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Cocos Gram Positivos

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9/19/2013
1
Cocos Gram Positivos
Staphylococcus
Streptococcus
Prof. Flávio Gimenis
9/19/2013
2
Gênero Staphylococcus
Cocos Gram positivos, com aproximadamente 1µm de diâmetro e 
tendem a formar agrupamentos em arranjos semelhantes a cachos de uva.
Cerca de 30 espécies são conhecidas e grande parte são 
comensais da pele e membrana mucosa; podem atuar como oportunistas 
causando infecções piogênicas. 
VÍDEO
9/19/2013
3
Gênero Staphylococcus
A maioria dos estafilococos é anaeróbia facultativa, catalase
positiva, imóveis e não formadores de endosporos.
Catalase (presente em Staphylococcus) e superóxido 
dismutase (presente em Staphylococcus aureus), 
inibem a destruição do micro-organismo no interior 
de células fagocíticas.
Algumas gotas de peróxido de hidrogênio a 3% (água oxigenada) são colocadas 
diretamente na colônia e uma efervescência rápida indica a produção de oxigênio 
molecular e uma prova positiva.
9/19/2013
4
9/19/2013
5
Gênero Staphylococcus
Duas espécies de Staphylococcus (Staphylococcus aureus subsp
anaerobius e Staphylococcus saccharolyticus) são anaeróbias e catalase
negativas.
9/19/2013
6
Gênero Staphylococcus
Os estafilococos coagulase positivos – Staphylococcus aureus e 
Staphylococcus intermedius e o coagulase-variável Staphylococcus hycus
são importantes patógenos dos animais domésticos.
Colônias suspeitas são emulsionadas em plasma de coelho num 
tubo ou lamina de microscopia. A aglutinação das bactérias em 
2 minutos indica a presença da coagulase. A presença dessa 
enzima constitui um importante fator de virulência. A coagulase
converte o fibrinogênio em fibrina.
9/19/2013
7
Gênero Staphylococcus
As espécies do gênero Staphylococcus estão amplamente distribuídas 
no mundo todo como comensais na pele de animais e de humanos. Também 
são encontrados em membranas mucosas do trato respiratório superior e 
urogenital inferior e como microbiota transitória no trato digestivo.
9/19/2013
8
Gênero Staphylococcus – Identificação e Diferenciação
Em espécimes clínicos, espécies do gênero Staphylococcus devem ser 
diferenciadas de espécies do Gênero Micrococcus.
Staphylococcus
Coagulase Positivo
Micrococcus
Coagulase Negativo
9/19/2013
9
Gênero Staphylococcus – Identificação e Diferenciação
Em espécimes clínicos, espécies do gênero Staphylococcus devem ser 
diferenciadas de espécies do Gênero Streptococcus.
Cocos Gram Positivos
Catalase Positivo
Cocos Gram Positivos
Catalase Negativo
9/19/2013
10
Catalase: converte o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio, tem relação
com invasão bacteriana.
Coagulase: pode depositar fibrina na superfície dos Staphylococcus aureus, 
alterando a sua ingestão por células fagocíticas ou sua destruição no
interior dessas células.
9/19/2013
11
Hialuronidase: liquefaz o ácido hialurônico
Estafiloquinase: promove a fibrinólise
Beta-lactamase: sinônimo de penicilase
Hemolisina: características hemolíticas (beta hemolisina)
Leucocidina: destruição de leucócitos (multiplicação intracelular)
Toxina esfoliativa: síndrome estafilocócica da pele escaldada
Toxina da Síndrome do Choque Tóxico: enterotoxina F
Enterotoxinas: A, B, C, D, E e F (toxinas termoestáveis)
9/19/2013
12
Proteína A – Componente superficial que se liga a porção Fc da IgG
e impede a opsonização.
Fab
Fc
9/19/2013
13
Gênero Staphylococcus
Já que estafilococos ocorrem tanto como comensais na pele e 
membranas mucosas como contaminantes ambientais , as infecções podem ter 
origem endógena ou exógena. Muitas infecções por este micro-organismo são 
oportunistas e associadas a:
- Trauma
- Imunocomprometimento
- Infecção secundaria
- Condições alérgicas
- Distúrbios endócrinos ou metabólicos
- Erros de manejo animal
9/19/2013
14
Gênero Staphylococcus
As doenças estafilocócicas de importância em animais domésticos 
são:
- Mastite
- Piodermite (piodermatite, pioderma, piodermia)
- Piemia pelo carrapato (cordeiros – Ixodes ricinus)
- Etc
9/19/2013
15
Gênero Staphylococcus
Mastite Estafilocócica Bovina: Em geral é causada por Staphylococcus aureus e 
pode se apresentar de forma clínica, subclínica ou crônica. As formas 
superagudas ou gangrenosas estão associadas a reações sistêmicas graves e 
podem ser fatais. 
