Resposta Imune Adaptativa : Ativação de Linfócitos B e produção de Anticorpos / Respostas de Linfócitos B dependentes e independentes de Linfócitos T CD4 auxiliares / Citocinas e quimiocinas na proces

Prévia do material em texto

Aula 12 Imuno - Resposta Imune Adaptativa : 
Ativação de Linfócitos B e produção de Anticorpos / 
Respostas de Linfócitos B dependentes e independentes de 
Linfócitos T CD4 auxiliares / Citocinas e quimiocinas na 
ativação, diferenciação, manutenção, circulação/migração e 
função de Linfócitos B / Geração de Células de Memória / 
Mecanismos efetores da Imunidade Humoral 
 
 
 
● Visão Geral da Resposta Imune Humoral 
○ A ativação de Linfócitos B resulta não só em sua proliferação (expansão 
clonal), como também na sua diferenciação em Células secretoras de 
anticorpos (Plasmócito) e Células de memória 
○ As respostas humorais aos antígenos peptídicos depende da internalização 
dos antígenos, e do processamento e apresentação aos Linfócitos T CD4, 
que então ativarão os Linfócitos B (​resposta dependente de T​) ⇉ Memória 
○ As respostas humorais aos antígenos polissacarídicos, lipídicos e ácidos 
nucleicos não necessitam do auxílio de Linfócitos T (​resposta independente 
de T​) 
○ Alguns Linfócitos B ativados passam a expressar outros subtipos de 
imunoglobulinas (​troca de isotipo​) ⇉ resposta dependente de Célula T CD4 
○ Alguns Linfócitos B ativados produzem e secretam anticorpos com maior 
afinidade pelos antígenos (​amadurecimento por afinidade​) ⇉ dominam a 
resposta e são dependentes de Células T CD4 
○ O isotipo e a concentração (magnitude=intensidade) de anticorpos 
produzidos, depende do tipo do antígeno, do envolvimento de Linfócitos T, da 
exposição prévia ao antígeno e do sítio onde a ativação do Linfócito B 
ocorreu 
○ As respostas primárias e secundárias aos antígenos diferem qualitativa e 
quantitativamente. 
 
 
 
OBS : Quais as diferenças entre as ativações de Linfócitos B e Linfócitos T ? 
● Na ativação do Linfócito T, o antígeno é apresentado por APC’s, sendo ele proteico 
e linear. 
 
● Na ativação do Linfócito B, não é necessária a apresentação, uma vez que ele 
reconhece o determinante antigênico livre; sendo ele uma peptídeo, lipídio, 
polissacarídeo, ácido nucleico, etc. 
○ Quando o Epítopo é proteico, a ativação é dependente de Célula T 
○ Quando o Epítopo não é proteico, a ativação é independente de Célula T 
 
 
 
● Resposta de anticorpos Primária e Secundária 
○ Resposta Primária 
■ 1ª vez que há encontro com o antígeno 
■ Não há uma Resposta Adaptativa formada ainda 
■ Presença, principalmente, de IgM e IgD (IgM mais que IgD) 
■ Afinidade grande pelo patógeno, porém menor em comparação à 
Secundária 
■ É induzida por todos os ​Imunógenos 
 
OBS : Imunógeno é um antígeno (próprio ou estranho) capaz de desencadear uma resposta 
imune. 
 
○ Resposta Secundária 
■ 2ª, 3ª.. vez de encontro com o patógeno 
■ Já existe uma Resposta Adaptativa formada 
■ A mudança de isotipo é mais frequente nessa Resposta 
■ Presença, principalmente, de IgG 
● Em algumas situações, há mais IgA e IgE 
■ Afinidade ENORME pelo patógeno, devido à ocorrência de Maturação 
por Afinidade 
■ É induzida, principalmente, por ​Antígenos Protéicos 
 
● Ativação de Linfócitos B 
○ Depende de diferentes tipos de Antígenos 
 
○ Dependente de Linfócitos T 
■ Mediada por ​antígenos​ ​protéicos 
■ Há a participação das Células T 
■ Ocorrência da troca de isotipo 
■ Produção de anticorpos de alta afinidade, visto que passaram por 
Maturação por Afinidade 
■ Produção de Células B de Memória 
■ Produção de Células B Plasmáticas de longa duração 
 
 
OBS : Quando ocorre aquela educação do Linfócito B pela Célula T na zona intermediária do 
Linfonodo, pode ocorrer de ambos Linfócitos estarem reconhecendo o mesmo Epítopo do mesmo 
antígeno, porém isso é raro. É mais comum que o Linfócito T reconheça o epítopo ​x ​de um 
antígeno e o Linfócito B reconheça o epítopo ​y​ desse mesmo antígeno; todavia, nesse processo 
de endocitose, degradação e apresentação, a Célula B passa a apresentar o epítopo ​x​ do 
antígeno. 
 
 
○ Independente de Linfócitos T 
■ Mediada por ​antígenos​ ​lipídicos​, ​polisacáridos​, ​ácidos​ ​nucleicos 
■ Não há participação de Células T 
■ Produção, principalmente, de IgM 
■ Liberação de anticorpos de baixa afinidade 
■ Produção de Células B plasmáticas de baixa duração 
 
● Circulação / Via de Distribuição de antígenos nos Linfonodos 
○ As Células B Foliculares são as responsáveis por fazer o encontro entre 
Linfócitos B e Linfócitos T na zona intermediária do Linfonodo 
○ As Células T Foliculares são aquelas que ​up-regularam​ CXCR5 e 
down-regularam​ totalmente CCR7, de modo que agora alcançam o Folículo 
(Zona de Célula B). Agora torna-se possível o encontro dessa Célula T com 
uma Célula B, permitindo a ocorrência de mudança de isotipo e maturação 
por afinidade 
○ O Linfócito T Folicular, após entrar no Folículo, ainda é um Linfócito T CD4 
Th1, Th2 ou Th17 (expressando seus Fatores de Transcrição e Citocinas de 
identidade​); entretanto, afim de se manter no Folículo e estimular o ​help​ para 
a Célula B, ela ganha uma nova identidade, agora expressando a ​citocina 
IL-21 
○ O encontro entre Células B e T na zona intermediária ocorre mais durante a 
Resposta Primária, de modo que a mudança de isotipo e maturação por 
afinidade são mais ineficientes/fracas. Em um segundo momento, durante a 
Resposta Secundária, esse encontro passa a acontecer dentro do Folículo, 
de modo que a mudança de isotipo e a maturação por afinidade são muito 
mais eficientes e intensas 
○ Chega aos Linfonodos, por meios das HEV (Vênulas de Endotélio Alto), os 
Linfócitos virgens, os quais serão endereçados a determinado local 
■ Algumas Células B serão enviadas à Zona Folicular, outras para Zona 
Intermediária, outras para Zona Marginal 
■ Se a Célula B está sendo endereçada para esse local, sabe-se que há 
um gradiente de CXCR5 - CXCL13 
○ Os antígenos dos mais diversos pesos moleculares, chegam aos Linfonodos 
por meio de diversos locais diferentes, assim se localizando em zonas 
distintas. Portanto, os diferentes endereçamentos de Linfócitos B são 
importantes, afim de facilitar o encontro do Linfócito com seu antígeno 
cognato 
 
 
 
OBS : Célula B Folicular = Célula B de Centro Germinativo 
 
OBS 2 : As Células de Memória ficam estocadas principalmente nos Órgãos Linfóides Primários e 
Secundários, mas também se localizam nas Mucosas e nas Barreiras Físicas (pele, epitélio dos 
órgãos). 
 
 
 
 
 
○ Ao adentrar os Linfonodos, os antígenos podem ter diferentes formas de 
entrada dependendo do seu tamanho 
■ Antígenos pequenos podem entrar diretamente nos Folículos por meio 
de Conduítes ou podem estar sendo apresentados por APC’s 
(principalmente, Células Dendríticas) 
■ Antígenos grandes podem entrar por meio de : 
● Macrófagos Subcapsulares ​vão emitir braços, os quais vão 
“puxar” (​guinchar​) os antígenos, assim se ligando aos 
receptores não-imunogênicos dos antígenos (não se ligam aos 
Epítopos dos antígenos) 
● Células Dendríticas Medulares ​(são residentes dos Órgãos 
Linfóides Secundários) fazem uma captação de antígenos muito 
semelhante a dos Macrófagos, porém é mais eficiente. Elas vão 
emitir seus dendritos, agindo como um sensor (​screening​) 
 
 
OBS : Ambos reconhecimentos por Macrófagos e Células Dendríticas não chegam a ser uma 
apresentação, isto é, essas Células não fagocitam o antígeno, mas sim somente o 
seguram/transportam/mostram/guincham, dado que se houvesse processamento do antígeno, 
somente Linfócitos T seriam capazes de reconhecê-los (Linfócitos B necessitam dos antígenos 
livres). 
 
OBS 2 : Esses receptores de Macrófagos / Células Dendríticas podem ter uma dupla 
funcionalidade : 
● Guincham o antígeno em sua conformação nativa, afim de mostrá-los ao Linfócito B 
● Agem como Receptores Fagocíticos, assim fagocitando o antígeno e apresentando 
ao Linfócito T 
 
 
 
○ Para o reconhecimento de​ Epítopos Proteicos​ por Células B, a Resposta se 
concentra no ​Folículo​ ou na ​Zona Intermediária ​⇉ Linfócitos B Foliculares 
○ Para o reconhecimento de ​Epítopos Não-Protéicos​ (lipídicos, 
polissacarídeos, ácidos nucleicos)por Células B, a Resposta se concentra na 
Zona Marginal​ ⇉ Linfócitos B de Zona Marginal 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
○ Entendendo as vias de distribuição de antígenos para Linfócitos B : 
■ Antígenos em imuno-complexos com proteínas do complemento 
ligam-se a receptores do complemento em células B de zona marginal 
e em Células Dendríticas Foliculares 
■ Antígenos sanguíneos ligam-se a Células Dendríticas plasmocitóides, 
afim de promover o reconhecimento para Células B de zona marginal 
■ Antígenos polissacarídicos ligam-se a Macrófagos na zona marginal, 
afim de promover o reconhecimento para Células B de zona marginal 
 
 
○ A Imunidade Inata é sempre acionada, independente se é o 1º encontro com 
o antígeno ou se é o 2º, 3º, etc. Além disso, ela sempre possuirá a mesma 
Magnitude, dado que reconhecerá os mesmo PAMP’s e DAMP’s 
○ A Imunidade Adaptativa também é sempre estimulada, porém ela demora 
dias para se desenvolver. Afim de facilitar os encontros com os antígenos, o 
Sistema Imune forma uma Resposta Adaptativa mais rápida e imediata, a 
qual somente reconhece Epítopos não-proteicos (não necessita do ​help​ do 
Linfócito T). Enquanto isso, o organismo vai produzindo uma Resposta 
Adaptativa mais sofisticada, porém mais lenta, a qual reconhecerá Epítopos 
Proteicos (necessita do ​help​ do Linfócito T) 
 
OBS : As Células de Memória precisam de reconhecimento constante do antígeno para se 
manterem vivas, entretanto após o fim da infecção, não há mais a presença do antígeno, 
indicando a ocorrência de apoptose desses Linfócitos. Teorias sugerem que existem antígenos 
próprios que mimetizam esses antígenos patogênicos, assim permitindo a sobrevivência desses 
Linfócitos. 
 
 
 
 
○ Respostas Funcionais induzidas pelo reconhecimento do antígeno por 
Linfócitos B 
■ A ligação do antígeno ao BCR causa mudanças nos Linfócitos B 
ativados e consequências funcionais : 
● Expressão de proteínas que promovem a sobrevivência e o ciclo 
celular ⇉ Aumento da sobrevivência e proliferação 
● Apresentação do antígeno, aumento na expressão de B7 ⇉ 
Interação com Linfócitos T auxiliares 
● Expressão aumentada de receptores de citocinas ⇉ 
Responsividade à citocinas 
● Aumento na expressão de CCR7 ⇉ Migração do Folículo para a 
Zona de Células T 
 
 
 
 
 
 
● Papel da via CD40-CD40L na ativação de Linfócitos B, dependente de 
Linfócitos T CD4 
○ Durante o processo de Apresentação, o Linfócito T necessita do 
reconhecimento do antígeno apresentado pelo MHC, do Co-Estímulo e da 
Citocina Educadora. Assim ele deixa de ser Virgem e se torna Efetor 
○ Por já estar ativada, essa Célula T já sofreu modificações, como por exemplo, 
na expressão do Co-Estímulo CD40L 
■ O CD40L tem um papel semelhante ao CD28, todavia não é um 
Co-Estímulo primário 
■ O CD40L está presente ​induzidamente​ no Linfócito T e o CD40 está 
presente ​constitutivamente​ no Linfócito B 
○ Quando o Linfócito T se torna efetor, passa a expressar suas citocinas, 
down-regula​ S1P1R e CCR7, e induz a expressão de CD40L, ele está então 
pronto para ser um Auxiliar de Célula B 
○ Posteriormente, esse Linfócito T Efetor irá auxiliar o Linfócito B a promover a 
mudança de isotipo e maturação por afinidade 
■ Essa Mudança de Isotipo e Maturação por Afinidade dependente de 
Linfócito T, exige a ocorrência da via CD40-CD40L 
○ Essa via CD40-CD40L permite a reeducação das Células Dendríticas / 
Macrófagos pelos Linfócitos T, tornando-as mais potentes 
○ Essa via permite a Proliferação e Diferenciação dos Linfócitos B 
 
○ Síndrome da Hiper IgM 
■ Mutação em CD40L no Linfócito T ou em CD40 no Linfócito B 
■ Não ocorre a via CD40-CD40L, impedindo o reconhecimento entre 
Linfócito T e Linfócito B, assim impedindo a ocorrência de Mudança de 
Isotipo e Maturação por Afinidade 
■ Não ocorre a produção de IgG, IgA e IgE. Somente possuem IgM e IgD 
■ Os portadores da doença são extremamente suscetíveis a infecções 
■ Não chegam a ter uma Resposta Imune Secundária, ficam somente na 
Primária 
 
