Biotecnologia_RNAi

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RNAi (RNA interferente, ou RNA de interferência) 
 
RNAi é um mecanismo celular responsável pelo silenciamento gênico pós-transcricional atuando sobre o 
mRNA. O RNAi ocorre em vários organismos eucariotos. 
 
A via de RNAi é desencadeada pela presença de moléculas de RNA fita dupla ("double stranded RNAs" ou 
dsRNAs), culminando na degradação sequência-específica de RNAs homólogos (com a mesma origem dos 
dsRNAs ativadores). 
 
O mecanismo de RNAi inicia quando moléculas ativadoras – dsRNAs longos – são processadas (cortadas) por 
enzimas nucleases conhecidas como Dicer, resultando em dsRNAs menores, de 20 a 24 nucleotídeos, 
denominados pequenos RNAs de interferência ("small interfering RNAs" ou siRNAs). Os siRNAs são, então, 
reconhecidos e associados ao complexo de proteínas denominado RISC, que significa "RNA-induced silencing 
complex" ou complexo de silenciamento induzido por RNA. Uma vez incorporado ao RISC, apenas uma das 
fitas do siRNA é mantida, passando a reconhecer e degradar sequências de RNA complementares a ela, 
impedindo a tradução de RNAs mensageiros (conversão da informação genética em proteína) ou degradando 
genomas de RNA virais. 
 
RNAi (RNA interferente, ou RNA de interferência) é um mecanismo exercido por pequenas 
moléculas de RNA complementares a RNAs mensageiros, o qual inibe a expressão gênica na 
fase de tradução ou dificulta a transcrição de genes específicos.[1][2] A ribointerferencia é um 
mecanismo de silenciamento pós-transcricional de genes específicos exercido por 
ribonucleoproteínas, que são proteínas associadas a pequenas moléculas de RNA que 
reconhecem RNA mensageiros complementares levando a degradação ou bloqueio do 
mesmo. 
Função pós-transcricional 
O fenômeno de RNA interferente tem papel na regulação da expressão gênica a nível pós-
trancricional em eucariotos mas também na defesa do património genético celular contra 
genes parasíticos – vírus e transposões.[3] Dois tipos de pequenas moléculas de RNA podem 
estar envolvidas em mecanismos de RNA interferente, são elas: miRNA (microRNA) 
e siRNA (do inglês, small interfering RNA).[4] Esse processo de regulação é encontrado em 
grande parte dos organismos eucarióticos. 
miRNA e siRNA 
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA_mensageiro
https://pt.wikipedia.org/wiki/Express%C3%A3o_g%C3%AAnica
https://pt.wikipedia.org/wiki/Tradu%C3%A7%C3%A3o_(gen%C3%A9tica)
https://pt.wikipedia.org/wiki/Genes
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-Hammond2000-1
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-TheCell-2
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA_mensageiro
https://pt.wikipedia.org/wiki/V%C3%ADrus
https://pt.wikipedia.org/wiki/Transpos%C3%A3o
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-3
https://pt.wikipedia.org/wiki/Micro-RNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/SiRNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-Beckage-4
 
Mecanismo de RNAi mediado por siRNA. 
miRNA 
Os miRNAs são produtos da transcrição de genes presentes em muitos eucariotos, em geral 
indicados pelo símbolo mir.[8] Esses transcrevem miRNAs precursores, com cerca de 
22 nucleotídeos de comprimento, que possuem regiões internas autocomplementares 
capazes de se parear e formar estruturas do tipo hairpin ("grampo de cabelo").[9] Os miRNAs 
precursores passam pela atividade da enzima Drosha que reconhece a estrutura hairpin da 
molécula e a cliva, liberando a molécula para o citoplasma onde será clivada para 
formar miRNA.[8] 
siRNA 
Os siRNAs são derivados de longas moléculas de RNA de fita dulpla de origem exógena 
(como aquelas provenientes de vírus).[4] As fontes de RNA fita dupla na natureza geralmente 
são produto da polarização de RNA fita-simples a partir de RNA viral ou por elementos de 
transposição (transposons)[10]. 
Mecanismo molecular de ação 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Micro-RNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-:0-8
https://pt.wikipedia.org/wiki/Micro-RNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/Nucleot%C3%ADdeos
https://pt.wikipedia.org/wiki/Hairpin_loop
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-Lehninger-9
https://pt.wikipedia.org/w/index.php?title=Drosha&action=edit&redlink=1
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https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-10
https://pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:Mechanism_of_RNA_interference.jpg
A molécula de RNA dupla fita presente no citoplasma, seja de origem exógena ou a partir de 
um transcrito de um gene mir, é incorporada no Complexo de Silenciamento Induzido por 
RNA ou RISC (sigla do inglês: RNA-induced silencing complex), pela TRBP (sigla do 
inglês: transactivating response RNA-binding protein) e uma das fitas é então clivada ação da 
endonuclease Dicer. Após este processo, a fita mantida serve de guia para que o complexo 
RISC encontre fitas complementares de mRNA específicos, as quais serão alvo da ação de 
silenciamento gênico.[2] 
 