9/19/2013
16
Gênero Staphylococcus
Nas mastites gangrenosas, o quarto afetado torna-se frio e cianótico, podendo 
eventualmente se desprender. A necrose tecidual é atribuída à alpha-toxina 
(hemolisina), que causa contração e contração da musculatura lisa dos vasos 
sanguíneos. A alpha-toxina promove a liberação de grânulos lisossomais pelos 
leucócitos. 
9/19/2013
17
Gênero Staphylococcus
Piodermite: A piodermite é uma das dermatopatias mais comuns em clínica de 
pequenos animais, principalmente na espécie canina.
O primeiro passo consiste em confirmar, efetivamente, o suposto diagnóstico 
de piodermite, pois as lesões cutâneas inerentes a este quadro mórbido 
assumem inúmeros aspectos, podendo mimetizar outras dermatites, tais como 
a dermatofitose, a dermatite seborreica e as dermatites autoimunes
9/19/2013
18
Gênero Staphylococcus
Tal confirmação pode ser feita mediante exame citológico do conteúdo 
presente no interior de vesículas íntegras. Faz-se um esfregaço em lâmina, que 
é submetido à coloração por corantes citológicos (Gram, Giemsa ou Novo Azul 
de Metileno). Ao exame microscópico, observam-se cocos, intra e 
extracelulares, bem como neutrófilos degenerados. 
9/19/2013
19
Gênero Staphylococcus
Após visualização de cocos em arranjo estafilococo, estabeleça 
antibioticoterapia para cocos gram positivos (baseando-se no conhecimento 
prévio de que o Staphylococcus intermedius é o agente etiológico envolvido em 
cerca de 99% dos casos de piodermite canina) Antes de se implementar a 
antibioticoterapia, coletar material para cultura e antibiograma de confirmação.
9/19/2013
20
Gênero Staphylococcus
Portanto, deve-se utilizar antibióticos b-lactamase-resistentes, isto é, que resistam 
à ação inativadora desta enzima produzida pela grande maioria das cepas de 
Staphylococcus sp. Dentre estes, incluem-se os seguintes grupos: quinolonas, 
cefalosporinas, aminoglicosídeos, penicilinas b-lactamase-resistentes, sulfas 
potencializadas, macrolídeos e lincosamídeos, lembrando que estes três últimos 
grupos são mais eficazes para o combate de piodermites primárias superficiais. 
9/19/2013
21
Gênero Staphylococcus
Quanto ao período de tratamento, para as piodermites ditas superficiais, reserva-se 
um intervalo de 10 a 15 dias, e para as profundas de 15 até 60 dias. Paralelamente 
ao uso de antibióticos sistêmicos, é de grande auxílio a utilização de xampus 
antissépticos e antiseborreicos, bem como de compressas com soluções 
antissépticas e cicatrizantes. 
9/19/2013
22
9/19/2013
23
9/19/2013
24
Gênero Streptococcus
Cocos Gram positivos que formam cadeias de diferentes 
comprimentos. São catalase negativos, anaeróbios facultativos e imóveis. São 
bactérias fastidiosas que requerem adição de sangue ou soro no meio de 
cultura. 
9/19/2013
25
Gênero Streptococcus
Os estreptococos patogênicos estão associados à formação de 
abscessos, de outras condições supurativas e de septicemia. Os estreptococos 
beta-hemolíticos são geralmente mais patogênicos. 
9/19/2013
26
Gênero Streptococcus
Espécies de importância em medicina veterinária:
- Streptococcus agalactiae (mastite – síndrome precoce)
- Streptococcus dysgalactiae
- Streptococcus equisimilis
- Streptococcus equi
- Streptococcus zooepidemicus
- Streptococcus uberis
- Streptococcus pyogenes
9/19/2013
27
O Brasil é o sexto maior produtor de leite do 
mundo, com cercade 21 bilhões de litros de 
leite/ano.
9/19/2013
28
Do ponto de vista tecnológico, a qualidade da matéria prima 
é um dos maiores entraves ao desenvolvimento e 
consolidação da indústria de laticínios no Brasil. De modo 
geral o controle da qualidadedo leite nas últimas décadas 
tem se restringido à prevenção de adulteração do produto in 
natura.