● Consequências da Ativação de Linfócitos B 
○ Diferenciação em Células secretoras de anticorpos, as quais já irão deixar 
esse sítio 
■ Expressam IgM e IgD 
 
○ Diferenciação em Células secretoras de anticorpos, mas que já fizeram o 
switch​ de isotipo 
■ Expressam IgG, IgA e IgE 
 
○ Diferenciação em Células secretoras de anticorpos, mas que já fizeram switch 
de isotipo e maturação por afinidade 
■ Expressam IgG, IgA e IgE de alta afinidade 
 
○ Diferenciação em Células de Memória 
 
 
 
 
OBS : Hipermutação Somática ⇉ Amadurecimento por afinidade 
● Toda Célula B que se ativa com o ​help​ do Linfócito T, irá sofrer Maturação por 
Afinidade 
● Essa troca de afinidade é aleatória, assim podendo causar a produção de uma 
célula extremamente afim, porém pode causar uma outra célula extremamente ruim 
em questão de afinidade 
● O sistema imune prefere ter o risco de diferenciar em 1000 células pouco afins e 1 
extremamente afim, do que não alterar a afinidade (só ter células “meia boca”) 
 
 
 
● Ontogenia de Células B plasmáticas ⇉ Memória 
○ Na Medula Óssea formam-se os Linfócitos B virgens, os quais irão alcançar 
os Órgãos Linfóides Secundários, se diferenciando em ​Células B de Zona 
Marginal​ ou em ​Células B Foliculares 
 
○ Diferenciação em Células B de Zona Marginal 
■ Com o encontro com o antígeno não-proteico, sem o auxílio da Célula 
T, esse Linfócito irá se ativar, e depois expressar IgM e IgD, 
posteriormente sofrendo apoptose 
■ Durante o processo de realização de sua função efetora, ela se 
chamará de ​Célula B Plasmática de curta duração 
 
 
 
○ Diferenciação em Célula B Folicular 
■ Com o encontro com o antígeno protéico, com auxílio da Célula T, 
esse Linfócito irá se ativar, e depois expressará IgM e IgD (Resposta 
Imune Primária), posteriormente sofrendo apoptose. Durante o 
processo de realização de sua função efetora, ela se chamará de 
Célula B Plasmática de curta duração 
■ Se houver uma manutenção de encontro com o antígeno (antígenos 
próprios que possuem estrutura muito semelhante aos dos antígenos 
estranhos), as Células B Foliculares continuarão a reconhecer 
epítopos protéicos, assim sofrendo maturação por afinidade e 
mudança de isotipo, de modo a se tornarem ​Células de Memória​. 
Essas Células de Memória serão então chamadas de 
Plasmablasto/Plasmócito ao migrarem para sítios que as mantenham 
vivas, sendo eles os Órgãos Linfóides Primários (principalmente, 
Medula Óssea), nos Órgãos Linfóides Secundários (Baço e 
Linfonodos) ou nos Sítios Inflamatórios (pele, mucosa, epitélio dos 
órgãos, portas de entrada). Nesses locais de estocagem, elas serão 
denominadas ​Célula B Plasmática de longa duração 
 
 
OBS : O gradiente que determina os nichos de ​estocagem ​das​ Células de Memória ​é​ CXCR4 - 
CXCL12​. 
 
OBS 2 : Os Plasmócitos são as células secretoras de anticorpos. Já as Células Plasmáticas são 
as Células de de Memória, mas que também secretam anticorpos. 
 
 
 
● Funções Efetoras dos anticorpos 
○ Neutralização de patógenos e toxinas 
○ Opsonização e fagocitose de patógenos 
○ Citotoxicidade Celular dependente de anticorpos 
○ Fagocitose de patógenos opsonizados por fragmentos do Complemento 
○ Inflamação 
○ Lise de patógenos 
○ Ativação do Complemento 
 
 
 
 
● Competição entre Plasmócitos e Células B Plasmáticas pelo nicho de 
sobrevivência 
○ As Células B Plasmáticas de longa duração permanecem num nicho CXCL12 
positivo, nos locais de estocagem de Células de Memória 
○ Na hipótese de um novo encontro com o antígeno, migram para esse sítio os 
Plasmócitos, os quais possuem não só moléculas anti-apoptóticas, como 
também uma capacidade muito maior de permanência nesse nicho CXCL12 
positivo (expressam muito CXCR4) 
○ Esse Plasmócito substitui a Célula B Plasmática de longa duração, a qual 
será encaminhada para uma via de apoptose 
 
 
 
 
OBS : As Células de Memória são formadas somente para epítopos proteicos, nunca para 
epítopos lipídios, polissacarídeos,ácidos nucleicos. 
 
 
 
 
● 3 Hipóteses de manutenção das concentrações plasmáticas de 
Imunoglobulinas 
○ A sobrevivência depende dos nichos