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Equipamentos de Laboratório: Princípios e Fundamentos

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Aula 01
Professor: Denise Rodrigues
26274965572 - roger mendonça
Conhecimentos Específicos para EBSERH 
Teoria e exercícios comentados 
Prof. Denise Rodrigues ʹ Aula 01 
 
 
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AULA 01: Equipamentos - Princípios e Fundamentos 
 
SUMÁRIO PÁGINA 
1. Apresentação 01 
2. Equipamentos – Introdução 02 
3. Potenciômetros 03 
4. Autoclaves e Fornos 05 
5. Microscópios 08 
6. Centrífugas 17 
7. Espectrofotômetros 19 
8. Leitores de Elisa 23 
9. Lista de Questões 30 
10. Gabarito 36 
11. Referências Bibliográficas 37 
 
Apresentação 
Olá, pessoal! Eu sou Denise Rodrigues e meu objetivo com esse 
curso é auxiliar vocês na assimilação dos conteúdos relativos ao 
tópico “equipamentos: princípios e fundamentos” da parte de 
conhecimentos específicos exigidos para o cargo de Biomédico do 
concurso da EBSERH. Nesta aula, veremos os seguintes 
equipamentos: potenciômetros, autoclaves e fornos, 
microscópios, centrífugas, espectrofotômetros e leitores de 
ELISA. Esse assunto despenca em provas de concurso e, apesar de 
parecer simples, você precisa saber alguns detalhes para não se 
confundir e não perder nenhuma questão sobre isso! Então, atenção! 
Vamos começar!  
26274965572
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Conhecimentos Específicos para EBSERH 
Teoria e exercícios comentados 
Prof. Denise Rodrigues ʹ Aula 01 
 
 
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EQUIPAMENTOS 
Grande parte dos equipamentos em um laboratório é 
confeccionada em vidro, metal ou plástico e existem em diversos 
formatos e modelos, algumas vezes semelhantes a instrumentos que 
fazem parte do nosso dia a dia. Alguns deles, como os microscópios e 
as centrífugas, necessitam de energia elétrica para o seu 
funcionamento. 
Os equipamentos utilizados nos laboratórios são os mais 
variados, mas no geral todos seguem algumas regras básicas para 
sua utilização: 
- O equipamento nunca deve ser usado para uma função que não a 
sua ou fora de suas normas de utilização; 
- O equipamento nunca deve ser operado por uma pessoa com 
dúvidas a respeito do seu funcionamento; 
- Sempre que for ligar o equipamento, deve-se observar a voltagem 
correta de funcionamento. No caso de aparelhos bivolt, observar se 
existe chave para modificação da voltagem ou se a modificação é 
automática; 
- O uso de adaptadores e extensões deve ser evitado; 
- No caso de aquecimento e/ou manuseio de líquidos, deve-se ter 
cuidado em evitar contato com as partes elétricas; 
- Após a utilização, o equipamento deve ser deixado em condições 
para sua melhor conservação (desligar, limpar, fechar, cobrir, 
guardar e etc...); 
A correta utilização e conservação dos equipamentos de 
laboratório é essencial para que o profissional possa obter resultados 
com qualidade. 
Vamos agora falar um a um sobre os tópicos que a banca 
está pedindo no edital: 
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Potenciômetro (pHmetro) 
O pHmetro é um equipamento utilizado para determinar a 
concentração de pH em variadas amostras. Consiste em um eletrodo 
que é acoplado a um potenciômetro – aparelho que mede a diferença 
de potencial. Ao ser submerso na amostra, o eletrodo gera milivolts 
que são convertidos para uma escala de pH. Em resumo, o pHmetro 
permite converter o valor de potencial do eletrodo em unidades de 
pH, de 0 a 14. 
 
Modelos de pHmetro 
 
 
 
 
1. (Reis & Reis – Prefeitura Bom Despacho/SP – Técnico em 
Laboratório de Análises Clínicas – 2015). É utilizado para medir o pH 
de uma solução, ou seja, para saber se a solução é ácida, básica ou 
neutra. Antes de usar ele deve ser calibrado com solução tampão. 
Para realizar a leitura do pH as soluções devem estar a temperatura 
ambiente: 
a) pHneutron 
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b) pHmetro 
c) pHM 
d) pHbase 
Comentário: Nessa questão a banca brincou com os nomes dos 
possíveis “tipos de pH obtidos” quando utilizamos um pHmetro, 
porém, sabemos que o nome correto é pHmetro. O enunciado 
também nos dá mais informações sobre esse equipamento. 
Gabarito: B. 
 
2. (AOCP/2014/UFC/Biomédico) Os equipamentos utilizados nos 
laboratórios são os mais variados, mas no geral todos seguem 
algumas regras básicas. São regras básicas de utilização de 
equipamentos em um laboratório, EXCETO 
a) no caso do uso de aquecimento ou líquidos, deve-se ter cuidado do 
contato dos mesmos com as partes elétricas. 
b) sempre que for ligar o equipamento, é desnecessário verificar a 
voltagem, pois todos os equipamentos elétricos são bivolt. 
c) o uso de adaptadores e extensões deve ser evitado. 
d) o equipamento nunca deve ser usado para uma função que não a 
sua ou fora de suas normas de utilização. 
e) após a utilização, o equipamento deve ser deixado exatamente da 
maneira que foi encontrado (desligar, limpar, fechar, guardar). 
Comentário: uma questão fácil, desde que seja lida com atenção. 
Sabemos que nem todos os aparelhos são bivolt e devemos ter o 
cuidado de utilizar tomada com voltagem correta, de acordo com 
cada equipamento (110V ou 220V). E mesmo quando um 
equipamento é bivolt, é necessário verificar se há chave para 
mudança de voltagem. 
Gabarito: B. 
 
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Autoclaves 
A autoclave é muito utilizada em laboratórios de pesquisas e 
hospitais para a esterilização de materiais. O processo de 
autoclavagem consiste em manter o material contaminado em 
contato com vapor de água em temperatura elevada, sob pressão, 
por um período de tempo suficiente para matar todos os 
microorganismos. Existem diferentes modelos, mas os componentes 
básicos de uma autoclave são: 
- Cilindro metálico resistente, encontrado tanto na posição horizontal, 
como na vertical (autoclaves verticais x autoclaves horizontais). Na 
maioria dos modelos de autoclave, é nesse cilindro que se encontra a 
resistência que realizará o processo de aquecimento da água; 
- Tampa com parafusos de orelhas, que possibilita o fechamento 
hermético; 
- Válvulas de ar e de segurança; 
- Chave de comando, que possibilita ao operador controlar a 
temperatura; 
- Registro indicador de pressão e temperatura. 
 
