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VIRTUALAB – ROTEIRO DO LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS Neste experimento, você irá realizar explorar duas formas de identificar e/ou caracterizar aminoácidos e proteínas através da análise qualitativa de reações químicas. PASSO 1 Conhecendo o laboratório virtual Para dar início a este laboratório virtual, é necessário que você conheça os principais recursos disponíveis. Após o carregamento, será exibido um Guia de utilização, onde será explicado o funcionamento de alguns recursos disponíveis durante a realização do experimento. ⚫ Utilize a barra de rolagem para realizar a leitura de todo o texto no guia, clicando em FECHAR somente após a leitura. Importante: Realize a leitura deste Guia de utilização pois as funcionalidades nele apresentadas serão aplicadas durante todo o laboratório. Durante a realização do laboratório virtual, estarão disponíveis na tela algumas opções auxiliares. A janela de Visualização permite selecionar entre sete opções de câmeras pré- estabelecidas. Elas devem ser utilizadas para que o experimento seja monitorado de um ponto de vista adequado, além de permitir que os principais componentes sejam visualizados da melhor forma possível. Dica: Em vez de clicar nas opções de visualização, é possível alterar entre as telas disponíveis utilizando os atalhos no teclado, que podem ser vistos ao lado do título de cada câmera. Por exemplo, ao pressionar Alt+3 (as duas teclas devem ser pressionadas simultaneamente), a câmera do Gaveta de vidrarias será exibida. Dica: A janela de Visualização pode ser expandida ou recolhida de acordo com a necessidade do usuário, bastando clicar na região do título. Importante: Este experimento será realizado em duas regiões da bancada. Acima da janela de Visualização, é disponibilizado um botão que alterna entre essas regiões. Utilize este recurso quando for instruído no roteiro. Na parte superior direita da tela, são disponibilizados alguns botões (em verde e branco) com recursos e informações do laboratório. O botão com engrenagem é utilizado para acessar o menu de OPÇÕES, onde o experimento pode ser reiniciado. O botão com o caderno fornece um bloco de notas que pode ser utilizado para escrever informações obtidas durante a realização do laboratório virtual. O botão com o escudo, exibe os equipamentos de proteção individual necessários para realizar o experimento em segurança. Já o botão com o tubo de ensaio, exibe uma lista com reagentes com as fórmulas e suas respectivas nomenclaturas. PASSO 2 Vestindo os EPIs Os equipamentos de proteção individual são obrigatórios para a realização do experimento, então sua interação com os componentes do laboratório será limitada até que eles sejam equipados. ⚫ Vá até Armário de EPIs (Alt+5) utilizando a janela de Visualização. Importante: Os componentes que possuem interações podem ser identificados ao posicionar o mouse sobre eles, pois um destaque em vermelho será exibido e no canto inferior direito da tela as opções de interações são apresentadas. ⚫ Abra as portas do Armário de EPIs. ⚫ Clique nos EPIs necessários para vesti-los. Perceba que ao clicar no botão da máscara, os equipamentos de proteção individual foram marcados, indicando que você está devidamente protegido. Feche a janela dos EPIs e retorne para o modo de Visualização da Bancada (Alt+1). PASSO 3 Selecionando os materiais para o experimento Neste experimento, serão utilizados diversos equipamentos. As vidrarias necessárias estão guardadas em uma das gavetas da bancada e devem ser retiradas da gaveta e posicionadas sobre a mesa. ⚫ Selecione a Visualização da Gaveta de vidrarias (Alt+3). ⚫ Abra a primeira gaveta da bancada clicando com o botão esquerdo nela. ⚫ Mova os béqueres para mesa utilizando o clique esquerdo do mouse. ⚫ Feche a gaveta. Além dos béqueres, serão utilizados tubos de ensaio que já estão posicionados sobre a bancada. Agora que todos os