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PRÁTICAS BIOMÉDICAS profª. Ana Goulart FEEDBACK AVALIAÇÃO A1 DILUIÇÃO SERIADA Questão 1 As estufas são amplamente usadas em laboratórios. Para alguns materiais o processo de secagem à 60° ocorre por até 24 horas. Assinale a alternativa que indica instrumentos que não devem ser secos em estufa: a) Lâmina de vidro e pipetas b) Proveta e bastão de vidro c) Pipeta de Pasteur e pipetas volumétricas d) Pipetas e balão volumétrico e) Provetas e tubo Falcon Questão 2 Existem diversos tipos de vidrarias para laboratórios, que são destinadas a finalidades diferentes. Para alguns procedimentos são necessários instrumentos de alta precisão. Assinale a alternativa que representa vidrarias de grande precisão: a) Pipeta e cálice de precipitação b) Proveta e erlenmeyer c) Béquer e balão volumétrico d) Pipeta de Pasteur e proveta e) Pipeta graduada e balão volumétrico Questão 3 As micropipetas são instrumentos utilizados para medir ou transferir líquidos. Para garantir seu bom funcionamento e precisão alguns cuidados devem ser tomados. Assinale a alternativa que representa os cuidados com esse instrumento: a) Após o uso devem ser guardadas em local escuro na horizontal b) A combinação entre a micropipeta e ponteira não interfere na precisão da pipetagem. c) Ao escolher a micropipeta de volume variável deve-se primeiro ajustar o volume com cuidado para não ultrapassar o volume máximo e mínimo definido pelo fabricante. d) Durante a pipetagem não há problemas em inverter ou virar a pipeta (de cabeça para baixo) mesmo com líquido na ponteira pois ela tem pressão que não permite entrada do material para o instrumento. e) A micropipeta deve possuir alta precisão enquanto a exatidão não é necessária Questão 4 As Boas Práticas de Laboratório (BPL) são um conjunto de ações com o objetivo de proporcionar a diminuição dos riscos do ambiente laboratorial. Assinale a alternativa que contemple BPL: a) A lavagem das mãos deve ser feita sempre antes de colocar as luvas, mas não é necessária ao retirá-las já que não ficaram expostas. b) Nunca pipetar com a boca, usar pipetadores automáticos, manuais ou peras de borracha. c) Os equipamentos de proteção coletiva devem estar no laboratório, mas não é necessário que o profissional biomédico entenda e saiba utilizá-lo ficando a cargo apenas do pessoal da segurança do trabalho. d) No preparo de soluções, se uma determinada substância nos parecer familiar, podemos cheirá-la, mas com muito cuidado. e) Nenhuma das alternativas anteriores Questão 5 5 ) Com base nos procedimentos e nas boas práticas de laboratório. Analise as afirmativas abaixo em verdadeira ou falsa e assinale a alternativa correta: 1 - A capela de exaustão deve ser usada sempre que manipularmos substâncias voláteis. V 2- É obrigatório o uso de sapato fechado e jaleco V 3 - Os cabelos devem estar presos V 4 - Os resíduos químicos liberados após as reações devem ser descartados na pia. F 5 - As luvas devem ser descartadas em saco branco e os vidros quebrados em caixa de perfuro cortante. V 6 - Os microorganismos de classe I apresentam alto risco individual e coletivo, portanto devem ser manipulados em capela de fluxo laminar. F a)São verdadeiras as afirmativas 1, 2, 3 e falsas 4,5,6 b)São verdadeiras as afirmativas 2,3,5,6 e falsas 1,4 c) São verdadeiras as afirmativas 1,4,5 e falsas 2,3,6 d) São verdadeiras as afirmativas 1,2,3,5 e falsas 4,6 e) Nenhuma das anteriores Questão 6 6 ) Esse instrumento de grande precisão e volume fixo é normalmente indicado para preparo de controles e calibradores. a) Pipeta graduada b) Béquer c) Proveta d) Pipeta volumétrica e) Pipeta de Pasteur Questão 7 7) Para realizar o exame de colesterol deve-se pipetar 1 ml de reagente e 10 ul de