Autoclave Vertical 
Fornos 
Forno Mufla: é um forno elétrico que atinge altas temperaturas, na 
ordem de 1000°C. É muito utilizado em laboratórios químicos para o 
processo de calcinação. O processo de calcinação consiste em oxidar 
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as substâncias de determinada amostra, por meio do calor. 
Geralmente, o forno mufla é mais utilizado em análises químicas de 
substâncias complexas ou na quantificação de metais, já que a 
maioria dos óxidos metálicos permanece estável a esta temperatura. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Estufa 
 No laboratório, a estufa é utilizada para criar um ambiente 
contendo calor de maneira controladaem seu interior para que os 
conteúdos nela guardados sejam mantidos em uma temperatura 
ideal, de acordo com o objetivo. Geralmente, a temperatura é 
mantida maior no seu interior do que externamente e são compostas 
de uma caixa e uma fonte de calor. Apresentam controle da 
temperatura através de termostato. 
A estufa é comumente utilizada para secagem de materiais (ex: 
vidraria), evaporação lenta, cultivo de microorganismos, 
armazenagem de substâncias líquidas com baixas temperaturas, 
esterilização, etc. 
Vamos ver os diferentes tipos de estufa, de acordo com suas 
finalidades: 
 
 
 
Estufa para esterilização (Forno de Pasteur) e secagem: são 
utilizadas em diversas áreas para eliminar qualquer agente 
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microbiológico que possa estar nos instrumentos laboratoriais. 
Esterilizar os materiais de laboratório é extremamente importante 
para que não ofereçam risco de contaminação. Nesta estufa, utiliza-
se a técnica do calor seco, em alta temperatura. Não deve ser 
utilizada para secagem de materiais volumétricos ou deve ser 
utilizada de acordo com o limite de temperatura definido, pois o calor 
pode alterar sua calibração. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Estufa de cultura ou bacteriológicas: utilizadas para incubação de 
culturas bacteriológicas à temperatura constante (geralmente 
36,5°C) por tempo variável, para crescimento e multiplicação dos 
microorganismos. São estufas comuns nos laboratórios de pesquisa, 
laboratórios de patologias clínica, nos setores de microbiologia etc... 
 
 
 
 
 
 
 
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Microscópio 
Esse é um dos mais cobrados! O microscópio é muito utilizado 
nos laboratórios para que se visualize células e/ou estruturas 
pequenas, sendo composto por dois sistemas de lentes. 
Tipos de microscópio 
Para cada tipo de análise temos um microscópio que melhor se 
encaixa. São divididos em duas categorias, de acordo com o tipo de 
iluminação utilizada: 
Óptico ou composto: a amostra é iluminada com uma fonte de luz. 
Estes apresentam dois sistemas de lentes, um nas oculares e outro 
nas objetivas. Utilizados amplamente nos laboratórios clínicos. Os 
mais comuns são: 
De campo claro: o objeto a ser analisado é visto contra um campo 
claro de exame. Adequados para visualizar amostras coradas como, 
por exemplo, esfregaços de sangue corados. 
De contraste de fase: é melhor para visualizar células não coradas, 
que são quase sempre transparentes. Se adicionar um condensador 
de fase e objetivas especiais, o microscópio de campo claro pode se 
tornar um de contraste. Este microscópio é muito útil para amostras 
de sedimentos de urina e na contagem de plaquetas. 
De fluorescência: usa luz ultravioleta para iluminar a amostra, 
permitindo que objetos corados com corantes fluorescentes sejam 
observados. Por exemplo: detectar presença de anticorpos 
conjugados a fluorocromos e em análises de DNA. 
Eletrônico: utiliza um feixe de elétrons no lugar dos fótons utilizados 
em um microscópio óptico convencional. Amplamente utilizado em 
pesquisa. Oferece uma ampliação e um poder de resolução muito 
maiores que o microscópio óptico e objetos muito menores podem 
ser visualizados. Existem dois tipos de microscópios eletrônicos: 
Microscópio Eletrônico de Transmissão (MET) - possui 
sistemas de iluminação e vácuo que produzem feixes de elétrons de 
alta energia que, ao incidir sobre uma amostra de tecido ultrafina (na 
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espessura de nanometro), fornecem imagens planas, imensamente 
ampliadas, possuindo a capacidade de aumento útil de até um milhão 
de vezes e assim permitindo a visualização de moléculas orgânicas, 
como o DNA, RNA, algumas proteínas, etc. A interação dos elétrons 
transmitidos através da amostra forma uma imagem que é ampliada 
e focada em um dispositivo de imagem, como uma tela fosforescente 
e visualizada com um vidro de proteção, ou é projetada em um 
monitor. 
Microscópio Eletrônico de Varredura – o feixe de elétrons 
realiza uma espécie de varredura, um “escaneamento” da superfície 
da amostra revestida por metal e é gerada uma imagem 
tridimensional. 
 
 
 
 
Partes do Microscópio Óptico 
Oculares: onde colocamos os olhos, é o sistema de lentes que fica 
mais próximo dos olhos, podendo ter uma ocular, duas oculares ou 
três oculares (monocular, binocular e trinocular, respectivamente). 
Estas ficam presas ao cilindro ou tubo, conectado ao braço do 
microscópio. O aumento fornecido pela ocular está, geralmente, 
gravado nela própria. Por exemplo: 5x, 8x, 10x (se diz “dez vezes”), 
20x etc... 
Lentes objetivas: é o sistema de lentes que fica mais próximo ao 
material a ser analisado. A face anterior do braço do microscópio 
possui um tambor giratório ou revólver, onde as objetivas são presas. 
A maioria dos microscópios têm 3 objetivas ou lentes de aumento: de 
pequeno aumento (10 ou 20x), a de maior aumento (40, 43 ou 
45x) e a objetiva de imersão a óleo (aumenta 95, 97 ou 100x). 
Sendo que cada objetiva é marcada com bandas de cores e seu poder 
de aumento em geral estará gravado na mesma. 
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Assim, para poder determinar o aumento de um 
microscópio, multiplique o aumento marcado na ocular pelo 
aumento da objetiva. 
O poder do microscópio fornecer uma imagem clara e com 
detalhes finos do objeto analisado é chamado de resolução (nitidez). 
 
