imunofluorescência e imunohistoquímica

Prévia do material em texto

B I O L O G I A M O L E C U L A R E I M U N O D I A G N Ó S T I C O
A P L I C A D A A M E D I C I N A V E T E R I N Á R I A
Imunofluorescência
 e Imunohistoquímica 
Sabrina Sato
FROM GROUP 5
Introdução:
TÉCNICAS IMUNODIAGNÓSTICAS
Alta especificidade
Analisam as reações imunológicas que
envolvem a ligação antígeno-anticorpo,
estas podem ser visualizadas ou
quantificadas por meio de diferentes
marcadores
A principais desvantagens estão
relacionadas a erros de
coleta/armazenamento e material
inadequados
Im
unofluorescência e Im
uno-histoquíca
IM
U
N
O
FL
U
O
RE
SC
ÊN
CI
A
 IM
U
N
O
-H
IS
TO
Q
U
ÍM
IC
A
Imunofluorescência
Identifica rações imunológicas que envolvem a
ligação antígeno-anticorpo
visualizadas ou quantificadas através de
diferentes marcadores para o antígeno ou
anticorpo. 
Marcadores mais comumente empregados:
fluorocromos, as enzimas e os compostos
radioativos e eletro-opacos.
Anticorpos primários conjugados à
fluoresceína FITC (anti-IgA, anti-IgG,
anti-IgM e anti-C3) 
 Leitura realizada no microscópio
de fluorescência 
DIRETA:
Im
un
of
lu
or
es
cê
nc
ia
Anticorpos secundários (IgG, IgA, IgM e C3)
conjugados ao isotiocianato de fluoresceína.
 A leitura realizada no microscópio de
epiluminescência.
 Testes quantitativos: o título é detectado via
fluorescência no substrato
INDIRETA:
Im
un
of
lu
or
es
cê
nc
ia
Im
unofluorescência
Imunohistoquímica
Técnica complementar indispensável na
resolução de certos problemas de diagnóstico
diferencial
Método de análise tecidual via microscópio,
buscando identificar antigenos e alterações no
padrão celular
A análise é feita por meio de anticorpos
monoclonais marcados com substâncias
fluorescentes 
Imunohistoquímica
Identificação da distribuição anatômica de
um antígeno dentro do tecido ou de um
compartimento celular.
Uso clínico: Direcionamento oncológico 
 terapêutico pela marcação de receptores
hormonais.
Im
uno-histoquíca
MUNOFLUORESCÊNCIA E
IMUNOHISTOQUÍMICA, RESPECTIVAMENTE
Conclusão:
Dentre os testes de imunodiagnóstico, a
imunofluorescência e a imuno-histoquímica
são testes de extrema importância para
a confirmação ou diagnóstico de diversas
doenças.
I M U N O F L U O R E S C Ê N C I A E I M U N O - H I S T O Q U Í M I C A
Obrigado!
Biologia molecular e imuno diagnóstico
aplicada a medicina veterinária
Referências:
Maleszewski J., Lu J., Fox-Talbot K., et al. Robust immunohistochemical staining of several classes of proteins in
tissues subjected to autolysis. J Histochem Cytochem. 2007;
Ramos-Vara J.A. Technical aspects of immunohistochemistry. Vet Pathol. 2005;
RASKIN, Rose; MEYER, Dennis J. Citologia clínica de cães e gatos: atlas colorido e guia de interpretação. Rio de
Janeiro: Saunders Elsevier, c2012 xviii
Mihai S, Sitaru C. Immunopathology and molecular diagnosis of autoimmune bullous diseases. J Cell Mol
Med. 2007
Morrison LH. When to request immunofluorescence: practical hints. Semin Cutan Med Surg. 1999
Aoki V, Sousa JX Jr, Fukumori LM, Perigo AM, Freitas EL, OliveiraZNP. Imunofluorescência direta e indireta. An
Bras Dermatol. 2010
https://www.scielosp.org/article/ssm/content/raw/?resource_ssm_path=/media/assets/rsp/v30n2/5054.pdf
Vídeo 1: https://www.youtube.com/watch?v=8v77U1UoLnA
Vídeo 2: https://www.youtube.com/watch?v=HdBgTAAi3rU