soro. Seguindo a numeração identificada nos instrumentos abaixo, quais instrumentos você utilizaria para realizar o exame? a)1,2,5,7,8 b) 1,3,5,6,7 c) 2,4,5,6,8 d) 1,4,5,7,8 e) 1,2,3,4,5 Questão 8 8) Soluções são misturas formadas por solvente e soluto e a preparação desse tipo de mistura está relacionada com a sua solubilidade. São fatores que influenciam a solubilidade de uma solução: a) Temperatura e pressão b) Temperatura e iluminação c) Quantidade do soluto e tipo de pesagem d) Agitação e vidraria usada para dissolução e) Pressão e tipo de espátula usada para retirar o soluto Questão 9 9) Um técnico preparou uma solução de Cloreto de sódio (NaCl) a temperatura de 20°C e verificou que todo o soluto foi dissolvido pelo solvente, podemos classificar essa solução em: a) Soluções saturadas b) Soluções supersaturadas c) Soluções insaturadas d) Soluções megainsaturada e) Nenhuma das alternativas anteriores Questão 10 10) Assinale a alternativa que contenha instrumentos mais precisos para medição: a) Erlenmeyer e proveta b) micropipeta e pipeta de Pasteur c) béquer e balão volumétrico d) pipeta graduada e tubos Falcon e) pipeta volumétrica e balão volumétrico Questão 11 11) O preparo de soluções deve ser feito de maneira rigorosa visto que será utilizado para várias análises laboratoriais. Assinale a alternativa correta que envolve esse preparo: a) A balança analítica ou semi-analítica deve ser escolhida de acordo com a massa do soluto que será pesada. b) Em soluções preparadas com água e ácido devemos colocar primeiro a água, depois o ácido e só depois ajustar o volume de água até o menisco. c) Não usar a mesma espátula de pesagem para diferentes sais d) As soluções prontas devem ser identificadas com rótulo seguindo as instruções da legislação vigente e) Todas as anteriores estão corretas Questão 12 12) Os equipamentos de segurança para proteção individual e coletiva são: a) cabines de segurança biológica (coletiva) b) Protetor facial, máscara facial e óculos de proteção (individual) c) Luvas e avental (individual) d) chuveiro lava-olhos (coletiva) e) Todas as anteriores Questão 13 13) Um laboratório de análises clínicas cujo setor de Microbiologia realiza as seguintes atividades: coleta de materiais, cultivo de bactérias e vírus incluindo da tuberculose e HIV. Deve ser classificado em qual nível de biossegurança (NB)? a) NB1 b) NB2 c) NB3 d) NB4 e) Nenhuma das anteriores Questão 14 14) O mapa de risco é fundamental para segurança dos colaboradores e clientes do laboratório. No que consiste o mapa de risco? a) Procedimento documentado com instruções de preparo para os pacientes b) Procedimento operacional da área técnica c) Representação gráfica dos riscos à saúde identificados em todos os locais da empresa. d) Conjunto de atividades para segurança do analista e) Normas de descarte de resíduos sólido Questão 15 15) Considerando os conceitos de precisão e exatidão , a opção que apresenta resultados precisos e não exatos é? a) 1 b) 2 c) 3 d) 4 e) Nenhuma das anteriores Questão 16 Todas as alternativas relacionadas à história da Biomedicina estão corretas, exceto: a) A profissão foi regulamentada em 1979 que dispunha sobre o exercício de diversas habilitações pelo Biomédico (só análises clínicas) b) Em 1989 foram publicadas as Resoluções nº 19, 20, 21 e 22, do Conselho Federal de Biomedicina, criando os Conselhos Regionais de Biomedicina c) A ideia da profissão biomédica surgiu em 1950 pelo Prof Leal Prado, tendo como objetivo a formação de profissionais para atuarem como docentes nas disciplinas básicas das escolas de medicina e de odontologia, e como pesquisadores científicos. d) A implantação do primeiro curso “Ciências Biológicas – Modalidade Médica” foi em 1966 na Escola Paulista de Medicina e)Nenhuma