 
 
 
 
3. (AOCP/2015/EBSERH/HDT-UFT – Técnico em Análises Clínicas) 
Para análise de um material ao microscópio óptico, utilizou-se a 
objetiva com 10x de aumento. Considerando o mecanismo de 
aumento de um microscópio, qual será o aumento final do objeto? 
a) 1 vez 
b) 10 vezes 
c) 100 vezes 
d) 1000 vezes 
e) 10000vezes 
Comentário: Oba! Já temos uma questão bem interessante! Como 
falei acima, para calcularmos o aumento de um microscópio basta 
multiplicar o valor do aumento da lente ocular (aquela em que você 
coloca os olhos) pelo aumento da lente objetiva (a que fica perto do 
material que você está observando) e então encontrará o aumento 
total. Nesse caso, devemos multiplicar o aumento da objetiva que é 
de 10x (segundo o enunciado) por 10! Logo, nossa resposta será: 
100 vezes de aumento final do objeto. Certo? 
Gabarito: C. 
Vamos continuar estudando as partes de um 
microscópio... 
Fontes de luz, condensador e diafragma: o condensador é o 
aparato localizado abaixo da platina, que concentra e direciona a luz 
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para a objetiva. O diafragma ou íris é o que regula a quantidade de 
luz que incide sobre a amostra a ser visualizada e o ajuste deste 
diafragmaoferece uma imagem com maior ou menor contraste. Já o 
diafragma do campo é a fenda ajustável anexada à base do 
microscópio. 
Braço do microscópio: conecta as objetivas e as oculares à base do 
microscópio e é nesta base que se encontra a luz ou espelho, que 
fornece a luz ao objeto a ser analisado. Nesta luz ou espelho tem um 
condensador móvel e o diafragma do microscópio. O condensador 
foca ou direciona a luz disponível até a objetiva, se for elevado ou 
baixado, já o diafragma, localizado dentro do condensador, regula a 
quantidade de luz que vai “bater” no objeto a ser examinado. 
Macrométrico e o micrométrico: estes são os dois botões de 
ajuste que podem estar localizados nas laterais da base do 
microscópio. O macrométrico (ajuste amplo) é utilizado para focar 
com o aumento pequeno, já o micrométrico (ajuste fino) é utilizado 
para dar uma imagem mais nítida após o objeto ter sido focado com 
o macrométrico. 
 
 
 
4. (AOCP/2015/EBSERH/HDT-UFT – Técnico em Análises Clínicas) Um 
técnico está examinando uma lâmina no microscópio óptico e para 
realizar o ajuste do foco ele deve utilizar: 
a) o macrométrico e micrométrico 
b) o charriot 
c) o revólver 
d) as oculares 
e) o condensador 
Comentário: Sempre que a banca falar em ajustar o foco, devemos 
nos lembrar da parte do microscópio que é responsável por isso, na 
resposta deve estar o macrométrico e/ou o micrométrico. 
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Gabarito: A. 
 
A distância que se tem entre a objetiva e a lâmina, quando o 
objeto está focado é chamado de distância de trabalho. Quanto 
maior for o aumento, menor será a distância. O uso do macrométrico 
deve ser evitado nesse caso, para que a objetiva não bata na lâmina. 
Platina do microscópico: é sustentada entre o revólver e a fonte de 
luz, servindo para suportar o objeto a ser examinado e possui uma 
“presilha” para prender a lâmina. Existe ainda outro sistema, que é o 
Charriot, onde um suporte especial para lâmina é móvel e corre por 
cima da platina e com botões para fazer o movimento para a direita e 
esquerda e para frente e para trás. 
 
 
 
5. (AOCP/2015/EBSERH/HE - UFSCAR – Técnico em Análises Clínicas) 
Em um microscópio óptico, o local onde a lâmina é colocada para ser 
analisada é denominado: 
a) objetiva 
b) revólver 
c) Charriot 
d) Condensador 
e) Platina 
Comentário: Essa foi super tranquila, não é mesmo? Podemos 
imaginar que a platina é uma espécie de “mesa”, que irá “segurar” a 
lâmina a ser observada. 
Gabarito: E. 
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Logo abaixo apresento as partes do microscópio, para que você 
consiga associar ao que leu acima. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Como ajustar a ocular em binóculos binoculares? 
As oculares devem ser ajustadas para cada olho 
individualmente. O ajuste correto da distância entre as oculares é 
aquele que permite observar a imagem em um campo único. 
 
E as 3 objetivas, como podemos usar? 
A objetiva de 4x a 10x é utilizada para localizar os objetos e 
visualizar os objetos grandes. Já a objetiva de grande aumento 
(40x) é utilizada quando são necessários maiores aumentos ou em 
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procedimentos como contagem de células e visualização de 
sedimento urinário. A objetiva de imersão em óleo (100x) é 
utilizada para ver células de sangue coradas, reação de tecidos e 
lâminas coradas contendo microrganismos ou, quando se quer um 
aumento ainda maior. A objetiva de imersão em óleo é assim 
chamada porque sua utilização requer o uso de uma gota de óleo. 
Para devida conservação, após o uso, este óleo deve ser retirado 
com gaze ou papel especial para lente. 
 
6. (AOCP/2015/EBSERH/HU-UFJF – Técnico em Análises Clínicas) 
Durante o manuseio de microscópio óptico, é obrigatório o uso de 
óleo de imersão para observação com qual das lentes objetivas? 
a) 1x 
b) 5x 
c) 10x 
d) 20x 
e) 100x 
Comentário: o óleo de imersão sempre será para a objetiva de 
imersão em óleo, ou seja, o maior aumento que se quer ter. Sendo 
assim, a resposta será aumento de 100x! 
Gabarito: E. 
E como devemos ajustar a luz? 
O ajuste adequado é essencial para uma boa microscopia. O 
condensador e diafragma devem ser ajustados de acordo com a 
objetiva a ser utilizada e o tipo de material a ser analisado. Como 
assim? 
 