componentes estão dispostos na bancada, o procedimento experimental pode ser realizado. PASSO 4 Reação de Ninidrina A solução de Prolina e Triptofano devem ser inseridas respectivamente nos béqueres 1 e 2, possibilitando que essas soluções sejam pipetadas. • Selecione o modo de Visualização da Prateleira de soluções (Alt+4). Dica: Ao clicar com o botão direito nos frascos, uma janela com as opções de movimentos é exibida. Clicar com o botão esquerdo realiza uma determinada ação. As funcionalidades disponíveis para cada um dos componentes do experimento sempre são exibidas no canto inferior direito da tela. • Mova o frasco com Prolina para o béquer 1. Dica: Para realizar a ação de derramar o conteúdo dos frascos, utilize o botão esquerdo do mouse. Mantenha o botão pressionado para que a ação continue sendo realizada. • Derrame o conteúdo do frasco no béquer 1 até aproximadamente metade da graduação da vidraria. • Mova o frasco de Prolina de volta para a prateleira. • Mova o frasco com Triptofano para o béquer 2. • Derrame o conteúdo do frasco no béquer 2 até aproximadamente metade da graduação da vidraria. • Mova o frasco de Triptofano de volta para a prateleira. Agora, as pipetas disponíveis no suporte devem ser utilizadas para succionar 1 mL de cada uma das soluções e despejá-las nos tubos de ensaio. Dica: Cada pipeta é utilizada para uma solução específica, então ao abrir a janela com as opções de movimento de cada pipeta, é exibido o béquer que ela vai interagir. • Mova a pipeta para o béquer 1. Importante: Para utilizar a pipeta, é necessário seguir em série de ações. Essas ações ficam disponíveis ao posicionar o mouse sobre as partes indicadas na imagem abaixo. Pera Válvula S Válvula E • Com o mouse sobre a pera, realize o comando para apertar a pera (clicar com o botão esquerdo do mouse). Para que o fluido seja succionado para a pipeta, o mouse deve ser posicionado sobre a Válvula S para que a opção “APERTAR VÁLVULA S” fique disponível. Dica: Os comandos “APERTAR A VÁLVULA S” e “APERTAR A VÁLVULA E” precisam que o atalho de comando, neste caso o botão esquerdo do mouse, seja pressionado até que a ação seja concluída. • Aperte a válvula S para succionar a Prolina do béquer 1. Observe que, no canto inferior esquerdo da tela, é exibida uma tela que indica a posição do fluido na pipeta. Quando a linha branca for atingida, a pipeta foi preenchida com 1 ml. • Selecione o modo de Visualização da Tubo de ensaio (Alt+6). • Mova a pipeta para o tubo 1. • Selecione o modo de Visualização da Prateleira (Alt+4). Para que o fluido seja despejado pela pipeta, o mouse deve ser posicionado sobre a Válvula E para que a opção “APERTAR VÁLVULA S” fique disponível. • Aperte a válvula E para despejar a Prolina no tubo de ensaio 1. • Mova a pipeta de volta para o suporte. O mesmo procedimento realizado anteriormente com uma das pipetas, que consistiu em retirar a Prolina do béquer 1 e despejar no tubo de ensaio 1, deve ser realizado com a outra pipeta disponível, retirando o Triptofano do béquer 2 e despejando no tubo de ensaio 2. • Mova a pipeta para o béquer 2. • Com o mouse sobre a pera, realize o comando para apertar a pera. • Aperte (manter pressionado) a válvula S para succionar o Triptofano do béquer 2. • Selecione o modo de Visualização da Tubo de ensaio (Alt+6). • Mova a pipeta para o tubo 2. • Selecione o modo de Visualização da Prateleira (Alt+4). • Aperte (manter pressionado) a válvula E para despejar o Triptofano no tubo de ensaio 2. • Mova a pipeta de volta para o suporte. • Selecione o modo de Visualização da Tubo de ensaio (Alt+6). Agora, a solução de Ninidrina, presente em um frasco conta-gotas que está sobre a mesa, deve ser adicionada aos tubos de ensaio. • Mova o frasco de Ninidrina para o tubo de ensaio2. Para que as gotas da solução de Ninidrina sejam adicionadas, posicione o mouse sobre o bulbo de borracha, onde será exibida a opção de derramar. Cada vez que o comando para a ação “DERRAMAR” for realizado (clique com o botão esquerdo do mouse), uma gota vai cair no tubo de ensaio. Dica: Espere que a gota caia no tubo de ensaio antes de realizar o comando de derramar outra gota. • Acrescente 5 gotas de Ninidrina no tubo de ensaio 2. • Mova o frasco conta-gotas para o tubo de ensaio 1. • Acrescente 5 gotas de Ninidrina no tubo de ensaio 1. • Mova o frasco conta-gotas de volta para a mesa. Após acrescentar a Ninidrina nos tubos de ensaio 1 e 2, as soluções dos tubos devem ser homogeneizadas. Quando o mouse for posicionado sobre cada um dos tubos de ensaio, é exibida uma ação para “HOMOGENEIZAR” este tubo. • Homogeneíze o tubo de ensaio 1. • Homogeneíze o tubo de ensaio 2. Observe as reações que ocorrem nos tubos de ensaio e responda: O que houve com os fluidos contidos nos tubos de ensaio 1 e 2 após homogeneizar seus conteúdos? Justifique. _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ • Selecione o modo de Visualização da Banho maria (Alt+7). • Ligue o equipamento de banho-maria. Importante: Na parte inferior da tela vai ser exibida uma janela com um termômetro e slider. Ao clicar e deslocar o ponto branco do slider, a temperatura do banho-maria é aumentada. • Utilize o slider para aumentar a temperatura do banho-maria até uma temperatura entre 90 e 95 °C. • Selecione o modo de Visualização da Tubos de ensaio (Alt+6). • Mova o tubo de ensaio 1 para o banho-maria. • Mova o tubo de ensaio 2 para o banho-maria. • Selecione o modo de Visualização da Banho maria (Alt+7). • Deixe a mistura por 2 minutos no banho-maria. Ao posicionar o mouse sobre um tubo de ensaio no banho-maria, fica disponível a ação para “MOVER PARA SUPORTE”. • Mova o tubo de ensaio 1 para o suporte. • Mova o tubo de ensaio 2 para o suporte. • Desligue o banho-maria. • Selecione o modo de Visualização da Tubos de ensaio (Alt+6). Observe a reações que ocorreram nos tubos de ensaio e responda: O que houve com os fluidos contidos nos tubos de ensaio 1 e 2 após passarem alguns minutos no banho-maria? Justifique. _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ PASSO 5 Reação de Biureto Para dar início ao procedimento de reação de Biureto, o recurso apresentado no Passo 1 deve ser utilizado, que direciona o usuário para a parte esquerda da bancada. • Clique no botão na parte superior esquerda da tela. Observe que a tela inicial do experimento foi alterada. Nela é exibido uma nova janela de Visualização e novos equipamento estão disponíveis para esta etapa do experimento. Nesta etapa do experimento, serão utilizados diversos equipamento. As vidrarias necessárias estão guardadas em uma das gavetas da bancada e devem ser retiradas da gaveta e posicionadas sobre a mesa. ⚫ Selecione a Visualização da Gaveta de vidrarias (Alt+4). ⚫ Abra a primeira gaveta da bancada clicando com o botão esquerdo nela. ⚫ Mova os béqueres para mesa utilizando o clique esquerdo do mouse. ⚫ Feche a gaveta. ⚫ Escolha o modo de Visualização da Bancada (Alt+1). Além dos béqueres, serão utilizados tubos de ensaio que já estão posicionados sobre a bancada. Agora que todos os componentes estão dispostos na bancada, o procedimento experimental pode ser realizado. Em cada um dos quatro béqueres será adicionada uma determinada solução. Dica: Selecione o modo de Visualização que for mais conveniente para observar as ações realizadas. ⚫ Mova o frasco com solução de Albumina para o béquer 1. ⚫ Derrame o conteúdo do frasco até aproximadamente metade da graduação do béquer 1. ⚫ Mova o frasco de volta para a prateleira. ⚫ Mova o frasco com solução de Prolina para o béquer 3. ⚫ Derrame o conteúdo do frasco até aproximadamente metade da graduação do béquer 3. ⚫ Mova o frasco de volta para a prateleira. ⚫ Mova o frasco com solução de Biureto para o béquer 4. ⚫ Derrame o conteúdo do frasco até aproximadamente metade da graduação do béquer 4. ⚫ Mova o frasco de volta para a prateleira. Na bancada é disponibilizada uma pisseta com água