DNA de células
c) Amplificar em fragmento específico de DNA
d) Fazer todo o processo de replicação igual a célula
e) Analisar o tRNA presentes nas células
 
4- O que acontece com o DNA quando o termociclador atinge a temperatura de 90-95 ° C por 30 segundos no primeiro passo da PCR?
a) Os primers se ligam na fica única de DNA
b) A taq polimerase sintetiza as novas fitas do DNA, utilizando os nucleotídeos provenientes da DNTP
c) Ocorre a desnaturação de proteínas
d) As fitas de DNA se separam
e) Ocorre a renaturação da molécula de DNA
 
5- As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polimerase (PCR), onde milhões de cópias do fragmento de DNA que se quer amplificar são gerados,
I. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 30s).
II. Anelamento dos iniciadores no DNA genômico (55-65ºC, 30s).
III. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 5min).
IV. Síntese do DNA pela polimerase (72ºC, 2-5 min).
 
A sequência correta da reação apresentada está na opção:
a) I - II - III - IV
b) III - II - IV- I
c) II - I - IV- III
d) IV - I -III-II
e) III - I - II - IV