 
 
 
Bem, quando for analisar, por exemplo, com a objetiva de 
imersão, o condensador deve estar levantado de modo que quase 
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toque a lâmina, enquanto o diafragma deve estar totalmente aberto. 
Já quando olhamos objetos com pequeno aumento, o condensador 
deve estar abaixado, de modo que reduza o brilho da luz e aumente o 
contraste. 
E quais os cuidados devemos ter com o microscópio e 
com as lentes? 
As lentes sempre devem ser limpas antes e após a sua 
utilização, pois, por exemplo, se o óleo de imersão permanecer na 
lente, a cola que a unem com a objetiva pode amolecer. 
E o transporte e armazenamento do microscópio? 
Deve estar em posição permanente, em uma mesa sólida e 
livre de vibração. Se for transportá-lo sempre deve-se segurar com 
uma mão a base e a outra mão o braço do microscópio. Quando não 
estiver em uso deve ser deixado com a objetiva de menor aumento, 
em posição, e o revólver baixo, a platina centralizada e uma capa 
deve estar cobrindo-o. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
7. (IBFC/2015/EBSERH/CHC –UFPR – Técnico em Análises clínicas) O 
microscópio que permite visualizar detalhes internos de 
microrganismos é: 
a) microscópio de contraste de fase 
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b) microscópio de campo claro 
c) Microscópio de fluorescência 
d) Microscópio de campo escuro 
Comentário: Apenas para te relembrar os tipos de microscópio que 
temos. Essa classificação foi uma das primeiras coisas que vimos 
nesta aula. Então lembre-se: o microscópio de contraste de fase é o 
melhor para visualizar células não coradas, que são quase 
transparentes. 
Gabarito: A. 
 
8. (AOCP/2015/EBSERH/HC-UFG– Técnico em Análises Clínicas – 
2015) O equipamento laboratorial que pode ser utilizado para 
secagem de materiais, esterilização ou ambiente de crescimento 
microbiano é: 
a) o banho maria 
b) a estufa 
c) a autoclave 
d) o fluxo laminar 
e) a mufla 
Comentário: Super tranquila essa questão, certo? Letra B é a 
correta. A respeito do fluxo laminar, é discutido na aula de 
biossegurança, ok? E a mufla? Bem, o Forno Mufla é um 
equipamento muito utilizado para realizar calcinação de substâncias. 
Calcinação é o processo de oxidação das substâncias presentes na 
amostra, também utilizado para análises químicas de substâncias 
complexasou na quantificação de metais. Opera em faixas de 
temperaturas em torno de 1000ͼ C a 1500ͼ C, dependendo do 
modelo escolhido. 
Gabarito: B. 
 
9. (Reis & Reis/2015/Prefeitura Bom Despacho/SP – Técnico em 
Laboratório de Análises Clínicas). Pode chegar até 180oC. Não é 
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recomendado utilizar material volumétrico, pois pode perder sua 
calibração, também pode ser utilizada para análises físico-química: 
a) Estufa de secagem 
b) Capela 
c) Manta de aquecimento 
d) Mufla 
Comentário: Coloquei essa questão para você ver como não haverá 
dúvidas na hora que a banca te perguntar a respeito da estufa! 
Gabarito: A. 
 
Centrífuga 
Equipamento que gira em alta velocidade, fazendo com que a 
substância mais densa seja “forçada” a sedimentar (decantar) devido 
à ação da força centrífuga. Existem alguns tipos de centrífuga: 
Microhematócrito: para hematócrito pelo sistema de tubos capilares 
e leitura por régua. 
Macro centrífuga: para separação de fases de diferentes densidades 
em substâncias líquidas em tubos. 
Micro centrífuga: para centrifugação de microtubos. 
Centrífuga para microplaca 
Ultracentrífuga: tipo específico de centrífuga necessário para 
realizar a ultracentrifugação. As velocidades alcançadas pelos rotores 
nestas centrífugas são muito elevadas, obtendo-se acelerações até 
500000 g. Neste tipo de centrífuga, a câmara onde se situa o rotor é 
refrigerada e encontra-se sob vácuo, para evitar o superaquecimento 
por atrito com o ar e para permitir que altas velocidades sejam 
atingidas. 
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Modelos de Centrífugas 
 
Microtubos de centrifugação 
 
 
 
Tubo de Falcon– tubos cônicos e estéreis, suportam o processo de 
autoclavagem e são muito utilizados para centrifugação. 
 
 
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10. (AOCP/2015/EBSERH/HC-UFG– Técnico em Análises Clínicas) 
Durante a rotina laboratorial, um técnico precisa fazer a separação do 
soro de outros componentes sanguíneos. Qual dos equipamentos a 
seguir deve ser utilizado no procedimento? 
a) um banho maria 
b) um termociclador 
c) uma estufa 
d) uma centrífuga 
e) um agitador 
Comentário: o processo de centrifugação no laboratório visa a 
separação de mistura por sedimentação, onde o corpo mais denso da 
mistura sólido-líquida deposita-se no fundo do tubo devido à ação da 
gravidade. 
Gabarito: D. 
 
Espectrofotômetro 
Equipamento amplamente utilizado nas áreas de bioquímica e 
biologia molecular nos laboratórios de análises clínicas e química, 
dentre outros. Tem a função de medir e comparar a quantidade de 
luz (energia radiante) absorvida por uma determinada solução. Ou 
seja, é usado para medir (identificar e determinar) a concentração de 
substâncias que absorvem energia radiante, em um solvente. 
A radiação eletromagnética se propaga numa velocidade 
constante, mas depende do índice de refração meio que atravessa. 
Em análise, o importante das soluções coloridas ou incolores é que a 
radiação absorvida é uma característica da amostra 
absorvente. O espectro de absorção é característico para cada 
espécie química, sendo possível a identificação de uma espécie 
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química através do seu espectro de absorção. O espectro de energia 
radiante é dividido em várias regiões e a espectrometria pode ser 
realizada nas regiões ultravioleta (UV) e Visível. 
 