das alternativas Questão 17 As diretrizes curriculares nacionais para o ensino de graduação em Biomedicina definem os princípios, fundamentos, condições e procedimentos da formação de biomédicos, estabelecidas pela Câmara de Educação Superior do Conselho Nacional de Educação, para aplicação em âmbitonacional na organização, desenvolvimento e avaliação dos projetos pedagógicos dos cursos de graduação em Biomedicina. Diante do exposto, a formação do biomédico tem por objetivo dotar o profissional dos conhecimentos requeridos para o exercício das seguintes competências e habilidades específicas: I - Realizar análises físico-químicas e microbiológicas de interesse para o saneamento do meio ambiente, incluídas as análises de água, ar e esgoto; II - Atuar na seleção, desenvolvimento e controle de qualidade de metodologias, reativos, reagentes e equipamentos; III .Realizar pequenos procedimentos cirúrgicos em ambulatórios, para fins de análises laboratoriais e toxicológicas IV. Realizar, interpretar, emitir laudos e pareceres e responsabilizar-se tecnicamente por análises clínico-laboratoriais, incluindo os exames hematológicos, citológicos, citopatológicos e histoquímicos, biologia molecular, bem como análises toxicológicas, dentro dos padrões de qualidade e normas de segurança. Assinale a alternativa correta: a) I,e II b) I, II e III c) II, III e IV d) II e IV e) I, II e IV Questão 18 As soluções podem ser classificadas de acordo com o soluto ou o solvente. Assinale alternativa correta, referente a afirmação: a) “Soluções sólidas, gasosas ou liquidas”, são classificadas de acordo com o soluto da solução. (estado físico) b) A classificação da solução quanto a natureza do solvente, é denominada solução molecular ou solução iônica (natureza do soluto) c) A Solução supersaturada é classificada de acordo com a quantidade de soluto dissolvido. d) Soluções insaturadas são classificadas de acordo com a quantidade de solvente dissolvido (proporção entre soluto/solvente) e) A classificação quanto a natureza da solução é de acordo com o solvente e soluto (natureza do soluto) Questão 19 Segundo as diretrizes curriculares nacionais, a estrutura do curso de graduação em Biomedicina deverá assegurar: a) A articulação entre o ensino e pesquisa a distância, para que não se faça necessário a realização presencial de experimentos e/ou de projetos de pesquisa b) A definição de estratégias pedagógicas que articulem o saber; o saber fazer e o saber conviver, visando desenvolver o aprender a aprender, o aprender a ser, o aprender a fazer, o aprender a viver juntos e o aprender a conhecer que constitui atributos indispensáveis à formação do biomédico; c) O estímulo a trabalhos individuais, por favorecerem a realidade do profissional no mercado de trabalho d) As atividades teóricas e práticas presentes a partir do terceiro semestre do curso, permeando a formação do biomédico, de forma integrada e interdisciplinar; e) Todas as alternativas Questão 20 O Coeficiente de solubilidade é quantidade máxima de soluto que pode se dissolver em certa massa de solvente a dada temperatura. Diante do exposto, correlacione (1) Solução insaturada diluída, (2) Solução saturada com corpo de fundo; (3) Solução insaturada concentrada; (4) Solução supersaturada; (5) Solução saturada ( 3 ) Quantidade de soluto esta próxima do limite de Coeficiente de Solubilidade ( 5 ) Quantidade de soluto é o limite do Coeficiente de Solubilidade ( 1 ) Quantidade de soluto muito abaixo do Coeficiente de Solubilidade ( 2 ) Quantidade de soluto é maior que o limite do Coeficiente de Solubilidade ( ) Quantidade de soluto dissolvido é maior que o Coeficiente de Solubilidade a) 1,3,2,5 e 4 b) 2,3,4,1 e 5 c) 3,4,1,2 e 5 d) 3,5,1,2 e 4 e) 4,1,2,5 e 3 Aula 2 soluções 1 - