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Microscopia dos Materiais Uma introdução Walter A. Mannheimer Departamento de Engenharia Metalúrgica e de Materiais Universidade Federal do Rio de Janeiro Com a colaboração de P.F.Schmidt (U. Münster, Alemanha) G.F.Vander Voort (Buehler Ltd., EUA) D.B.Williams (Lehigh U., EUA) edição da SOCIEDADE BRASILEIRA DE MICROSCOPIA E MICROANÁLISE 2002 Já há muitos anos que sentimos falta de um livro que aborde os aspectos básicos da microscopia moderna. A presente obra de Walter Mannheimer, ativo participante da comunidade de microscopistas brasileiros, vem suprir esta lacuna. O autor, pioneiro no uso da microscopia na área da Metalurgia, tem tido importante participação na Escola Politécnica (EE) e na Coordenação dos Programas de Pós-Graduação de Engenharia (COPPE) da Universidade Federal do Rio de Janeiro, tendo atuado também no Centro de Pesquisas de Energia Elétrica (CEPEL-Eletrobrás). Sua participação em várias sociedades científicas, nas agência nacionais de fomento à pesquisa científica e tecnológica, é reconhecida por todos. Ainda que o presente livro seja escrito por um microscopista que trabalha na área dos materiais e tenha o título “Microscopia dos Materiais”, ressalto que a grande maioria dos capítulos trata de aspectos básicos sobre a microscopia óptica, microscopia eletrônica de varredura e de transmissão e microanálise, também utilizadas por aqueles que trabalham com materiais biológicos. Logo, o alcance deste livro é muito mais amplo do que o indicado pelo seu título. Ressalto ainda a decisão do autor de publicar este livro sob o patrocínio da Sociedade Brasileira de Microscopia e Microanálise, e a transferência para a SBMM dos direitos autorais desta obra, apoiando mais uma vez nossa sociedade. Registro aqui os agradecimentos em nome de toda a diretoria da SBMM. Wanderley de Souza Presidente da Sociedade Brasileira de Microscopia e Microanálise Apresentação © E-papers Serviços Editoriais, 2002. Todos os direitos reservados à E-papers Serviços Editoriais Ltda. É proibida a reprodução ou transmissão desta obra, ou parte dela, por qualquer meio, sem a prévia autorização dos editores. Impresso no Brasil. ISBN 85-87922-54-8 Projeto Gráfico e Diagramação Alessandra Lofiego Capa A. Sauer Guimarães Esta publicação encontra-se à venda no site da E-papers Serviços Editoriais. http://www.e-papers.com.br E-papers Serviços Editoriais Ltda. Rua Mariz e Barros, 72, sala 202 Praça da Bandeira Cep 20.270-006 Rio de Janeiro - Brasil CNPJ 03.484.075/0001-83 MANNHEIMER, Walter A. Microscopia dos Materiais / Walter A. Mannheimer – Rio de Janeiro: E-papers Serviços Editoriais, 2002. 221 p. ISBN 85-87922-54-8 1. Microscopia – História. 2. Microscopia – Teoria Básica. I. Título. CDD 535.332 A literatura de microscopia de materiais é extremamente vasta: BibMic1 relaciona mais de 1000 livros sobre o tema. Portanto, a justificativa para a redação de mais um deve ser objeto de reflexão. Pensamos que um livro didático, redigido em português, pudesse ser útil. Durante muitos anos, ministramos na Universidade Federal do Rio de Janeiro um curso sobre Microscopia dos Materiais. Este foi concebido levando em conta o elenco multidisciplinar de estudantes de pósgraduação e pesquisa em materiais, que além dos formados nesta disciplina, incluem físicos e químicos, engenheiros diversos, e até médicos e dentistas. Um dos primeiros conceitos que procuramos transmitir a estes estudantes é o da fundamental influência da microestrutura dos materiais sobre suas propriedades. No entanto, falta-lhes em geral, uma formação prévia de microscopia, que lhes permita avaliar a aplicabilidade das diversas técnicas aos seus problemas de pesquisa. Não sendo possível formar plenamente um microscopista em um semestre (os grandes mestres dirão que toda uma vida profissional talvez seja insuficiente), concebemos o curso como destinado a “executivos da pesquisa”, capacitando-os a delinear estratégias e selecionar técnicas apropriadas. Para executá-las, será preciso muito mais do que este livro pode oferecer: ou a colaboração com um especialista, ou o aprofundamento na técnica requerida, através do estudo especializado. E como para o estudo e a pesquisa de fronteira em nosso mundo globalizado o conhecimento de lingua estrangeira (quase que certamente o inglês) se tornou indispensável, a vasta literatura internacional estará à disposição do estudante avançado. Não sendo este um livro de materialografia, mas sim de microscopia dos materiais, seu objetivo é de tratar do microscópio como instrumento e da microscopia como técnica que possam ser aplicados aos materiais. A interpretação das imagens, e sua correlação com as propriedades, além de tarefa hercúlea, excederia a escôpo a que nos propusemos. Também, e sem prejuizo da utilidade que esta obra possa ter para os interessados nas ciências biomédicas, e pela qual o autor se sentirá gratificado, sua Prefácio Parece que poucas pessoas ainda estudam microscopia (M.D.Adams, 1977) 1 “BibMic - A Bibliography of books on Materials Microscopy - a searchable database on the Internet”, http:// bibmic.metalmat.ufrj.br meta consistiu na aplicação aos materiais inertes, metais, cerâmicas e polímeros. Portanto, algumas técnicas de uso preponderante para amostras biológicas, como por exemplo contraste de fase, e deshidratação pelo ponto crítico, foram mencionadas muito superficialmente ou ignoradas, apesar de algumas referências relevantes terem sido incluidas na bibliografia. E também, sendo este um livro didático, mais do que um tratado, foi dada preferência à indicação de referências bibliográficas gerais, em relação às publicações originais. Estas, quando incluídas, o são mais com a intenção de dar crédito aos respectivos autores, e não constituem uma revisão exaustiva da literatura. A questão da nomenclatura em português é bastante espinhosa. Algumas técnicas, já bem difundidas entre nós, tiveram consagrada uma tradução correta. Outras oscilam entre adaptações duvidosas e o simples uso da palavra estrangeira, em geral o inglês. Não tivemos a ousadia de tentar sanar esta situação, mas optamos por incluir o termo inglês, sempre que este fosse a melhor solução. Com relação à miríade de siglas usados no ramo, verdadeira sopa de letrinhas, agimos de maneira semelhante, apenas transliterando aquelas já francamente em uso. A única modificação importante que reinvindicamos é a adoção de microscopia fotônica para o que se costuma denominar microscopia ótica; isto em semelhança à microscopia eletrônica, porque a ótica moderna abrange tanto a da luz visível como a dos elétrons. Trilhar o caminho que outros mil já percorreram não é fácil: é quase impossível reformular conceitos de maneira original, sem copiar, consciente ou inconscientemente, outros trabalhos. E também seria um inútil exercício de reinventar a roda. Por este motivo, optei por obter a colaboração de alguns colegas, eminentes especialistas, para alguns capítulos principais. Eles me permitiram livre acesso às suas obras, e colaboraram com a logística de figuras e micrografias. Contribuiram sobremaneira para a concretização do livro, e sou-lhes imensamente grato. Como o livro é redigido em português, meus colaboradores não puderam rever o texto. Louvei- me de seus ensinamentos, mas os erros (e deverá haver diversos) são todos meus. Apesar de alertado pela prudência de Goethe “não me faço ilusões que possa bem conhecer algo, não me faço ilusões que possa ensinar algo”, prestei também atenção à antiga cultura chinesa “se eu fosse esperar a perfeição, meu livro nunca seria terminado”. Peço a meus leitores que me auxiliem, apontando erros e oferecendo sugestões. Outros autores, instituições e pessoas prestaram auxílio valioso, e procurei relaciona-los nos Agradecimentos, desculpando-mede antemão por alguma omissão involuntária. Os meus diversos chefes, que durante anos esperaram com paciência o cumprimento desta tarefa, ficarão satisfeitos em saber que mesmo os rios mais tortuosos encontram finalmente seu caminho para o mar. E que tenham bom proveito! Walter A. Mannheimer Rio de Janeiro, Novembro de 2002 Agradeço sinceramente aos meus colaboradores, de cujas obras principais foi utilizado material nos capítulos relevantes: P.F.Schmidt (U. Münster, Alemanha) (principalmente Capítulo 7) Praxis der Rasterelektronenmikroskopie und Mikrobereichanalyse, Expert Verlag, Renningen- Malsheim, Alemanha, 1994 G.F.Vander Voort (Buehler Ltd., EUA) (principalmente Capítulos 4, 9, 12 e 15) Metallography, Principles and Practice, ASM International, Materials Park OH, USA, 1999 D.B.Williams (Lehigh U., EUA) (principalmente Capítulos 5 e 10) Transmission Electron Microscopy, Plenum Press, New York NY, USA, 1996 (com C.B.Carter) Images of Materials, Oxford UP, Oxford, UK, 1991 (editor) Practical Anlytical Electron Microscopy in Materials Science, Philips, Mahwah, NJ, USA, 1987 A redação de um livro resulta sempre em prejuízo ao convívio com a família e com os amigos. Agradeço principalmente à minha querida esposa Eva a abnegação com que suportou o longo (e às vezes aparentemente interminável) tempo de gestação do projeto. Parte deste livro foi elaborado quando o autor atuava no CEPEL - Centro de Pesquisas de Energia Elétrica (Eletrobrás), onde usufruiu de excelentes facilidades de biblioteca, fruto da visão de seus diretores, Drs. J.Lepecki e A. Mossé, a quem agradeço o apoio e continuado incentivo. Estendo meus agradecimentos aos seguintes autores e instituições identificadas no texto, que autorizaram o uso das citações: Almeida Com permissão de L.H. de Almeida, Universidade Federal do Rio de Janeiro. Berkeley Transcrito ou adaptado com permissão de Center for X-ray Optics, Lawrence Berkeley National Laboratory, USA. Buehler Transcrito ou adaptado com permissão de Buehler Ltd, Lake Bluff, USA. CAMECA Transcrito ou adaptado com permissão de Cameca, Courbevoie, França. Cressington Transcrito ou adaptado com permissão de Cressington Scientific Instruments Co., Watford, Reino Unido. Agradecimentos Easterling K.A. Easterling, J.Mat.Science 12(1977) 857-868, com permissão de Kluwer Academic Publishers. EDAX Transcrito ou adaptado com permissão de EDAX/TSL, Mahwah, USA Gifkins R.C.Gifkins, Optical Microscopy of Metals, Pitman, 1970; transcrito ou adaptado com permissão de Pearson Education Ltd. Hirsch P.B.Hirsch, Phil.Trans. Royal Soc. (London); transcrito ou adaptado com permissão do autor. Ingolic E.Ingolic, transcrito ou adaptado com permissão de Research Institute for Electron Mi- croscopy, Graz University of Technology, Autria JEOL Transcrito ou adaptado com permissão de JEOL USA e Fugiwara Enterprises, São Paulo. Kopp W.U.Kopp, K&B Grubbs Instrument, Alemanha Koreeda A.Koreeda et.al., Mater. Char. 25(1990) 375-395, adaptado com permissão de Elsevier Science. Leica Transcrito ou adaptado com permissão de Leica Microsystems, Wetzlar, Alemanha. Mayoux Com permissão de C.Mayoux et.al., Universidade Paul Sabatier, Toulouse, França. Meiji Com permissão de Meiji Techno America, San José, USA Oxford Transcrito ou adaptado com permissão de Oxford Instruments Analytical Ltd., Reino Unido. Philips Transcrito ou adaptado com permissão de FEI Electron Optics, Eindhoven, Holanda. Simão Com permissão de R.A.Simão e C.A. Achete, Universidade Federal do Rio de Janeiro Southbay Transcrito ou adaptado com permissão de South Bay Technology Inc. SanClemente, USA. Spilde Com permissão de Michael Spilde e Keli Weaver, University of New Mexico. Sterrenburg F. Sterrenburg, com autorização do autor http://www.microscopy-uk.org.uk/primer/ index.htm Thomas G.Thomas, Transmission Electron Microscopy of Metals, Wiley, 1966; transcrito ou adaptado com permissão do autor. Union Com permissão de Union Optical Company, Japão. Urban Com permissão de K. Urban, Institute for Solid State Physics, Forschungszentrum Jülich GmbH, Jülich, Alemanha. RMS Transcrito ou adaptado com permissão de Royal Microscopical Society, Oxford, Reino Unido. VEECO Transcrito ou adaptado com permissão de TM Microscopes, Divisão de Veeco Metrology Group, Sunnyvale, CA, USA. Outrossim, os seguintes contribuíram com sugestões e informações, pelo que lhes sou grato: J.R.Fleming, P.W.Hawkes, G.Mathiopoulos, H.W.Paxton, L.C.Pereira, F.Rezende. Diversas estadas no exterior durante a redação do livro contaram com apoio financeiro do Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq (Brasil), British Council (Reino Unido) e Bundesministerium für Forschung und Technologie (Alemanha). A Capa A capa ilustra nossa percepção da estrutura da perlita com o desenvolvimento da microscopia: microscópio fotônico (1863), microscópio eletrônico de transmissão (1940), microscópio eletrônico de varredura (1970) e microscópio de força atômica (2002). Agradeço sinceramente ao meu colega, nosso professor de soldagem, webmaster e exímio processador de imagens A. Sauer Guimarães pela diagramação, e a F.T. da Silva e R.A. Simão a contribuição de micrografias. “Quando comecei a escrever, minha lista de assuntos já estava pronta, e meu livro completo em minha mente; mas meu progresso apesar disto foi lento, porque parte do meu tempo é devotado a tarefas mais sérias”. (Brillat-Savarin, La Physiologie du Goût, 1825) “Colocar seus pensamentos em ação é a coisa mais difícil do mundo”. (Goethe, 1749-1832) “Colhi um ramo de flores de outras pessoas; nada, além dos fios que as unem, são meus”. (Michel de Montaigne, 1533-1592) “Não me faço ilusões de que possa bem conhecer algo, não me faço ilusões de que possa ensinar algo”. (Goethe, Fausto, Parte I, 1775) “Se eu fose esperar a perfeição, meu livro nunca seria terminado”. (Tai K’ung, século XIII) Prelúdio Prefácio Parece que poucas pessoas ainda estudam microscopia (M.D.Adams, 1977) I) A História do Microscópio Muito útil é conhecer a verdadeira e memorável origem das invenções (Leibnitz, XVII) II) A Teoria Básica da Microscopia Feliz quem pode conhecer a causa das coisas (Virgílio, -I) • A imagem microscópica: aumento, resolução e contraste • Propriedades fundamentais da luz ótica geométrica: reflexão, refração, dispersão ótica ondulatória: difração e interferência; polarização ótica quântica: fótons • Elétrons: partículas ou ondas? • Interação entre a energia e a matéria III) Formação da Imagem por Difração A natureza compõe alguns dos seus mais encantadores poemas para o microscópio e o telescópio (T.Roszak, 1972) • Ótica fotônica e eletrônica: lentes, aberrações • Formação da imagem por difração: teoria de Abbe Microscopia dos Materiais IV) Microscopia Fotônica Relativamente recentemente era elegante que aqueles envolvidos com microscopia eletrônica desprezassem os esforços dos microscopistas com luz. Esperemos que nestes tempos mais esclarecidos tome-se a atitude de que todas formas de microscopia tem um papel no esclarecimento das microestruturas (B.Ralph, 1980) • O microscópio de luz visível, e sua operação • Técnicas de microscopia fotônica • Macrografia V) Microscopia Eletrônica de Transmissão O que a Natureza ocultou da vista dos mortais Vós o tornastes visível (R.v.Rosenhofs, XVIII) • O microscópio eletrônico de transmissão • Técnicas de microscopia eletrônica de transmissão VI) Formação de Imagem por Varredura A formação de uma imagem em uma tela pode resultar seja da visualização simultânea de todos os elementos, como na projeção de uma figura em uma tela, ou pelo registro sucessivo dos elementos individuais da imagem, um processofamiliarizado atualmente pela televisão (V.K.Zworykin, 1943) VII) Microscopia Eletrônica de Varredura Impressionou-nos, desde as primeiras experiências, a extrema e incomum profundidade de foco destas imagens (M.v.Ardenne, 1938) • O microscópio eletrônico de varredura • Técnicas de microscopia eletrônica de varredura VIII) Outras Microscopias de Varredura Isto provavelmente nos deu a coragem e o ânimo para começar algo que, nos diziam com frequência, “em princípio nem deveria funcionar” (Binnig e Rohrer, Conferência Nobel, 1986) • Microscopia de tunelamento e de força atômica • Microscopia de campo próximo • Microscopia confocal • Microscopia de raios-X IX) Materialografia Quantitativa Quando se consegue medir aquilo do qual se fala, e exprimi-lo em números, sabe-se algo sobre o assunto (Lord Kelvin, XIX) • Medição com o microscópio • Estereologia X) Microanálise Elementar A técnica de análise pontual conhecida como “microanálise por sonda eletrônica” ou “microanálise por raios-X” foi desenvolvida há dez anos pelo autor em sua tese preparada sob a direção do Prof. A.Guinier. (R.Castaing, 1960) XI) Aquisição de Imagens Uma figura vale mais do que dez mil palavras (ant. provérbio chinês) XII) Preparação de Amostras Por uma pequena parte se pode julgar o todo (Cervantes, D. Quixote, 1605) XIII) Microscopia na Internet O sonho da Internet é o de um espaço comum de informação, no qual nós nos comunicamos partilhando informação (T.Berners-Lee, 1998) XIV) Bibliografia Há dois tipos de conhecimento: ou sabemos nós mesmos ou sabemos onde podemos obter informação (Samuel Johnson, XVIII) XV) Apêndices: tabelas, unidades, reagentes, biografias Caso conhecêssemos completamente tanto os princípios dos metais como os diferentes hábitos de seus solventes, estaríamos aptos a dizer de antemão que efeito cada um deveria produzir; mas a experiência nos convence de que não podemos prever com certeza os eventos (Sven Rinman, 1774) A História do Microscópio I.1 A Natureza da Luz A história do microscópio é a história da humanidade procurando entender e aperfeiçoar a visão. Já na antigüidade, as primeiras teorias da luz eram teorias da visão. Duas correntes procuravam explicar a percepção visual: a teoria “táctil”, segundo a qual o olho emitiria um sensor, raios ou partículas, a serem refletidos pelo objeto; alternadamente, admitia-se que o objeto emitisse algo (hoje em dia diríamos “um sinal”) percebido pelo olho. Ambas teorias eram correntes na Grécia por volta de 500 a.C. Platão, em 400 a.C. postulava “partículas sutis” emitidas pelo olho e refletidas pelo objeto; mas admitia também que os dois mecanismos pudessem agir em conjunto... Ainda que em Euclides (300 a.C.) possam ser encontrados os inícios da ciência da ótica, a antiga Grécia não era propícia ao desenvolvi- mento das ciências físicas. Com raras exceções, como Arquimedes, preferia-se o caminho da especulação metafísica ao da pesquisa experi- mental; como veremos adiantes, só com a Renascença superou-se o dogmatismo aristote- liano. Em todo caso, a teoria táctil da luz não foi definitivamente abandonada até 1000 d.C., sob influência do filósofo arábico Al-Hazen. Al-Hazen é um dos clarões nas trevas da Idade Média1. Desde Seneca (65 d.C.), que sugeriu o uso de globos de vidro para aumentar imagens e concentrar a luz, e Ptolomeu (150 d.C.), que estudou e mediu a refração, nada aconteceu até o século X. Al-Hazen, filósofo, físico e sobretudo médico, descreveu as propriedades de refração do cristalino, estudou a anatomia do olho e analisou corretamente a câmara obscura. Em 1267, Roger Bacon discutiu refração em lentes, influenciando a invenção dos óculos, mencionados pela primeira vez em Veneza em 1300. Mas o surgimento dos óculos justamente nesta cidade, pode também estar relacionado com os relatos de Marco Polo, segundo os quais os chineses do século XIII os conheciam. CAPÍTULO I A História do Microscópio Utilissime est cognosci veras inventionem memorabilium origines (Leibnitz) 1 Se considerarmos a Idade Média como um período cronológico; porque a civilização sarracena não era parte das trevas da Europa Central. PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisI.2 No século XVI, como uma das manifes- tações da Renascença, desenvolveu-se a investigação experimental na busca do conheci- mento, iniciando a época da física clássica. No século XVII sabia-se que a propagação da luz podia ser representada por raios. Qual era, no entanto, a natureza destes raios? ondas ou corpúsculos? como pode a luz, como forma de energia, ser transferida de um lugar para outro? Esta controvérsia dominou o cenário da ótica durante os próximos séculos, e a solução que aceitamos hoje, na verdade remonta ao sábio e conciliador Platão: é um pouco de cada... Newton 2 foi o grande paladino da teoria corpuscular. A propagação linear da luz constitui, no seu entendimento, uma barreira intranspo- nível para a teoria ondulatória. No entanto, foi ele próprio que estudou a interferência, fenômeno que pode tipicamente ser descrito em função desta teoria. Como consequência, propôs Newton que a luz consistiria de corpúsculos, aos quais está associada uma vibração, seja interna própria, seja controlada por vibração ou ondas no meio em que se propaga. A teoria corpuscular foi geralmente aceita durante o século XVIII, sem dúvida devido à enorme influência e ao imenso prestígio de Newton. Os textos clássicos dessa época, como Compleat system of opticks de Robert Smith (1738), são baseados nestes conceitos. Foi só à medida que começaram a surgir objeções experimentais irrefutáveis, que a percepção ondulatória, liderada por Huygens e Young, ganhou projeção. Em 1665 foi publicado postumamente um livro de Grimaldi descrevendo seus trabalhos sobre difração. Foi o primeiro a chamar a atenção para o fato de que os limites das sombras não são exatamente determinados pelos caminhos retilíneos dos raios entre as fontes e os anteparos onde são observados, originando a umbra e a penumbra. Desfazia-se portanto o mais forte argumento newtoniano contra a teoria ondulatória. Bertolinius descobriu em 1669 que objetos vistos através de um cristal de calcita apareciam duplos. Este fenômeno foi rapidamente interpre- tado em termos da polarização da luz, cuja teoria foi desenvolvida por Malus e por Fresnel. Polarização não pode existir em ondas longitu- dinais. Newton, que só postulava este tipo de onda, considerava este fato um forte argumento adicional contra a teoria ondulatória. Huygens propôs em 1678 uma teoria ondulatória para a luz, baseada em vibrações transversais. É a vertente das águas: apesar de ainda ligado timidamente a entidades discretas - Huygens imaginou pulsos periódicos irregulares - começou-se a montar um arcabouço capaz de racionalizar toda a ótica, pelo menos pelos próximos dois séculos. No início do século XIX, Thomas Young mostrou como esta teoria ondulatória poderia ser usada para explicar alguns dos fenômenos descritos por Grimaldi e Newton. A proposta de Huygens de pulsos irregularmente emitidos (e que, sabemos hoje, não está errada) foi abandonada em troca do conceito de vibrações contínuas. Young atribuiu variações de cores a diferenças de frequência, e portanto de com- primento de onda. A clássica experiência de Young (cujos resultados principais examina- remos mais tarde) engloba as facetas essenciais de sua contribuição à teoria ótica, e seu estudo em detalhe em um compêndio de ótica, é altamente elucidador. Galileu já havia tentado medir a velocidade da luz. O insucesso da experiência, que requer recursos muito além dos disponíveis na época, não deve mascarar a genialidadede sua concepção da velocidade finita da luz. Em 1676, Römer conseguiu medi-la, usando distâncias astronômi- cas, com um erro bastante pequeno em relação 2 Veja notas biográficas no Capítulo 15 (Apêndices) PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A História do Microscópio I.3 ao valor hoje aceito. Mas só foi quase 200 anos depois que Fizeau e Foucault conseguiram, independentemente, medir esta velocidade no laboratório. Porque frisar isto? Porque a disponi- bilidade de uma experiência compacta permite medir a velocidade da luz em diversos meios, e elucidar outra controvérsia capaz de distinguir a teoria corpuscular da ondulatória. Já no século II Ptolomeu mediu e tentou achar, sem sucesso, a lei da refração. O problema foi resolvido quase que simultaneamente por Snell e Descartes. Em 1637 Descartes publicou seu ensaio Dioptrika que contém sua tentativa de explicar a lei da refração, e que leva à conclusão de que a luz se propagaria mais facilmente através de um meio mais refratante. Isto está em oposição à teoria de Fermat de que a luz se propagaria ao longo do percurso de tempo mínimo. Aplicada à lei da refração, esta condição implica em que a velocidade deveria variar inversamente com o índice de refração, o que é correto. Tanto a teoria corpuscular como a ondulatória podem aceitar a lei de Snell sem problemas - mas a primeira prediz aumento de velocidade na água, a segunda diminuição. Os resultados das medições davam, sem ambigüi- dade, novos argumentos para a teoria ondulatória. Poisson tentou condenar a teoria ondulatória argumentado que no meio da sombra de um anteparo circular, deveria haver um ponto luminoso. A descoberta deste ponto, por Fresnel e Arago contribui para o triunfo, pelo menos temporário, da teoria ondulatória, Esta teoria, formulada em termos de um meio com propriedades de um sólido elástico, que permeia todo o espaço, mas que é modificado pela matéria, explicava razoavelmente interfe- rência, difração e polarização. Perduravam no entanto certas dificuldades, como detalhes nos fenômenos de interface de dois meios. Estas dúvidas foram finalmente conciliadas pela teoria eletromagnética da luz, proposta por Maxwell como parte da teoria geral da eletricidade e do magnetismo. A Figura 01.01 ilustra a faixa de luz visível como uma parte, aliás mínima, do espetro de radiações eletromagnéticas. O fim do século XIX parecia portanto indicar a vitória final da teoria ondulatória da luz. Esta calma superficial era parte da sensação geral de que a física estava entendida e encerrada, e de que o edifício concluído repou- sava sobre os alicerces de Newton e Maxwell. A virada do século trouxe observações que determinaram o surgimento, no nosso século XX, de uma nova era na física. No caso da ótica, foram inicialmente as observações de fotoeletricidade que criaram dificuldades para a teoria. A energia possuída por um elétron emitido por um átomo sob excitação da luz, excede em muito o que ele Figura 01.01 - Espectro eletromagnético PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisI.4 poderia receber desta onda, segundo a teoria eletromagnética. Einstein sugeriu que a energia não está uniformemente distribuída no feixe, mas concentrada em fotons que se propagam como partículas. Esta sugestão reforçava as idéias independentes de Planck, que havia sido levado a propor a quantização da energia para explicar a radiação térmica, e resultou na consolidação da ótica quântica. O físico moderno precisa, através de uma teoria unificada, explicar duas classes radical- mente diferentes de observações. De um lado, interferência, difração e polarização, adequada- mente explicadas pela teoria ondulatória. De outro lado, enumeram-se as experiências que podem ser interpretadas em termos de fotons, como absorção, fluorescência, e o efeito fotoelétrico. A teoria eletromagnética não é compatível com fotons, nem a teoria particulada admite comportamento periódico. Voltamos à situação de Newton, e muitas sugestões de partículas com propriedades periódicas foram feitas no primeiro quartel do século 20, e que culminaram com a formulação de de Broglie em 1924. A solução moderna, na forma da mecânica quântica, engloba energia e matéria. A teoria não é simples, e só pode ser completa- mente enunciada de forma matemática. Portanto, não é frutífera a tentativa de um modelo físico com analogias ao nosso mundo cotidiano. Nesta teoria unificada, os fotons e ondas surgem como concepções complemen- tares e não rivais, cada uma apropriada a um determinado contexto. É a dualidade partícula- onda; nada é simples, nenhuma solução é unívoca. Mas já não sabiam disto, muito antes de nós, Huygens, Newton e Platão? As origens do microscópio Já na antigüidade havia tentativas de reforçar a visão com auxílio de dispositivos óticos. Nas escavações de Nínive foram encon- trados pedaços de vidro polido cuja única interpretação é o seu uso como lentes. Aristóteles, no século IV a.C. referiu-se claramente a uma lente, e Seneca descreveu o uso de globos de vidro para aumentar imagens. A partir do século XIV lentes começaram a ser usadas comumente para corrigir defeitos de visão e como dispositivos de aumento. Este uso atingiu seu apogeu com Leeuwenhoek, que provavelmente deve ser considerado o primeiro verdadeiro microscopista. Detentor de uma técnica extremamente desenvolvida, levou o uso do microscópio simples (uma lente ou lupa) ao seu nível mais alto. Seus microscópios eram individualmente feitos para cada amostra e durante sua vida produziu centenas, dos quais infelizmente só sobrevivem nove definitivamente autenticados (Figura 01.02). Durante anos descreveu o micromundo à sua volta em uma série de cartas à Royal Society de Londres, de cuja qualidade de membro correspondente se orgulhava imensamente. Alguns de seus “pequenos animais” são examinados com aumentos de 300 vezes, façanha considerável mesmo em comparação com alguns instrumentos modernos. Figura 01.02 - Microscópio de Leeuwenhoek PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A História do Microscópio I.5 O microscópio simples não é, no entanto, um instrumento versátil ou cômodo nas mãos do público em geral. Paralelamente ao desenvolvimento do telescópio no século XVII, surgiu o microscópio composto, constituído no mínimo de uma lente objetiva e de uma ocular. A invenção do microscópio composto é controvertida. A maioria dos historiadores situa sua origem na Holanda, por volta de 1600 e mencionam Jansen ou Lippershey como inventores. Sem dúvida, nos trinta anos seguintes os holandeses tinham microscópios, e em torno de 1620 Cornellius Drebbel demonstrou um a Jaime I da Inglaterra. Em 1609 Galileu fez seu primeiro microscópio. Há evidência de que em junho daquele ano ouviu falar do trabalho dos holandeses. Galileu interessava-se paralela- mente por telescópios e microscópios, e em 1624 presenteou um de seus microscópios ao príncipe Federico Cesi, o fundador da primeira sociedade científica, a celebrada Academia dei Lincei de Roma. Convencionemos que a verdadeira história do microscópio começa em 1625, ano em Giovanni Faber cunhou o termo microscópio. Os cem anos entre 1650 e 1750 podem ser considerados como época do desenvolvimento mecânico do microscópio. O primeiro aperfeiço- amento foi a tentativa de facilitar a focalização, originando o tubo rosqueado dos microscópios de Hartsoeker e Wilson3. Seguem-se duas concepções diversas, o tripé de Culpeper e o ped- estal lateral articulado de Marshall. A partir deste último, e incorporando a lente de campo introduzida por de Monconys, surgiu em 1665 o célebre microscópio de Hooke, Figura 01.03. Este é talvez o protótipodo microscópio moderno, não só pela sua construção, mas por sua íntima ligação com a Micrographia, sem dúvida a mais famosa publicação de microscopia de sua época. Os microscópios de Cuff representam um patamar no desenvolvimento do microscópio, que só foi sensivelmente ultrapassado após um século. A grande fama dos produtos de Cuff relaciona-se mais uma vez à sua divulgação em um livro: o célebre The microscope made easy, publicado em 1742 por Henry Baker. Em consonância com o desenvolvimento experimen- tado pela mecânica fina em meados de século XVIII, Cuff passou do uso da madeira e couro para o metal, e reuniu pela primeira vez em um instrumento focalização por parafuso, mesa para amostras, espelho para luz transmitida e refletida, que permitem equivalência com a disposição moderna. E, inevitavelmente, o rococó do século XVIII não poderia ter deixado de influenciar o microscópio. O instrumento construído pelos Adams para o Rei George III, em prata e querubins, apesar de sua sofrível qualidade ótica, merece a atenção da crônica histórica (Figura 01.04). Figura 01.03 - Microscópio de Hooke 3 A perfeita compreensão desta evolução só é possível à vista dos instrumentos típicos de cada época. Confira por exemplo Palmer e Schiar, “Microscopes to the end of the XIX Century”, (The Science Museum, London), HMSO, 1971. PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisI.6 A qualidade ótica dos microscópios não acompanhou o seu desenvolvimento mecânico. Em torno de 1750 recomendava-se ainda ao pesquisador sério o uso da lente simples como capaz de fornecer uma imagem superior à do microscópio composto, dito “instrumento con- fortável para os curiosos das ciências naturais”. O grande problema eram as aberrações, principalmente o cromatismo. Além de só for- necer uma pequena imagem central adequa- damente focalizada, esta estava envolta por um halo colorido que inviabilizava o estudo de detalhes. Nos cem anos entre 1800 e 1900 o microscópio finalmente conheceu a matura- ção ótica correspondente ao seu desenvolvi- mento mecânico. Tanto Huygens como Newton dedicaram- se ao cálculo e correção do cromatismo. Um erro de Newton, no entanto, levou-o a propor que a correção era impossível. Em 1747 Euler expôs este engano, e desenvolveu a teoria da correção cromática. Em 1758 John Dollond obteve uma patente para lentes acromáticas, mas o seu sistema, que teve logo sucesso em telescópios, é inadequado para as pequenas lentes do microscópio. Quase simultaneamente, Dellabarre propôs um microscópio acromático, que também ainda não é satisfatório. Foi apenas em 1830 que Amici e J.J.Lister avançaram substancial- mente na obtenção de objetivas acromáticas, principalmente através da formulação, por este último, da teoria dos pontos conjugados aplanáticos. A introdução adicional, por Amici, da lente de imersão de água consolidou o substancial progresso das lentes acromáticas dos meados do século. Coube a Abbe a contestação de que “aumentos cada vez maiores só dependeriam de perfeição de fabricação de lentes”. Seus estudos mostraram que havia uma limitação básica para a resolução de um sistema ótico, relacionada ao diâmetro da lente e ao comprimento de onda da luz. A figura de Abbe domina todo o desenvolvimento das modernas lentes, sejam para microscopia ou para fotografia. A carreira de Abbe também oferece outra faceta de interesse histórico: é uma das primeiras vezes que um industrial, Carl Zeiss contratava um cientista com o propósito deliberado de melhorar seus produtos através de pesquisa básica e aplicada. Os trabalhos de Abbe resultaram na concepção das lentes apocromáticas em 1887. Estas lentes oferecem padrões de qualidade ótica até então inexistentes, principalmente depois que Abbe, seguindo a sugestão de J.W.Stephenson, projetou a primeira lente de grande aumento de imersão de óleo, ou homogênea. As lentes apocromáticas baseiam-se na disponibilidade de uma série de vidros óticos de índice de refração e dispersão precisamente especificados. Esta demanda, teoricamente postulada por Abbe, pôde ser preenchida através do desenvolvimento de uma série de vidros ao boro pela firma Schott/ Jena. Todo o episódio da concepção e realização das modernas lentes apocromáticas é um Figura 01.04 - Microscópio de Adams (Science Museum) PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A História do Microscópio I.7 testemunho satisfatório da associação da indústria, ciência e tecnologia, pela orquestração de esforços teóricos e práticos na realização de um objetivo, e que ainda hoje mereceria o estudo e admiração dos que se ocupam de transferência de tecnologia. A qualidade final atingia assim o seu mais alto grau no início do século XX. Mas a excelente correção das lentes apocromáticas ainda se restringia a uma região central, limitando severamente o campo de visão utilizável. Boegehold desenvolveu a partir de 1938 as lentes planoapocromáticas, cujo grande campo de visão corrigido as tornam especial- mente importantes para a microfotografia. Men- cionando ainda a introdução das camadas anti- refletoras, para controle da luz difusa, vemos que em meados do século XX o microscópio fotônico atingiu praticamente a sua evolução final: fornece os aumentos máximos previstos pela teoria, e os futuros progressos deverão apenas trazer melhorias marginais de qualidade. Mas certamente não estão afastadas as possibilidades de ampliar o uso do micros- cópio ótico através de novas técnicas. A microscopia de contraste de fase, proposta em 1934 por Zernicke abriu novos horizontes, em especial na investigação biológica. O desenvolvimento contemporâneo caracteriza-se pela influencia das duas principais correntes industriais do século: padronização e ergonometria. Durante muito tempo era impos- sível a combinação em um mesmo instrumento de elementos óticos de diversos fabricantes. Nem os diâmetros nem os comprimentos óticos eram uniformes. O primeiro passo nesta direção foi dado com a padronização da rosca das oculares pela Royal Microscopical Society em 1867; seguiu-se a fixação do tubo ótico em 160 mm (atualmente superada pelo desenvolvimento do conceito de tubo infinito) e a normalização dos aumentos nas séries DIN e ASTM. A partir dos anos ’40, muitos fabricantes passaram a adotar projetos modulados para seus instrumentos, baseados em séries de componentes óticos e mecânicos, que permitem a composição do ins- trumento mais adequado para cada aplicação. A Microscopia dos Materiais A microscopia dos materiais é em grande parte a microscopia de amostras opacas. O seu domínio exigiu o desenvolvimento paralelo ao do microscópio clássico, primordialmente voltado para a biologia. O primeiro microscopista a examinar metais foi Henry Power em 1664; a associação do microscópio à ciência dos materiais não é nova. Já em 1753 Baker devotou quase metade de sua obra “Employment for the Microscope” a sais minerais e outros tópicos inorgânicos. Hooke, na disposição de seu famoso microscópio contemplava a iluminação de amostra opacas, e incluiu muito do que se poderia chamar de “materialografia” na sua Micrographia (Figura 01.05). Figura 01.05 - Cortiça (Hooke) Um progresso decisivo foi feito por Lieberkühn com a introdução do iluminador refletor vertical. Mas se tivermos que destacar PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisI.8 uma figura como o criador da metalografia seria Sorby. Foi seu gênio que associou o iluminador de Lieberkühn, as novas objetivas acromáticas e as técnicas de ataque de Widmanstatten, nos estudos com grande aumento da microestrutura do ferro, e que levaram à descrição da perlita. A datadesses estudos, 1863, é frequentemente citada como o marco inicial da metalografia; sem dúvida, uma das razões do atraso de mais de 20 anos para sua publicação em 1887 remonta à dificuldade de imprimir fotos ou desenhos a preço razoável. Seguiram-se em rápida sucessão os nomes dos desbravadores da microestrutura dos metais: Martens, Tschernoff, Roberts-Austen, Osmond, Troost e LeChatelier. Este último em particular, gênio polivalente, associou impor- tantes contribuições teóricas ao desenvolvimento da técnica de metalografia. Philippe Bonanni foi provavelmente o primeiro a dispor, em 1691, os elementos de um microscópio na forma de um banco ótico. Este arranjo, incubado sem grande desenvolvimento durante dois séculos, teve nas mãos de LeChatelier consequências momentosas para a metalografia e a microscopia dos materiais. Através de prismas e espelhos a amostra é colocada no plano horizontal, repousando a amostra opaca diretamente sobre a mesa – é o “microscópio invertido segundo LeChatelier”. Poucos temas são capazes de inflamar mais rapidamente uma reunião de metalurgistas do que a discussão das preferências pessoais entre microscópios metalográficos e C.S.Smith, o grande historiador contemporâneo da metalografia, tem evidentemente fortes convicções sobre o assunto: “O microscópio invertido foi, no entender do autor, um desserviço aos metalogra- fistas. Apenas para evitar o passo trivial de montar ou fixar a amostra, compli- cações mecânicas e óticas foram introduzidas que continuaram a evoluir neste mostrengo, o moderno “metaló- grafo”, um digno companheiro do automóvel de 1958. Esperemos que, no seu devido tempo, a simplicidade retorne e os fabricantes ofereçam uma combi- nação microscópio-câmara para ser usada confortavelmente por indivíduos que não tenham mãos crescendo do topo de sua cabeça, e no qual fotografia é possível sem acrobacias. Poucas desco- bertas metalográficas foram feitas sem o estudo direto de amostras, no entanto nenhum homem pode sentar-se por trinta minutos em um moderno metalógrafo invertido sem ficar com o pescoço, cotovelo, costas e cabeça doloridos”. Mas talvez este julgamento seja demasia- damente severo; há 300 anos, o próprio Bonanni, talvez já profeticamente ciente da polêmica que iniciava, escrevia: “Todos os tipos de microscópios devem ser examinados e os pesquisadores devem usa-los com entendimento. Porque assim como o pintor não pinta com um só pincel, nem o escultor trabalha apenas com um único cinzel, mas na verdade todas as obras de arte são feitas com muitas ferramentas. Acabemos portanto com as disputas acadêmicas, pelas quais os esforços de alguns artistas para construir micros- cópios diversos, sejam condenados como inúteis”. Alguns fabricantes, prudentemente, abstiveram-se de participar do debate, e dispuseram os mesmos elementos óticos segundo os dois arranjos. E modernamente, o desenvolvimento de câmaras fotográficas, ou mesmo digitais, compactas, e progressos ergonômicos consideráveis, fizeram com que esta polêmica se tornasse mais pitoresca do que essencial. A luz polarizada desempenha grande papel em microscopia dos materiais. Provavel- mente o primeiro microscópio destinado especificamente a estudos com luz polarizada foi projetado por Amici em 1844. Este instrumento PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A História do Microscópio I.9 contém um número surpreendente de facilidades modernas. O grande desenvolvimento da cristalografia, mineralogia e petrografia do século XIX determinou crescente uso da luz pola- rizada a partir de 1860, e depois de 1880 diversas firmas passaram a fornecer tipos comerciais. Destacam-se no desenvolvimento os nomes de Ehrenberg, Zirkel e Berek. Apesar de contínuos aperfeiçoamentos, só uma mudança radical foi introduzida no instrumento durante a sua existência individualizada: o polarizador, originalmente na forma do prisma de Nicol foi substituído por elementos de Polaroid. Este material inicialmente concebido a partir da preparação de materiais pleocróicos como o sulfato de iodoquinina sintetizado por Herapath em 1852, foi desenvolvido por Land a partir de 1935, e revolucionou a técnica do uso da luz polarizada. O advento da Microscopia Eletrônica Vimos que no começo do século XX, a microscopia ótica havia atingido o limite de resolução previsto pela teoria de Abbe. Uma vez que a qualidade das lentes não oferecia mais escopo para progresso, o único caminho para conseguir maior resolução seria através da utilização de radiações com menor comprimento de onda. Em 1924 de Broglie formulou sua postulação da dualidade onda-partícula para elétrons, que lhes atribuia um comprimento de onda equivalente a mv h 2 =λ V 150 =λ onde λ é o comprimento de onda, V a tensão de aceleração dos elétrons , h a constante de Planck e m, v a massa e velocidade dos elétrons. Portanto, a aceleração de elétrons a algumas dezenas de milhares de volts resulta em comprimento de onda da ordem de Ångstroms, da ordem das dimensões atômicas. A carga dos elétrons determina que sejam influenciados por campos magnéticos e eletrostáticos, o que possibilita a construção de lentes. O ano de 1926 pode ser considerado como o início da ótica eletrônica: Busch formulou a teoria de que campos magnéticos ou elétricos com simetria axial agem como lentes sobre partículas carregadas, como elétrons, e desenvolveu uma lente magnética. A possibili- dade de construção de um microscópio eletrô- nico foi imediatamente percebida por diversos pesquisadores, principalmente de grupos em Berlim, empenhados na construção de osciloscópios de raios catódicos. Dentre estes, Knoll e Ruska tomaram a dianteira, e rapida- mente desenvolveram o instrumento a ponto de superarem, pela primeira vez em 1931, a reso- lução do microscópio com luz visível (Figura 01.06). Durante a década de ’30, o instrumento conheceu sucessivos aperfeiçoamentos, e à véspera da 2a. Grande Guerra, iniciava sua comercialização pela firma Siemens. Figura 01.06 - Primeiro microscópio eletrônico de transmissão (Ruska e Knoll) Depois da Guerra, a microscopia eletrônica teve rápido desenvolvimento, principalmente na área biológica, cujas amostras se prestam facilmente ao exame por transmissão. Na área de materiais, o progresso foi mais lento, restrito inicialmente ao exame de perfís e de superfícies por intermédio de réplicas. As primeiras PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisI.10 micrografias eletrônicas de aços foram provavel- mente obtidas por R.F.Mehl4 em 1940. A microscopia eletrônica de transmissão de mate- riais, no entanto só desenvolveu-se rapidamente após a introdução das amostras finas por Heidenreich e pelos trabalhos seminais de Hirsch e colaboradores em Cambridge, em torno de 1960, na elucidação do mecanismo de contraste em amostras cristalinas. A resolução rapida- mente superou em quase três ordens de grandeza a do microscópio fotônico e o MET veio a tornar- se o mais importante instrumento no estudo das estruturas e defeitos cristalinos nesta escala. Atualmente, os constantes aperfeiçoamentos na engenharia dos microscópios, aliada aos recursos computacionais disponíveis tornam a resolução atômica, se não rotineira, pelo menos comum em muitos laboratórios em todo o mundo. O advento da microscopia de varredura Até este ponto, examinamos a formação de imagens no microscópio obtidas através de lentes, ou seja, mantendo uma relação geométrica entre objeto e imagem. A partir da década de ’30 uma maneira diferente passou a atrair a atenção dos microscopistas, incentivada pelo desenvolvimento do radar e da televisão. Nestes, a imagemé gerada mediante uma varredura do espaço objeto, e mapeamento dos sinais obtidos em um plano imagem. A relação entre o objeto e a imagem é portanto temporal. Em 1935 Knoll descreveu pela primeira vez este conceito aplicado a um microscópio eletrônico de varredura (MEV). Pouco depois, em 1938, von Ardenne construiu um microscópio eletrônico de transmissão no qual a aquisição da imagem era feita por varredura, disposição retomada muito mais tarde na forma do METV (mais conhecido pela sigla em inglês, STEM). Obteve um aumento da ordem de 8.000 X, ainda que o tempo exigido para uma exposição, de 20 minutos, não fosse prático. Nos EEUU, foi construído por Zworykin em 1942, o primeiro MEV utilizado para o exame de superfícies de amostras, atingindo a resolução de 50 nm. Mais uma vez, as prioridades do conflito mundial determinaram a interrupção destes trabalhos. Em torno de 1950, Oatley em Cambridge interessou-se em criar um grupo de pesquisa em ótica eletrônica, e retomou o desenvolvi- mento do MEV. Foi então desenvolvido um instrumento com características modernas, como utilização de elétrons secundários e retroespalhados, elucidação dos diversos mecanismos de contraste, e principalmente, reconhecida a grande profundidade de campo para o exame de superfícies rugosas. Em 1952, foi atingida a resolução de 50 nm, que uma década depois havia sido reduzida de um fator de cinco; era chegado o momento de comercializar o MEV com a Cambridge Instru- ment Company, a partir de 1965. A comercialização teve seus momentos pitorescos: encomendada uma pesquisa de mercado, foi prevista a possibilidade de colocar cerca de dez instrumentos por ano no mercado; até 1970 haviam sido vendidos 500, e estima-se haver, hoje, mais de 50.000 MEV’s em funcionamento no mundo! Em contradistinção com o MET, o MEV ganhou rapidamente grande importância em microscopia de materiais, e notadamente em fratografia. Para isto contribuiu também a sua aplicação na indústria eletrônica e como instrumento para microlitografia. A partir de 1943, Castaing sob a orientação de Guinier em Paris, dedicou-se ao desenvolvimento de uma microsonda eletrônica. Neste instrumento, um feixe colimado de elétrons excita a emissão de raios-X, que analisados através da lei de Moseley, permitem análise e- lementar em um volume da ordem de 1µm3 do material. Inicialmente concebidos como dois ins- 4 A quem o autor, seu aluno, recorda com admiração e saudade. PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A História do Microscópio I.11 trumentos distintos, o MEV e a microsonda fo- ram progressivamente reunidos; a disponibili- dade destes recursos simultaneamente consolidou definitivamente a posição do MEV para aplicações como análise de falhas e desen- volvimento de tecnologias industriais. Durante a década de ’90 verificou-se um importante progresso no MEV: o desenvolvimento dos trabalhos iniciais de Danilatos possibilitaram a criação do MEV de baixo vácuo, capazes de operar com pressões até algo acima da pressão de vapor da agua. Isto possibilita não apenas o exame de amostras úmidas ( como por exemplo biológicas, ou no estudo da corrosão), mas também permitindo o exame de amostras não condutoras de eletricidade, uma das limitações importantes dos instrumentos tradicionais. As modernas microscopias de varredura A formação da imagem do microscópio por varredura foi provavelmente o desenvolvimento mais importante ocorrido em microscopia no século XX, introduzindo, ao cabo de quase quatro séculos, um novo conceito na visualização de microestruturas. Em princípio, cada fenômeno físico com o qual seja possível provocar uma resposta localizada no objeto, e adquirir um sinal correspondente, pode ser utilizado como base para um microscópio. Uma das primeiras, e até agora, a mais importante, aplicação foi iniciada por Binnig e Rohrer, utilizando o efeito de tunelamento (efeito quântico, segundo o qual uma pequena corrente “tunela” através de uma fina camada de mate- rial isolante). Varrendo a superfície de uma amostra condutora com uma sonda de dimensões atômicas, descreveram em 1982 o microscópio de tunelamento (STM), com o qual obtiveram imagens de resolução atômica. Segundo eles próprios, consguiram algo que, “em princípio nem deveria funcionar”. A rapidez com que fo- ram reconhecidos e agraciados pelo Prêmio Nobel em 1986 atesta o enorme inpacto deste instrumento no desvendamento da estrutura de superfícies em dimensões atômicas, da maior importância no limiar, em nssos dias, da nanotecnologia. Pouco depois, Binnig e colaboradores introduziram o microscópio de força atômica (SFM), de concepção ainda mais improvável, e que contornou a limitação do exame apenas de amostras condutoras. Esta invenção iniciou a era dos Microscópios de sonda de varredura (SPM), campo no qual se verificam atualmente os maiores desenvolvimentos de microscopia, e que trataremos em detalhe mais adiante. No- vas modalidade são propostas continu- amente, e só a perpectiva histórica poderá decidir, no futuro, quais deles terão impacto comparável com os grandes desenvolvimen- tos do século XX, na nossa busca de µικρο σκοpiειν - ver o pequeno! PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A Teoria Básica da Microscopia II.1 CAPÍTULO II A Teoria Básica da Microscopia A imagem microscópica: aumento, resolução e contraste O objetivo da microscopia é a obtenção de imagens ampliadas de um objeto, que nos permi- tam distinguir detalhes não revelados a olho nu. A primeira pergunta que ouvimos do leigo ao ver um microscópio é: Qual é o aumento? Na verdade, o aumento que tanto impressiona o usuário ocasional de microscopia, não é o parâmetro mais importante a considerar. Parece-nos, à primeira vista, que se dispuséssemos de instrumentos perfeitos poderíamos examinar uma amostra com aumentos cada vez maiores, e perceber detalhes cada vez menores, até distinguir os átomos, ou quem sabe, as partículas que os compõem. Não é isto o que ocorre: existem limitações físicas que determinam a menor distância entre dois pontos que permita distingui-los separada- mente. A esta distância chama-se limite de re- solução, e um aumento maior não revelará nenhum detalhe adicional da estrutura. A imagem microscópica é caracterizada por três parâmetros: aumento, resolução e contraste. Examinemos em detalhe os conceitos de aumento e de resolução (1). Definimos o aumento linear para uma lente ou um sistema ótico como a relação entre o tamanho da imagem e a do objeto ’’ = em alguns casos, é útil definir o aumento angu- lar. Demonstra-se que ’sensen’’ αα== A resolução de um sistema ótico quantifica a sua capacidade de separar individualmente detalhes adjacentes de uma imagem. O limite de resolução (δ) é a menor distância entre dois pontos que ainda podem ser distinguidos. O poder de resolução é o inverso desta medida2. Felix qui potuit rerum cognoscere causas (Virgilio) 1 As lentes serão estudadas em maior detalhe no Capítulo III; o autor pressupõe neste capítulo um conhecimento elementar por parte do leitor. 2 O aluno deverá acostumar-se a distinguir “resolução” de “poder de resolução”: a primeira, a menor dimensão que pode ser resolvida, em princípio, quanto menor, melhor; o poder de resolução refere-se à capacidade de um instrumento resolver detalhes – o correto é falar em melhor e não maior poder de resolução. PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisII.2 Como já foi mencionado, e veremos em detalhe mais tarde, aumentos cada vez maiores não importam em melhor informação: em princípio, podemos projetara imagem de um diapositivo em uma tela a centenas de metros de distância, obtendo um imenso aumento. Mas a partir de um certo aumento isto não trará nenhuma vantagem. O leitor poderá fazer a seguinte experiência: examine uma figura em um jornal com lupas sucessivamente mais fortes (ou um estereoscópio dotado de zoom) 3; verá que a imagem é constituída de pontos, e que inicial- mente o incremento de aumento revelará novos detalhes; a partir de determinado momento, os pontos ficarão mais separados entre si, sem que nenhuma nova informação surja entre eles. A isto denomina-se aumento vazio. Para que haja formação de uma imagem, precisamos também de contraste. Denominamos de contraste a capacidade de distinguir traços característicos da estrutura sobre o plano de fundo. Citando Veríssimo 4, não podemos ver com clareza um “gato branco em campo de neve”. O contraste surge quando a radiação utilizada na formação da imagem interage com a matéria, no caso a amostra. Além da simples absorção ou reflexão de energia pela amostra existem vários outros mecanismos de geração de contraste em microscopia. Na prática, os conceitos de resolução e de contraste não são independentes. Principalmente no exame visual de uma imagem, a percepção de detalhes é bastante influenciada pelo contraste. É preciso distinguir entre a capacidade de identificar a presença de um objeto (denomi- nada de visibilidade) e a capacidade de resolver detalhes do mesmo. Somos capazes de identifi- car pontos luminosos isolados muito pequenos quando sobrepostos a um fundo escuro – por exemplo uma estrela ou um pequeno furo em um anteparo opaco iluminado por trás. Quantificamos contraste pela expressão − =κ O olho humano é um importante sensor em microscopia, e é interessante detalhar algo sobre seu funcionamento. A ótica da visão O olho humano (Figura 02.03) funciona como uma câmara, constando de um diafragma5, de um sistema de lentes e de uma superfície receptora, sensível à luz 6. O mecanismo de visão consiste na formação de uma imagem real do objeto sobre a retina. 3 Veja capítulo IV. 4 Erico Verissimo, Gato Preto em Campo de Neve, Globo, 1941. 5 A seguinte nomenclatura será adotada em todo o livro: - diafragma: anteparo opaco, provido de um orifício, destinado a limitar o feixe luminoso em um sistema ótico; - íris: diafragma com orifício continuamente variável; - abertura: diâmetro ou ângulo de admissão do feixe luminoso. 6 Sensores de luz não biológicos, como películas fotográficas e dispositivos semicondutores serão estudados no Capítulo XI. Figura 02.01 - Lente delgada Figura 02.02 - Aumento angular PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A Teoria Básica da Microscopia II.3 O globo ocular é dividido em duas regiões: a anterior é formada por duas câmaras: câmara anterior, delimitada pela córnea e face anterior da íris, e a posterior, pela face posterior da íris e o cristalino. Ambas são preenchidas por um líquido (humor aquoso). A região posterior, câmara vítrea, é preenchida por uma substância gelatinosa (humor vítreo). A córnea e o cristalino formam o sistema ótico do olho. A maior ação focalizadora é exercida pela córnea. O cristalino age para complementar o foco da imagem do objeto sobre a retina. Diferentemente da disposição em uma câmara fotográfica, onde a focalização é obtida pela variação da distância entre a lente e a película, o olho focaliza pela alteração da distância focal, e portanto do poder de aumento da lente7. A curvatura do cristalino é controlada por um conjunto de músculos que estão relaxados quando observamos objetos longín- quos. À medida que aproximamos o objeto, a curvatura do cristalino é aumentada: a isto se chama acomodação. Há um limite para esta acomodação, que no adulto sadio, é normal- mente de 250 mm, e constitui a “distância mínima de visão distinta”. A habilidade de acomodação decresce com a idade, resultando na conhecida “vista cansada”, ou seja a inabilidade do idoso de focalizar confortavel- mente objetos próximos (presbiopia). A retina é um conjunto de fotoreceptores de estrutura muito complexa. Os principais são de dois tipos: cones e bastonetes. A visão opera em dois regimes: visão fotópica, em condições normais de claridade diurna, e visão escotópica, em condições de baixa luminosidade. Os cones são os responsáveis pela visão fotópica; sua distribuição na retina não é uniforme, atingindo sua maior densidade na região da fóvea, onde está a maior acuidade visual. A sensação de cores é inteiramente dependente dos cones. Os bastonetes não tem percepção de cores, e não podemos percebe-las na penumbra. O olho tem grande capacidade de resposta para a otimização da imagem. Além da acomodação, vista anteriormente, verificamos a adaptação às condições de luminosidade ambiental. Uma parte desta adaptação é devida à abertura da íris, cujo diâmetro pode variar de 2 a 8 mm. Isto permite uma variação de intensidade de 82/22=16 que é no entanto muito menor do que a gama entre luz do sol e das estrelas, que somos capazes de perceber. A maior parte da adaptação é devida à variação de sensibilidade nos receptores da retina, através de alterações no seu mecanismo fotoquímico. A velocidade de decaimento deste processo também é responsável pela persistência da visão, que nos permite perceber o cinema ou a televisão sem bruxuleios. Qual é o poder de resolução do olho humano? Claramente, um fator a considerar é a separação entre os receptores da retina. Para que dois pontos possam ser distintos, suas imagens devem impressionar no mínimo dois elementos, separados por um terceiro. Na fóvea, a parte mais sensível da retina, esta separação é de 3 µm, o que levando em conta o diâmetro do olho, corres- ponde a cerca de 1' de grau. Este ângulo, a uma distância de 250 mm, subtende aproximadamente 0,1 mm, que é a resolução esperada para exame visual sem auxílio de lentes. Conforme veremos mais adiante, a reso- lução de um sistema ótico depende, dentre outros fatores, da abertura de sua lente. É interessante Figura 02.03 - O globo ocular e a ótica da visão 7 Veremos mais tarde que este procedimento é tambem adotado em ótica eletrônica. PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisII.4 observar que no reino animal, a evolução biológica mostrou-se coerente no dimensiona- mento dos olhos e no refino da estrutura da retina: em todos os casos, a densidade de receptores evoluiu de maneira a aproveitar a re- solução disponível com o tamanho do olho, e consequente abertura da íris. O olho humano pode apresentar diversas anomalias; dentre elas a miopia, a hiperme- tropia e o astigmatismo devem ser considera- dos no uso do microscópio. As duas primeiras referem-se à formação da imagem focalizada antes ou depois da retina, respectivamente. Como consequência, em indivíduos míopes há deficiência de visão de objetos longínquos, e na hipermetropia de objetos próximos. Isto pode ser corrigido pela adição de óculos com lentes esféricas divergentes ou convergentes de grau adequado. O astigmatismo refere-se à falta de simetria radial do olho, e conseqüente distorção da imagem. É corrigido pela inclusão de óculos com lente de perfil cilíndrico, que introduz uma distorção igual e contrária à do olho. Para o microscopista é importante perceber que a correção esférica pode ser introduzida no ato de focalizar o microscó- pio; já a correção de astigmatismo é individual. Ainda que a recomendação formal seja de que se deva usar sempre os óculos portados nor- malmente ao trabalhar no microscópio, esta exigência pode ser relaxada no caso de não haver astigmatismo significativo8 As propriedades fundamentais da luz As propriedades da luz podem ser explicadas e classificadas considerando a energia emitida por uma fonte de luz consis- tindo seja como um fluxo contínuode energia ao longo de um raio, como um movimento ondulatório, ou como um fluxo de partículas, ou fótons. Cada um destes modelos revela-se especialmente adequado para explicar, com a maior simplicidade possível, um grupo de propriedades da luz, e determina as três grandes divisões da ótica, respectivamente ótica geomé- trica, ótica ondulatória9 e ótica quântica. Estas maneiras de enfocar o problema não são teorias competitivas, mas sim comple- mentares. Verifica-se que o conceito de energia de uma fonte fluindo ao longo de um raio pode ser usada para explicar a propagação retilínea da luz, e a formação de sombras; a reflexão, a refração e a dispersão. Se, no entanto, tentar- mos isolar um raio por meio de uma série de pequenas aberturas, verificaremos que quanto menor esta abertura, menos a luz se comporta como um raio. Este comportamento é explicável em termos da teoria ondulatória da luz, e permite tratar de difração, interferência, caráter eletromagnético da luz, polarização e dupla refração. Finalmente, o conceito de pacotes discretos de energia é útil quando tratamos de uma série de fenômenos, que incluem a interação de luz com a matéria, como por exemplo origem dos espectros, efeito fotoelétrico, lasers e coerência. Ótica geométrica Inicialmente, para compreender o funcio- namento do microscópio, podemos avançar bastante utilizando a ótica geométrica, que se baseia nas seguintes leis: • a luz se propaga em linha reta • partes de um feixe luminoso podem ser tratados como raios individualizados • as leis da reflexão e da refração 8 O leitor usuário de óculos deve examinar a receita e verificar o grau cilíndrico, se houver. Outra maneira é girar a lente dos óculos em torno de seu eixo: se a imagem permanecer inalterada, não há grau cilindrico. 9 Este enfoque é também denominado de ótica física. Recebeu esta denominação quando se reconheceu que a ótica geométrica deveria ser complementada pelo estudo da luz como uma onda. O advento da mecânica quântica, certamente parte importante da física, tornou esta terminologia inadequada. PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A Teoria Básica da Microscopia II.5 Reflexão e refração Quando um raio de luz incide na interface entre dois meios, parte é refletida de volta para o primeiro meio, e parte penetra no segundo, sofrendo um desvio de direção. A estes fenômenos denomina-se, respectivamente, de reflexão e refração. Os raios são coplanares com a normal NN’ à interface MM’, e a direção dos raios resultantes é dada por duas leis (Figura 02.04) • o ângulo de incidência é igual ao ângulo de reflexão • Os senos dos ângulos de incidência θ e de refração θ’ têm relação constante para qualquer ângulo de incidência (Lei de Snell) Dispersão cromática O índice de refração depende da cor da luz. Por isso, luz branca sofre refração com separação em suas cores básicas componentes. Este fenômeno é denominado de dispersão cromática (Figura 02.05). A dispersão varia para diversos meios transparentes, e veremos adiante que este fato é de grande importância no projeto de lentes e correção das chamadas aberrações cromáticas. Dado o índice de refração para uma série de cores (Tabela 02.01), quantificamos a variação de dispersão pelo índice de dispersão V ( ) ( )1 1 −η −η = Como exemplo, consideremos dois impor- tantes tipos de vidro ótico, e suas composições típicas: Crown - 72% SiO2, 18% K2O, 10% CaO Flint - 45% SiO2, 12% K2O, 43% PbO estes vidros tem, respectivamente, dispersão alta e baixa, e utilizando-os em combinação podemos aproximar uma neutralização mútua da aberração cromática. Figura 02.04 - Reflexão e refração Determina-se experimentalmente que a constante é a relação entre os índices de refração dos meios considerados: vc’sensen =η=θθ O índice de refração ηηηηη de qualquer meio ótico é definido como η = c / v onde c é a velocidade da luz no vácuo e v a velo- cidade da luz no meio e portanto ηηηηη é sempre maior do que a unidade. Figura 02.05 - Dispersão cromática PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisII.6 sobre a qualidade destas imagens. Para isto, é necessário que passemos a considerar a teoria ondulatória da luz, e os fenômenos relacionados com a difração. Propriedades do movimento ondulatório Uma onda é o resultado da propagação de uma perturbação – os exemplos mais conhecidos resultam da queda de uma pedra em uma poça, ou uma onda sonora. Em todos os casos, corresponde a uma transferência de energia da fonte. No caso da luz, temos uma onda eletromagnética, com vibrações transversais constituídas por oscilações, definidas por vetores elétrico e magnético, ortogonais e perpendicu- lares à direção de propagação da onda. No caso geral, a direção de vibração destes vetores varia rapidamente, de maneira aleatória; poderá no entanto ser confinada a um plano, ou variar Figura 02.06 - Caminho ótico Percurso ótico O percurso de um raio luminoso em qualquer meio é o produto da velocidade pelo tempo 11111 η== definimos o percurso ótico como 1111 =η=∆ e representa a distância percorrida pela luz no vácuo, no mesmo tempo que percorre a distância no meio considerado. Caso a luz percorra diversos meios sucessivamente, os percursos óticos são aditivos (Figura 02.06) )( 3210 ++=∆ Ótica ondulatória Os conceitos de ótica geométrica vistos até aqui nos permitirão examinar a maneira pela qual o microscópio produz uma imagem aumen- tada, porém sem fornecer nenhuma indicação Tabela 02.01 - ÍNDICES DE