 
 
 
 
 
 
 
A região do espectro do ultravioleta é na faixa de 200 a 400 nm 
e a da luz visível é entre 400 e 700 nm. 
Em geral, um espectrofotômetro possui uma fonte estável de 
energia radiante (normalmente uma lâmpada incandescente), um 
seletor de faixa espectral (monocromatizadores como os prismas, que 
selecionam o comprimento de onda da luz que passa através da 
solução de teste), um recipiente para colocar a amostra a ser 
analisada (um recipientes apropriado como uma cubeta ou tubo de 
ensaio) e um detector de radiação, que permite uma medida 
relativa da intensidade da luz. 
Observações: 
- O detector são fotocélulas que detectam a quantidade de radiação 
transmitida após a passagem pela amostra, porém, o resultado pode 
ser convertido em quantidade de radiação absorvida pela amostra. E 
um registrador transforma o sinal elétrico que chega ao detector e 
amplificador em energia mecânica fazendo o registrador mover-se. 
- A amostra deve estar em uma cubeta de quartzo quando a radiação 
for na região espectral do ultravioleta. Quando for na região da luz 
visível usa-se os de vidro por ter uma melhor dispersão. 
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- O espectrofotômetro registra dados de absorbância em função do 
comprimento de onda (┡). A característica mais importante do 
espectrofotômetro é a seleção de radiações monocromáticas. 
- Lâmpadas: 
Lâmpada de filamento de Tungstênio: é uma fonte de radiação 
que emite no visível e no infravermelho próximo, ou seja, produz 
uma radiação útil para o funcionamento do espectrofotômetro na 
faixa de 320 a 2500 nm. A lâmpada opera em uma temperatura de 
3000 K. 
Lâmpada de descarga de Deutério: é uma fonte de radiação que 
emite no ultravioleta (UV), ou seja, produz radiação útil para o 
espectrofotômetro na faixa de 200 a 400 nm. Nessa lâmpada os 
elétrons são excitados por uma descarga e quando voltam para seus 
estados fundamentais, emitem a radiação. 
Lâmpada de vapor de Mercúrio: é uma fonte de radiação que 
emite no visível e no ultravioleta, ou seja, produz uma radiação útil 
para o espectrofotômetro na faixa de 300 a 600 nm. 
Resumindo, a base da espectrofotometria é passar um feixe de 
luz através da amostra e fazer a medição da intensidade da luz que 
atinge o detector. O espectrofotômetro compara quantitativamente a 
fração de luz que passa através de uma solução de referência e uma 
solução de teste. 
Veja figuras: 
 
 
 
Modelos de Espectrofotômetros 
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Esquema dos componentes de um Espectrofotômetro 
 
Cubeta: é um pequeno tubo circular ou quadrado, selado em uma 
das extremidades, feito de plástico, vidro ou quartzo. As cubetas 
devem ser claras ou transparentes o quanto possível, além de não 
conter impurezas ou sujeiras que possam afetar a leitura É usada 
para analisar amostras por métodos espectrofotométricos. 
 
 
 
 
 
 
 
Nano Espectrofotômetro: é um espectrofotômetro para 
quantificação da concentração e pureza de ácidosnucleicos, 
utilizando dois microlitros de amostra. Adequado para utilização em 
pesquisas, principalmente na área de biologia molecular. 
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Leitores de Elisa 
O termo ELISA vem da a sigla em inglês para Enzyme Linked 
Immunosorbent Assay. Trata-se de técnica imunoenzimática (ensaio 
imunoenzimático ou ainda enzimaimunoensaio), termo genérico para 
um grande número de testes que permitem ensaios quali- e 
quantitativos, para a detecção tanto de antígenos quanto de 
anticorpos em amostras biológicas. Os ensaios imunoenzimáticos tem 
como princípio uma interação primária entre Ag-Ac que é visualizada 
devido ação de uma enzima sobre seu substrato e formação de 
produto solúvel colorido, cuja determinação é feita medindo-se a 
densidade ótica da solução por espectrofotometria. O leitor de 
ELISA é o equipamento de escolha para leitura espectrofotométrica 
ao final da técnica de ELISA devido a algumas vantagens. 
Vantagens do leitor de ELISA: 
- Um espectrofotômetro requer entre 400 microlitros e 4 mililitros de 
solução da amostra para leitura, dependendo do fabricante e modelo. 
Um leitor de placas ELISA necessita de cerca de 2 a 100 microlitros, 
ou seja, requer uma quantidade de amostra mínima para gerar o 
resultado. 
Os leitores de placa ELISA medem mais amostras em um curto 
período de tempo. Um espectrofotômetro mede de uma a seis 
amostras de cada vez. Geralmente, uma microplaca mede 96 
amostras de uma vez. 
A chamada “fase sólida” de um teste de ELISA pode ser 
constituída por partículas de agarose, poliacrilamida, dextrano, 
poliestireno e etc... Geralmente, é realizado em placas plásticas 
(poliestireno) de microtitulação de fundo chato, com 96 poços, 
dispostos em 12 colunas de 8 poços, marcadas lateralmente e na 
parte superior. As placas plásticas são as mais difundidas por 
permitirem múltiplos ensaios e a automação. Veja a figura de uma 
placa utilizada para técnica de ELISA: 
 
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Microplaca: chamada de placa de titulação, de microtitulação) ou 
ainda microplaca é uma placa plana com múltiplos "poços", "vasos" 
ou ainda "células" ou "celas". Cada poço é usado como um pequeno 
tubo de ensaio para a reação. Utilizadas em análises de 
microbiologia, sorologia (Ex: ELISA), além de transporte e 
armazenamento de amostras. 
 
Micropipeta eletrônica multicanal: volume variável ou fixo – para 
pipetar líquidos com precisão, possibilitando múltiplas aplicações 
simultâneas. 
 
 
 
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Após as questões básicas, vamos exercitar o que já foi 
aprendido e aprofundar o estudo, pois ao resolver questões de 
concursos para biomédico, iremos abordar em mais detalhes o que já 
vimos! 
 
 
 
 
 
11. (COTEC/UNIMONTES/2016/Biomédico - Pref. Guaraciama/MG) 
Analise a figura abaixo que traz as partes básicas para o 
funcionamento de um espectrofotômetro. 
 
 
Em relação às funções das partes de um espectrofotômetro 
apresentadas na figura acima, assinale a alternativa INCORRETA. 
A) O registrador transforma a energia mecânica que chega ao 
detector e amplificador em sinal elétrico. 
B) O detector irá detectar a quantidade de radiação transmitida após 
a passagem pela amostra. 
C) A lâmpada atua como fonte de radiação. 
D) O filtro seleciona a luz em seus vários ┡. 
Comentário: O registrador recebe sinal elétrico que chega do 
detector e o transforma em energia mecânica fazendo o registrador 
mover-se. 
Gabarito: A. 
 