A enzima Dicer corta RNA de dupla fita, de modo a formar siRNA ou miRNA. Estes RNAs processados 
são incorporados no complexo RISC, o qual tem como alvo moléculas de RNA mensageiro, onde 
atuam impedindo o processo de tradução.[1] 
Quando o pareamento entre a fita guia e o mRNA envolve diversas bases, gerando um 
pareamento efetivo, este mRNA será degradado pela ação catalítica de uma das subunidades 
de RISC: a enzima Argonauta. RNA associados ao RISC que resultam na clivagem do mRNA 
são identificados como sendo os siRNA. Quando o pareamento entre a fita guia e o mRNA 
alvo ocorre de maneira parcial, o RISC não promove a clivagem do mRNA, mas atua inibindo 
o processo de tradução deste. Este processo de pareamento imperfeito é mediado através 
de miRNAs. Nesta condição, o mRNA desestabilizado pode ser conduzido aos 
chamados corpos de processamento (corpos-P), estruturas citosólicas responsáveis pela 
degradação de mRNA.[2] 
 
 
RNAs envolvidos: 
1. miRNA ( micro RNA) 
2. siRNAs (short interfering RNAs) 
3. shRNAs (short hairpin RNAs) 
 
1. Os miRNAs representam pequenos dsRNA endógenos de 22 nucleotídeos cuja a função é atuar como 
silenciador pós-transcricionais, inibindo a tradução do mRNA –alvo em proteína. Os genes que codificam o 
miRNA são transcritos pela RNA polimerase II em um longo microRNA primário. 
 
O complexo RISC permite o pareamento entre a fita do miRNA com a região homóloga do mRNA alvo por 
complementaridade de bases. – ocorre a degradação do mRNA. 
Argonautas são proteínas presentes no complexo RISC pela presença de domínios conservados (PAZ e PIWI). 
Elas se ligam aos siRNA e miRNA, e apresentam atividade de endonuclease dirigida contra a fita do mRNA. 
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA-induced_silencing_complex
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA-induced_silencing_complex
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https://pt.wikipedia.org/wiki/Dicer
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-TheCell-2
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-Hammond2000-1
https://pt.wikipedia.org/wiki/Cat%C3%A1lise_enzim%C3%A1tica
https://pt.wikipedia.org/w/index.php?title=Argonauta_(Biologia)&action=edit&redlink=1
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA-induced_silencing_complex
https://pt.wikipedia.org/wiki/SiRNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/RNA-induced_silencing_complex
https://pt.wikipedia.org/wiki/Micro-RNA
https://pt.wikipedia.org/wiki/Corpos_de_processamento
https://pt.wikipedia.org/wiki/Citosol
https://pt.wikipedia.org/wiki/ARN_interferente#cite_note-TheCell-2
https://pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:RNAi-simplified.png
 
Terapias usando RNAi 
- Estudos sobre o RNAi para silenciamento dos genes 
- Estudos para combate de doenças em que a expressão anormal de certos genes pode ser 
identificadacomo causa ou fator que contribui para uma doença. Ex; Câncer , doenças genéticas, 
doenças autoimunes entre outros. 
 
 
 
	Função pós-transcricional
	miRNA e siRNA
	miRNA
	siRNA
	Mecanismo molecular de ação