REFRAÇÃO DE MATERIAIS PARA COMPONENTES ÓTICOS Material ηc ηd ηf V Vidro Crown 1,52042 1,52300 1,52933 58,7 Vidro Flint 1,71303 1,7200 1,73780 29,1 Quartzo fundido 1,45640 1,45845 1,46318 67,6 Fluorita 1,43252 1,43390 1,43707 95,4 Metilmetacrilato 1,49344 1,49613 1,50256 54,4 Raia C - vermelho λ = 656 nm Raia D - amarelo λ = 589 nm Raia F - azul λ = 486 nm PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A Teoria Básica da Microscopia II.7 regularmente, quando falamos de luz polarizada. Por uma série de razões, associamos o vetor elétrico aos fenômenos óticos, e nos referiremos ao mesmo quando tratarmos de vibração da luz. Uma onda eletromagnética é caracterizada pelos seguintes parâmetros - A - amplitude - ν - frequência10 - φ - fase - p - polarização Consideremos uma onda cujos desloca- mentos y, em cada lugar x estão descritos por y = f ( x ). De especial interesse é o caso em que os deslocamentos sejam harmônicos λ pi =θ= 2sensen1 O deslocamento máximo A é a amplitude; a distância entre pontos equivalentes da curva (Figura 02.07 a) é o comprimento de onda λλλλλ; o tempo entre dois pontos equivalentes é o período τττττ. Os respectivos inversos são de utilidade: o número de onda k = 1 / λλλλλ (que representa o número de ciclos na unidade comprimento) e a frequência ννννν = 1 / τττττ (que representa o número de ciclos na unidade de tempo). A onda se desloca ao longo de x com velo- cidade v. Se considerarmos uma onda que partiu da origem no tempo –t, terá, ao fim do tempo t, atingido a posição 2 em relação a uma nova onda )sen()(2sen2 ϕ−θ=λ −pi = onde λpi=ϕ 2 é denominada de diferença de fase. Denominamos de frente de onda o lugar geométrico perpendicular à direção de propa- gação, em que todos os pontos tem a mesma fase. A intensidade I = A2 exprime a vazão de energia através de uma área unitária perpendicular à direção de propagação da onda. 10 Ainda que a frequência seja a característica mais fundamental, a luz é frequentemente descrita em termos de seu comprimento de onda no ar (ou praticamente equivalente, no vácuo). Tradicionalmente, as unidades são o micron (µm, 10-3 mm) ou o Angstrom (Å, 10 -7mm),preferindo-se modernamente o nanometro (nm, 10-6 mm, 10-9 m). De acordo com o índice de refração do meio, o comprimento de onda muda - a frequência permanece constante. Figura 02.07 - a) Onda senoidal; b) Diferença de fase Figura 02.08 - Luz polarizada PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisII.8 Em determinadas condições, algumas direções de vibração da luz podem ser suprimidas ou favorecidas. No limite persiste apenas a vibração em um plano, originando-se a luz plano-polarizada. Luz polarizada é im- portante recurso para geração de contraste em microscopia, e será tratada em maior detalhe no capítulo IV. Coerência Um feixe de luz gerado por um filamento aquecido ou por descarga elétrica (mas não por um laser!), é constituído de pulsos aleatórios emitidos por cada átomo em episódios independentes entre si, com mudanças bruscas de fase. Deste modo, quando a luz é colhida de duas fontes independentes (que podem ser duas regiões distintas de uma mesma lâmpada) os dois feixes não mantém entre si uma relação de fase constante. Tais fontes luminosas são chamadas de incoerentes. Se, no entanto, a luz de uma mesma fonte é dividida em dois feixes (por exemplo, por reflexão parcial, Figura 02.09) estes mantém uma relação de fase constante entre si, e poderão interagir ocorrendo interferência quando superpostos. As condições para esta interação constituem a chamada coerência. Ondas são coerentes quando as seguintes condições são satisfeitas: - mesmo comprimento de onda - origem de um mesmo ponto da fonte luminosa - mesma direção de polarização Quando duas ondas coerentes interferem, as suas amplitudes são aditivas. Como exemplo, a intensidade resultante da interferência de duas ondas de mesma amplitude e de mesma fase I1 = a 2 22 = ( ) 2221 4 =+=+ ou seja quatro vezes a intensidade de cada onda original. Ondas coerentes que não estejam em fase deverão ter suas amplitudes somadas vetorialmente. A intensidade resultante poderá então variar no intervalo 0 < I < 4a2. No caso de ondas incoerentes, elas não interferem, e a intensidade resultante é simplesmente a soma das intensidades individuais 2 1 = 2 2 = 2 2121 2 =+=+ O princípio de Huygens Quando uma abertura em um anteparo é iluminada, projeta-se uma sombra. Esta sombra é nítida para uma abertura larga, mas seus contornos tornam-se difusos à medida que diminuímos o tamanho da abertura, e a iluminação estende-se para a região que não está diretamente exposta ao raio incidente. A este fenômeno é resultante da ocorrência de difração. Huygens propôs que cada ponto da frente de onda incidente funcionasse como uma nova fonte, gerando ondas esféricas (Figura 02.10). Estas novas fontes são coerentes entre si, e a frente de onda depois da abertura é o resultado da combinação de todas estas ondas secundárias. Figura 02.09 - Interferômetro Figura 02.10 - Princípio de Huygens (Gifkins) PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A Teoria Básica da Microscopia II.9 Este cálculo mostra que a onda se propaga na região da sombra geométrica da abertura, e que o efeito é tanto maior quanto menor a abertura. A experiência de Young A experiência proposta por Young está descrita na Figura 02.11. A primeira abertura, em conjunto com a fonte F, ilumina as abertu- ras A e B que passam a funcionar como fontes coerentes, cujas ondas interferem para produzir um conjunto de franjas de interferên- cia no anteparo T. A intensidade no ponto P depende claramente da diferença de percurso =−=∆ . A distância D é muito maior do que d ou x e ACB é praticamente um triângulo retângulo. ≈θ≈ tan Quando ∆ for um número inteiro de comprimen- tos de onda ocorrerá um máximo para λ = e um mínimo para ( ) λ+ = 21 Deduzimos portanto que a separação entre as franjas é λ : diretamente proporcional ao comprimento de onda e inversamente proporci- onal à distância entre as aberturas da grade de difração. É interessante também notar que, se a disposição da experiência for simétrica, a intensidade será zero em cada mínimo, e o dobro da soma das intensidades de A e B em cada máximo. Isto ilustra que evidentemente não há ganho de energia por difração e interferência, mas apenas uma redistribuição, como pode ser mostrado pela integração da energia total que chega ao anteparo T. Difração por uma fenda Consideremos agora a difração de um raio luminoso por uma fenda retangular. Na verdade, estaremos interessados na difração por um pequeno orifício, que estenderemos mais tarde para o caso de uma lente iluminada por um feixe de luz. Mas o tratamento matemático para o caso de uma fenda é muito mais simples; o argumento seguinte é aproximado, mas ilustra os princípios envolvidos11. 11 Os interessados em tratamento rigoroso poderão consultar um texto avançado de ótica (Jenkins and White, 1976) sobre difração de Fraunhofer e de Fresnel. Figura 02.12 - a e c) Difração de Fresnel; b e d) Difração de Fraunhofer Figura 02.11 - A experiência de Young PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI Microscopia dos MateriaisII.10 Devemos examinar dois casos distintos: quando os raios têm origem pontual (difração de Fresnel), ou quando o feixe é paralelo (fonte no infinito) (difração de Fraunhofer) (Figura 02.12). Trataremos em mais detalhe desta última, pela sua importância em microscopia. No caso da difração de Fraunhofer lentes convergentes asseguram a incidência paralela da luz (L1), e formam a figura de difração no plano focal de L2. De acordo com o princípio de Huygens, cada ponto da abertura age como fonte secundária. Notar que no caso da difração de Fresnel, cada ponto do anteparo recebe um raio de cada fonte secundária, e portanto representa a imagem da abertura. Já no caso da difração de Fraunhofer a lente L2 focalizará no anteparo todos os raios difratados na mesma direção. O perfil das intensidades resultantes é semelhante nos dois casos; no caso da difração de Fraunhofer tem a forma β β = sen 0 onde λ pi =β e β β == 2 2 0 2 sen A posição do primeiro mínimo é λ =θsen e como θ é pequeno λ ≈θ A extensão deste resultado ao caso da figura de difração formada por ondas planas através de uma abertura circular é bem mais complexa, e foi desenvolvida por Airy. Demonstra- se que a expressão anterior passa a ser λ =θ 22,1sen e a figura, denominada Disco de Airy consiste em um disco luminoso central, cercado de franjas mais fracas (Figura 02.13). O difratograma de Fraunhofer de um objeto é a sua transformada de Fourier (conversamente, a imagem do objeto é a transformada do difrato- grama). Esta propriedade é muito usada para calcular a estrutura de um cristal a partir de seu difratograma de raios-X, e como veremos mais tarde, tem larga aplicação em difração de elétrons. Consideremos a difração de uma frente de onda no plano OB. A amplitude em um ponto y é Ay, e de um elemento dy é Aydy. A diferença de fase de uma onda difratada neste elemento, relativa à origem O, é θλpi=∆ sen)2( a amplitude da onda na direção indicada é )]exp()exp([)](exp[ ω∆=∆+ω= Figura 02.13 - Disco de Airy Figura 02.14 - Difração PERTENCE A 415902_IGNEZ_CARACELLI A Teoria Básica da Microscopia II.11 O termo em colchetes [ ] é a amplitude, e a am- plitude total para toda a frente de onda na direção θθθθθ é ∫ ∫∞ =∆=∆= 0 0 )exp()exp( ∫∞ θpi 0 )sen2exp( sabemos que a transformada de Fourier se de- fine por ∫∞ ννpiν= 0 )2exp()()(
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