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12. (COTEC/UNIMONTES/2015/ Biomédico - Pref. Capitão Enéas/MG) 
Os espectrofotômetros são aparelhos capazes de registrar dados de 
absorbância ou transmitância em função do comprimento de onda. 
Das alternativas abaixo, qual representa a sequência CORRETA dos 
componentes principais de um espectrofotômetro? 
A) Monocromador, Fonte de Luz, Amostra, Detector e Registrador. 
B) Amostra, Fonte de Luz, Monocromador, Detector e Registrador. 
C) Detector, Fonte de Luz, Amostra, Monocromador e Registrador. 
D) Fonte de Luz, Monocromador, Amostra, Detector e Registrador. 
Comentário: conforme descrição e figura que vimos, apenas letra D 
está correta. 
Gabarito: D. 
 
13. (AOCP/2015/ Biomédico - EBSERH/HC-UFG) Existem termos 
descritivos para tipos de centrífugas, mas não são definições 
rigorosas, e uma centrífuga pode se encaixar em várias categorias. 
Qual é a centrífuga que pode ser utilizada para precipitações de 
grande volume de etanol, peletização de bactérias, colunas rotatórias, 
precipitações de proteínas e que é também conhecida como uma 
centrífuga de alto desempenho? 
(A) Centrífuga de bancada. 
(B) Ultracentrífuga. 
(C) Centrífuga de alta velocidade. 
(D) Ultracentrífuga de bancada. 
(E) Centrífuga clínica. 
Comentário: atenção, para as necessidade descritas no enunciado, a 
centrifuga deve ser de alta velocidade 
Gabarito: C. 
 
14. (AOCP/2015/ Analista em Saúde Pública - Biomédico – 
FUNDASUS) Dentro de um laboratório hospitalar, o setor que 
apresenta as seguintes estruturas em sua bancada: microscópio, 
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centrífugas (macro e micro), tubos de hemólise, tubos com 
anticoagulantes, EDTA, seringas, cronômetros, banho maria, câmara 
de Neubauer, lâminas e lamínulas, tubos e capilares denomina-se: 
A) parasitologia. 
B) microbiologia. 
C) hematologia. 
D) urinálise. 
E) bioquímica. 
Comentário: questão bem geral da banca AOCP sobre 
conhecimentos da estrutura de um laboratório. Tem que saber! Mas é 
fácil: setor de hematologia! 
Gabarito: C 
 
15. (AOCP/2015/ Biomédico - EBSERH/HE-UFSCAR) Com relação aos 
aparelhos utilizados em laboratórios, assinale a alternativa que 
apresenta corretamente o nome do aparelho e sua função. 
(A) O densitômetro é o aparelho que mede as frações proteicas em 
uma eletroforese, sendo que ele dosa também as proteínas totais. 
(B) O microscópio comum tem a função de permitir a visualização e 
contagem de células, bactérias, fungos e vírus. 
(C) O espectrofotômetro, muito utilizado em bioquímica, tem a 
função de medir a absorbância e ou a transmitância de uma 
determinada substância. 
(D) Centrífuga é um aparelho com função de separar partículas de 
uma solução na qual estão suspensas. A ultracentrífuga trabalha em 
velocidade muito alta e não requer câmara refrigerada. 
(E) O pHmetro é o aparelho que serve para verificar o pH das 
soluções. Para a medida do pH basta colocar o eletrodo na solução 
que se queira medir. 
Comentário: Letra A errada, pois o densitômetro mede densidade 
óptica, com variadas aplicações. Letra B errada pois com o 
microscópio ótico não é possívelvisualização de vírus, por exemplo. 
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Letra C é nossa alternativa correta. Letra D errada pois as centrífugas 
permitem a separação por promover a sedimentação por ação da 
força centrífuga e a ultra centrífuga requer câmara refrigerada para 
seu funcionamento. Letra E errada pois a medida do pH requer 
correta utilização do pHmetro, o que inclui a lavagem do eletrodo em 
solução específica e outras etapas, conforme segue: 
 
Medindo o pH de uma solução 
1. Ligue o pHmetro; 
2. Retire o medidor do pH de dentro do protetor, tomando cuidado 
para não derramar a solução de proteção; 
3. Utilizando água destilada lave os medidores de temperatura e 
pH deixando a sobra escorrer em um béquer; 
4. Após lavar enxugue levemente com papel absorvente, apenas 
para tirar o excesso de água da ponta dos medidores; 
5. Insira os dois medidores dentro da solução que se quer medir o 
pH de modo que fiquem pelo menos 4cm imersos; 
6. Espere até a medida estabilizar; 
7. Após medir o pH retire os medidores da solução; 
8. Lave os medidores novamente, com água destilada; 
9. Guarde o medidor de pH dentro da solução protetora. 
Importante: 
-Sempre se lembre de lavar os medidores antes e depois de colocá-
los em qualquer solução. 
- O pHmetro deve ser calibrado uma vez por mês. 
- Toda vez que o pHmetro for desligado da tomada é necessário que 
seja calibrado novamente. 
Gabarito: C. 
 
16. (AOCP/2014/UFC/Biomédico) O equipamento que faz medições 
de pH através de um eletrodo de vidro que fica mergulhado na 
solução a ser medida, é o 
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a) banho-maria. 
b) destilador. 
c) vórtex. 
d) fotômetro de chama. 
e) potenciômetro. 
Comentário: questão sem risco de errar: potenciômetro! 
Gabarito: E. 
 