destilada, que é um dos fluidos utilizados neste experimento. ⚫ Mova a pisseta com água destilada para o béquer 2. ⚫ Derrame o conteúdo da pisseta até aproximadamente metade da graduação do béquer 2. ⚫ Mova o frasco de volta para a mesa. As pipetas encontradas no suporte devem ser utilizadas para retirar as soluções dos béqueres e adicionar nos tubos de ensaio, onde as reações deste experimento poderão ser observadas. Dica: Cada pipeta é utilizada para uma solução específica. Então, ao abrir a janela com as opções de movimento de cada pipeta, é exibido o béquer que ela vai interagir. ⚫ Escolha o modo de Visualização do Suporte com pipetas (Alt+3). As pipetas serão utilizadas da esquerda para a direita. Seguindo a ordem da imagem abaixo. Dica: O procedimento de utilização das pipetas apresentado no passo anterior também será utilizado neste passo. • Mova a primeira pipeta para o béquer 1. Dica: Selecione o modo de Visualização que for mais conveniente para observar as ações realizadas. • Aperte o corpo da pera. • Apertar a válvula S para succionar a Albumina até que a pipeta esteja cheia. Observe que no canto inferior esquerdo da tela é exibida uma tela que indica a posição do fluido na pipeta. Quando a linha branca for atingida, a pipeta foi preenchida com 2 mL. • Mova a primeira pipeta para o tubo de ensaio 1. 1ª 2ª 3ª 4ª • Aperte a válvula E para despejar toda a Albumina no tubo de ensaio 1. • Mova a primeira pipeta de volta para o suporte. • Mova a segunda pipeta para o béquer 2. • Aperte o corpo da pera. • Apertar a válvula S para succionar a água destilada até que a pipeta esteja cheia. • Mova a segunda pipeta para o tubo de ensaio 2. • Aperte a válvula E para despejar toda a água destilada no tubo de ensaio 2. • Mova a segunda pipeta de volta para o suporte. • Mova a terceira pipeta para o béquer 3. • Aperte o corpo da pera. • Apertar a válvula S para succionar a Prolina até que a pipeta esteja cheia. • Mova a terceira pipeta para o tubo de ensaio 3. • Aperte a válvula E para despejar toda a Prolina no tubo de ensaio 3. • Mova a terceira pipeta de volta para o suporte. Com isso, os três tubos de ensaio disponíveis foram preenchidos, cada um com uma solução específica. Em cada um deles, deve ser adicionado 2 mL de Biureto. A quarta pipeta deve ser utilizada para realizar esta ação. • Mova a quarta pipeta para o béquer 4. • Aperte o corpo da pera. • Apertar a válvula S para succionar o Biureto até que a pipeta esteja cheia. • Mova a quarta pipeta para o tubo de ensaio 1. • Aperte a válvula E para despejar todo o Biureto no tubo de ensaio 1. • Mova a quarta pipeta para o béquer 4. • Apertar a válvula S para succionar o Biureto até que a pipeta esteja cheia. • Mova a quarta pipeta para o tubo de ensaio 2.• Aperte a válvula E para despejar todo o Biureto no tubo de ensaio 2. • Mova a quarta pipeta para o béquer 4. • Apertar a válvula S para succionar o Biureto até que a pipeta esteja cheia. • Mova a quarta pipeta para o tubo de ensaio 3. • Aperte a válvula E para despejar todo o Biureto no tubo de ensaio 3. • Mova a quarta pipeta de volta para o suporte. Após realizar estas ações, o suporte com os tubos de ensaio deve ser observado. ⚫ Escolha o modo de Visualização do Tubos de ensaio (Alt+7). A situação de cada tubo de ensaio é a seguinte: o O tubo de ensaio 1 contém 2 mL de albumina e 2 mL de biureto; o O tubo de ensaio 2 contém 2 mL de água destilada e 2mL de biureto; o O tubo de ensaio 3 contém 2 mL de prolina e 2 mL de biureto. A solução contida em cada um dos tubos de ensaio deve ser homogeneizada. • Homogeneíze o tubo de ensaio 1. • Homogeneíze o tubo de ensaio 2. • Homogeneíze o tubo de ensaio 3. Observe a reações que ocorram nos tubos de ensaio e responda: O que houve com os fluidos contidos nos tubos de ensaio 1, 2 e 3 após eles serem homogeneizados? Justifique. _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________
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