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Métodos rápidos de análises Microbiológica MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL Prof. Me. Marco Antonio Roqueto Métodos convencionais: Os métodos convencionais usam a cultura de microrganismos em placas contendo ágar; São laboriosos e consomem muito tempo operacional; 84% de todos os testes são baseados na contagem de células viáveis; Requerem controle de agências regulatórias nacionais e internacionais para controle oficial. Métodos novos no mercado No período de 1993 ate 2000 houve uma explosão no mercado de testes alternativos começando em países desenvolvidos. Até o ano 2000 muita confusão na área!!! Atualmente o mercado filtrou os que não funcionavam e hoje os que estão ai, são métodos confiáveis. 1. simplificação dos tradicionais 2. atividade enzimática 3. atividade antigênica 4. moleculares 5. combinação NOVOS MÉTODOS PARA ANÁLISES DE ALIMENTOS ESCOLHA DO M ÉTODO DIAGNÓ STICO - Capacidade física operacional - Volume de testes analíticos - Rastreabilidade - Validações internacionais, nacionais e internas - Rapidez na liberação de resultados - Capacidade e custo de estocagem - Custo / benefício • Vantagens em tempo de análise e liberação de resultados analíticos; • Possibilidade de eliminar etapas de trabalho intensive; • Potencial para automação; • Sempre cumprem com procedimentos de incubação ainda necessariamente; • ELISA e PCR são dominantes; • Falta de um procedimento comum de validação; • A maioria apresenta dificuldade de aceitação para fins oficiais; M é t o d o s r á p i d o s MÉTODOS RÁPIDOS OU ALTERNATIVOS O que seriam? Para que servem? Usados em que situações? Reprodutibilidade: capacidade de gerar resultados estatísticamente iguais (nem sempre ocorre). Problemas com os métodos tradicionais Sensibilidade insuficiente; Especificidade: nem sempre ocorre (podem haver falsos negativos); Repetibilidade: nem sempre se o teste for repetido por um mesmo operador inúmeras vezes se obtém o mesmo resultado; Requerem controle de agências regulatórias nacionais e internacionais para controle official (ISO, etc). Os métodos convencionais usam a cultura de microrganismos em placas contendo ágar; São laboriosos e consomem muito tempo operacional 84% de todos os testes são baseados na contagem de células viáveis MÉTODOS RÁPIDOS EM ANÁLISES MICROBIOLÓGICAS 1 – Melhorar a eficiência dos laboratórios, simplificando trabalhos, reduzindo custos e aumentando a capacidade analítica; 2 – Aumentar a confiabilidade dos resultados em relação ao preparo dos materiais, os kits vem prontos e padronizados; 3 – Aumentar a precisão nos resultados através da padronização; 4 – Mesmo assim precisa de pessoas técnicas treinadas para leitura e interpretação dos resultados. MÉTODOS RÁPIDOS – 3 Grupos 1 – Automação laboratorial; 2 – Métodos rápidos para avaliar a qualidade; 3 – Métodos rápidos para validação a inocuidade e eficiência dos testes. Pesagens e quantidades padronizadas Homogeneizadores de misturas AUTOMAÇÃO LABORATORIAL Coloque sua amostra em um copo e escolha seu fator de diluição: de 10 -1 a 10 -5 Diluir automaticamente O Easy Spiral Dilute dilui automaticamente a amostra até 5 vezes. Placa automaticamente Dilua em espiral fácil placas uma amostra em 1 placa de Petri de 30 a 1x10 12 UFC / mL Diluidor e emplacador automático Modo exponencial Modo constante Modo de circulo Modo de derramamento Membrana filtrante - Utilizada para amostras líquidas de grandes quantidade. Ex. água, refrigerantes, etc. MÉTODOS RÁPIDOS DE CONTAGEM Petri Film – pesquisa de fungos e bactérias Colilert – O teste detecta e quantifica simultaneamente coliformes totais e Escherichia coli, com resultados em 24 horas. Colilert Vantagens: Simples Não requer trabalho de preparo Execução rápida Não exige confirmação Não requer equipamento de leitura Desvantagem: Ser aprovado só p/ água Existem testes de outras marcas comerciais semelhantes (mesmo principio) a este aqui exposto esse foi citado como exemplo por ter sido o primeiro conhecido no mercado. QUANTI-TRAY/2000 Resultados: Poços amarelos = coliformes totais Poços amarelos/fluorescentes = E. coli Conte os poços positivos e consulte a tabela de NMP. Seladora Quanti-Tray Placas de Compact Dry Prontas para uso Reduz as horas de trabalho. Permite aumento de produtividade e eficiência. Uso em análises de matérias primas ou produtos acabados como alimentos, bebidas, carne e outros. CONTAGEM INDIRETA Luminômetro - leitura em números de partículas
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