17. (AOCP/2015/ Biomédico - EBSERH/HE-UFPEL) Um dos aparelhos 
mais importantes do laboratório é o espectrofotômetro, utilizado para 
análise quantitativa de substâncias contidas em uma amostra. Em 
relação ao assunto, assinale a alternativa correta. 
(A) A medida quantitativa é realizada por meio da medida da 
absorbância da substância encontrada dividida pela absorbância do 
padrão multiplicado pela concentração do padrão. 
(B) A medida quantitativa é realizada por meio da medida da 
absorbância do padrão dividido pela absorbância da substância 
encontrada multiplicada pela concentração do padrão. 
(C) Nesse aparelho, pode-se também medir a transmitância, sendo 
esta proporcional à absorbância. 
(D) Nesse aparelho, a quantidade de luz emitida por uma quantidade 
de substância é inversamente proporcional à sua concentração. 
(E) Todo espectrofotômetro possui uma fonte de luz, que é em geral 
uma lâmpada de tungstênio para a luz visível e de deutério para a luz 
infravermelha. 
Comentário: Encontramos a única sentença correta logo na primeira 
alternativa: 
Padrão: abs. do padrão = concentração conhecida do padrão 
Amostra: abs. da amostra = X (concentração desconhedida da 
amostra) 
Portanto, a concentração da amostra que queremos encontrar será 
igual a Abs. da mostra multiplicada pela concentração do padrão, 
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dividida pela absorvância do padrão. É uma regra de três básica! As 
demais contém erros:, na letra b temos uma descrição de cálculo 
errada, na verdade transmitância é inversamente proporcional à 
absorvância! Grave isso! Na espectrofotometria não se trata de 
medir emissão de luz por substâncias e a lâmpada de tungstênio 
emite luz visível mas a de deutério emite radiação UV. 
Gabarito: A 
 
Chegamos ao fim de nossa aula 01, pessoal! Espero que 
tenham gostado! Se precisarem, estou disponível por meio do fórum 
para tirar dúvidas. Estudem muito, estarei torcendo para sua 
dedicação seja plenamente recompensada!  
Bons estudos! 
Denise Rodrigues 
 
Lista de Questões 
 
1. (Reis & Reis – Prefeitura Bom Despacho/SP – Técnico em 
Laboratório de Análises Clínicas – 2015). É utilizado para medir o pH 
de uma solução, ou seja, para saber se a solução é ácida, básica ou 
neutra. Antes de usar ele deve ser calibrado com solução tampão. 
Para realizar a leitura do pH as soluções devem estar a temperatura 
ambiente: 
e) pHneutron 
f) pHmetro 
g) pHM 
h) pHbase 
 
2. (AOCP/2014/UFC/Biomédico) Os equipamentos utilizados nos 
laboratórios são os mais variados, mas no geral todos seguem 
algumas regras básicas. São regras básicas de utilização de 
equipamentos em um laboratório, EXCETO 
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a) no caso do uso de aquecimento ou líquidos, deve-se ter cuidado do 
contato dos mesmos com as partes elétricas. 
b) sempre que for ligar o equipamento, é desnecessário verificar a 
voltagem, pois todos os equipamentos elétricos são bivolt. 
c) o uso de adaptadores e extensões deve ser evitado. 
d) o equipamento nunca deve ser usado para uma função que não a 
sua ou fora de suas normas de utilização. 
e) após a utilização, o equipamento deve ser deixado exatamente da 
maneira que foi encontrado (desligar, limpar, fechar, guardar). 
 
3. (AOCP/2015/EBSERH/HDT-UFT – Técnico em Análises Clínicas) 
Para análise de um material ao microscópio óptico, utilizou-se a 
objetiva com 10x de aumento. Considerando o mecanismo de 
aumento de um microscópio, qual será o aumento final do objeto? 
a) 1 vez 
b) 10 vezes 
c) 100 vezes 
d) 1000 vezes 
e) 10000vezes 
 
4. (AOCP/2015/EBSERH/HDT-UFT – Técnico em Análises Clínicas) Um 
técnico está examinando uma lâmina no microscópio óptico e para 
realizar o ajuste do foco ele deve utilizar: 
a) o macrométrico e micrométrico 
b) o charriot 
c) o revólver 
d) as oculares 
e) o condensador 
 
5. (AOCP/2015/EBSERH/HE - UFSCAR – Técnico em Análises Clínicas) 
Em um microscópio óptico, o local onde a lâmina é colocada para ser 
analisada é denominado: 
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f) objetiva 
g) revólver 
h) Charriot 
i) Condensador 
j) Platina 
 
6. (AOCP/2015/EBSERH/HU-UFJF – Técnico em Análises Clínicas) 
Durante o manuseio de microscópio óptico, é obrigatório o uso de 
óleo de imersão para observação com qual das lentes objetivas? 
f) 1x 
g) 5x 
h) 10x 
i) 20x 
j) 100x 
 
7. (IBFC/2015/EBSERH/CHC –UFPR – Técnico em Análises clínicas) O 
microscópio que permite visualizar detalhes internos de 
microrganismos é: 
e) microscópio de contraste de fase 
f) microscópio de campo claro 
g) Microscópio de fluorescência 
h) Microscópio de campo escuro 
 
8. (AOCP/2015/EBSERH/HC-UFG– Técnico em Análises Clínicas – 
2015) O equipamento laboratorial que pode ser utilizado para 
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f) o banho maria 
g) a estufa 
h) a autoclave 
i) o fluxo laminar 
j) a mufla 
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9. (Reis & Reis/2015/Prefeitura Bom Despacho/SP – Técnico em 
Laboratório de Análises Clínicas). Pode chegar até 180oC. Não é 
recomendado utilizar material volumétrico, pois pode perder sua 
calibração, também pode ser utilizada para análises físico-química: 
e) Estufa de secagem 
f) Capela 
g) Manta de aquecimento 
h) Mufla 
 
10. (AOCP/2015/EBSERH/HC-UFG– Técnico em Análises Clínicas) 
Durante a rotina laboratorial, um técnico precisa fazer a separação do 
soro de outros componentes sanguíneos. Qual dos equipamentos a 
seguir deve ser utilizado no procedimento? 
f) um banho maria 
g) um termociclador 
h) uma estufa 
i) uma centrífuga 
j) um agitador 
 
11. (COTEC/UNIMONTES/2016/Biomédico - Pref. Guaraciama/MG) 
Analise a figura abaixo que traz as partes básicas para o 
funcionamento de um espectrofotômetro. 
 
 
Em relação às funções das partes de um espectrofotômetro 
apresentadas na figura acima, assinale a alternativa INCORRETA. 
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A) O registrador transforma a energia mecânica que chega ao 
detector e amplificador em sinal elétrico. 
B) O detector irá detectar a quantidade de radiação transmitida após 
a passagem pela amostra. 
C) A lâmpada atua como fonte de radiação. 
D) O filtro seleciona a luz em seus vários ┡. 
 
12. (COTEC/UNIMONTES/2015/ Biomédico - Pref. Capitão Enéas/MG) 
Os espectrofotômetros são aparelhos capazes de registrar dados de 
absorbância ou transmitância em função do comprimento de onda. 
Das alternativas abaixo, qual representa a sequência CORRETA dos 
componentes principais de um espectrofotômetro? 
A) Monocromador, Fonte de Luz, Amostra, Detector e Registrador. 
B) Amostra, Fonte de Luz, Monocromador, Detector e Registrador. 
C) Detector, Fonte de Luz, Amostra, Monocromador e Registrador. 
D) Fonte de Luz, Monocromador, Amostra, Detector e Registrador. 
13. (AOCP/2015/ Biomédico - EBSERH/HC-UFG) Existem termos 
descritivos para tipos de centrífugas, mas não são definições 
rigorosas, e uma centrífuga pode se encaixar em várias categorias. 
Qual é a centrífuga que pode ser utilizada para precipitações de 
grande volume de etanol, peletização de bactérias, colunas rotatórias, 
precipitações de proteínas e que é também conhecida como uma 
centrífuga de alto desempenho? 
(A) Centrífuga de bancada. 
(B) Ultracentrífuga. 
(C) Centrífuga de alta velocidade. 
(D) Ultracentrífuga de bancada. 
(E) Centrífuga clínica. 
 
14. (AOCP/2015/ Analista em Saúde Pública - Biomédico – 
FUNDASUS) Dentro de um laboratório hospitalar, o setor que 
apresenta as seguintes estruturas em sua bancada: microscópio, 
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centrífugas (macro e micro), tubos de hemólise, tubos com 
anticoagulantes, EDTA, seringas, cronômetros, banho maria, câmara 
de Neubauer, lâminas e lamínulas, tubos e capilares denomina-se: 
A) parasitologia. 
B) microbiologia. 
C) hematologia. 
D) urinálise. 
E) bioquímica. 
 
15. (AOCP/2015/ Biomédico - EBSERH/HE-UFSCAR) Com relação aos 
aparelhos utilizados em laboratórios, assinale a alternativa que 
apresenta corretamente o nome do aparelho e sua função. 
(A) O densitômetro é o aparelho que mede as frações proteicas em 
uma eletroforese, sendo que ele dosa também as proteínas totais. 
(B) O microscópio comum tem a função de permitir a visualização e 
contagem de células, bactérias, fungos e vírus. 
(C) O espectrofotômetro, muito utilizado em bioquímica, tem a 
função de medir a absorbância e ou a transmitância de uma 
determinada substância. 
(D) Centrífuga é um aparelho com função de separar partículas de 
uma solução na qual estão suspensas. A ultracentrífuga trabalha em 
velocidade muito alta e não requer câmara refrigerada. 
(E) O pHmetro é o aparelho que serve para verificar o pH das 
soluções. Para a medida do pH basta colocar o eletrodo na solução 
que se queira medir. 
 
16. (AOCP/2014/UFC/Biomédico) O equipamento que faz medições 
de pH através de um eletrodo de vidro que fica mergulhado na 
solução a ser medida, é o 
a) banho-maria. 
b) destilador. 
c) vórtex. 
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d) fotômetro de chama. 
e) potenciômetro. 
 
17. (AOCP/2015/ Biomédico - EBSERH/HE-UFPEL) Um dos aparelhos 
mais importantes do laboratório é o espectrofotômetro, utilizado para 
análise quantitativa de substâncias contidas em uma amostra. Em 
relação ao assunto, assinale a alternativa correta. 
(A) A medida quantitativa é realizada por meio da medida da 
absorbância da substância encontrada dividida pela absorbância do 
padrão multiplicado pela concentração do padrão. 
(B) A medida quantitativa é realizada por meio da medida da 
absorbância do padrão dividido pela absorbância da substância 
encontrada multiplicada pela concentração do padrão. 
(C) Nesse aparelho, pode-se também medir a transmitância, sendo 
esta proporcional à absorbância. 
(D) Nesse aparelho, a quantidade de luz emitida por uma quantidade 
de substância é inversamente proporcional à sua concentração. 
(E) Todo espectrofotômetro possui uma fonte de luz, que é em geral 
uma lâmpada de tungstênio para a luz visível e de deutério para a luz 
infravermelha. 
 
 
 
1-B 
2-B 
3-C 
4-A 
5-E 
6-E 
7-A 
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de 38 
8-B 
9-A 
10-D 
11-A 
12-D 
13-C 
14-C 
15-C 
16-E 
17-A 
 
Referências Bibliográficas 
-http://www.pucrs.br/edipucrs/online/microscopia.pdf 
- http://genoma.ib.usp.br/sites/default/files/protocolos-de-aulas-
praticas/genoma_protocolo_microscopia_mar20111.pdf 
- http://www.lb.ufs.br/ap/P1.pdf 
 
http://www.vidrariadelaboratorio.com.br/vidrarias-de-laboratorio-2/ 
 
Blog de Vidraria de Laboratório. Relação de produtos mais utilizados 
em laboratórios. Disponível em: 
http://www.vidrariadelaboratorio.com.br/. Acessado em: 27 de julho 
de 2016. 
 
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http://www.sorocaba.unesp.br/Home/CIPA/Treinamento_para_utiliza
cao_de_laboratorios_quimicos_e_biologicos_leitura.pdf. Acessado 
em: 27 de julho de 2016. 
 
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAA1eMAC/laboratorio-
quimica-geral-quimica-basica?part=2. Acesso em 27 de julho de 
2016. 
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAe8EQAB/destiladorhttp://wikiciencias.casadasciencias.org/wiki/index.php/Agitador_mag
n%C3%A9tico. 
 
http://www.infoescola.com/materiais-de-
laboratorio/espectrofotometro/ 
 
http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/componentes.html 
 
AMORIM, L. BURTH, P. Vidrarias e utensílios de laboratório. 
Universidade Federal Fluminense – Departamento de Biologia Celular 
e Molecular 
 
http://www.prolab.com.br/produtos/equipamentos-para-laboratorio 
 
http://objetoseducacionais2.mec.gov.br/bitstream/handle/mec/15228
/Como%20funciona%20uma%20autoclave.pdf?sequence=2 
 
http://www.lb.ufs.br/lcb/index.php/phmetro 
 
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