9/19/2013
29
No Brasil, a partir dos anos 90, gradativamente, algumas 
cooperativas de laticínios iniciaram a implantação de 
programas de pagamento do leite por qualidade, tendo por 
base as provas de redutase, crioscopia e contagem global de 
microrganismos aeróbios mesófilos, porém, a maioria das 
cooperativas e laticínios têm privilegiado a quantidade de 
leite entregue em detrimento da qualidade
9/19/2013
30
A qualidade do leite assume destacada importância também 
sobre o ponto de vista de saúde pública. No Brasil, embora 
não existam estatísticas disponíveis sobre o assunto, são 
frequentes os casos de doenças associadas ao consumo de 
leite cru ou de derivados produzidos com leite contaminado 
por micro-organismos patogênicos 
9/19/2013
31
9/19/2013
32
Avaliação de cada teto mamário
pela quantidade de células
somáticas
Células de descamação
Leucócitos
9/19/2013
33
Streptococcus uberis
Streptococcus dysgalactiae
Enterococcus faecalis
Staphylococcus aureus
Streptococcus agalactiae
Corynebacterium bovis
Mycoplasma sp.
Escherichia coli
9/19/2013
34
Microrganismos ambientais
X
Microrganismos infecciosos
9/19/2013
35
É estimado que para cada caso de mastite clínica na propriedade existam 
14 casos de mastite subclínica
9/19/2013
36
Grupo B (Lancefield, 1933)
Classificação a partir da composição do carboidrato C
Ramnose, N-acetilgalactosamina e Galactose
Classificados em tipos sorológicos (polissacarídeo capsular)
9/19/2013
37
Streptococcus
agalactiae
Ib
II
III
IV
VVI
VII
VIII
Ia
9/19/2013
38
III
III
III
Ia, III e IV
II
Em relação as amostras de origem bovina
Inglaterra
Alemanha
9/19/2013
39
Os polissacarídeos capsulares são fatores de 
virulência essenciais em EGB
9/19/2013
40
β-hemolisina
citolisina
formadoras de 
poros
Danifica o epitélio pulmonar em modelo animal.
Atividade reduzida por concentração fisiológica de 
dipalmitol fosfatidilcolina (componente do 
surfactante humano).
9/19/2013
41
Pigmento carotenóide
Os fenótipos de síntese de hemolisina e 
pigmento carotenóide são interligados
Amostras hiperhemolíticas são também
hiperpigmentadas
Proteção contra produtos gerados no “burst” 
oxidativo de macrófagos e neutrófilos
9/19/2013
42
Superóxido dismutase
Enzima superóxido dismutase A (gene SodA), ação sinérgica com o 
pigmento carotenóide
Detoxifica
radicais reativos
de oxigênio
9/19/2013
43
Característica da infecção por EGB
Pequeno fluxo de neutrófilo ao 
sítio de infecção
C5a peptidase é uma enzima de aproximadamente 120kDa
associada a superfície bacteriana e codificada pelo 
gene cromossomial scpB
9/19/2013
44
9/19/2013
45
9/19/2013
46
Gene
Mecanismo de 
efluxo ativo do 
antimicrobiano
Mecanismo de 
proteção 
ribossômica
Aquisição
tet(K) X Plasmídeo
tet(L) X Plasmídeo
tet(M) X Plasmídeo e Transposon
tet(O) X Plasmídeo e Transposon
Codifica uma proteína 
que altera a 
conformação do 
ribossomo e compete 
pelo sítio alvo
Codifica a proteína que 
dissocia a tetraciclina 
ligada ao ribossomo
RESISTÊNCIA A TETRACICLINA
9/19/2013
47
Sistema de ordenha manual Sistema de ordenha mecânica
9/19/2013
48
Sistema de ordenha mecanicaSistema de ordenha manual
9/19/2013
49
Anterior 
Esquerdo
Anterior 
Direito
Posterior 
Esquerdo
Posterior 
Direito
9/19/2013
50
Púrpura de 
Bromocresol (CMT)
2mL
2mL Amostra de 
Leite
9/19/2013
51
9/19/2013
52
Amostra
Normal
Mastite
Subclínica
+
Mastite
Subclínica
++
Mastite
Subclínica
+++
Mastite
Clínica
AVALIAÇÃO DA GLÂNDULA MAMÁRIA BOVINA
California Mastitis Test
9/19/2013
53
Catalase Hemólise Hipurato CAMPEsculina
9/19/2013
54
9/19/2013
55
9/19/2013
56
9/19/2013
57
Perfil genético de resistência à tetraciclina em 56 amostras de S. agalactiae de origem bovina
Perfis genéticos de resistência à tetraciclina entre 56 amostras de Streptococcus 
agalactiae de origem bovina e 10 amostras de origem caprina.
9/19/2013
58
GC-1
GC-1.4
9/19/2013
59
GC-3
9/19/2013
60
GC-4
GC-5
GC-7
9/19/2013
61
9/19/2013
62
9/19/2013
63
9/19/2013
64
Pneumonia
Septicemia
Meningite
Osteomielite
9/19/2013
65
9/19/2013
66
9/19/2013
67
GC-8
9/19/2013
68

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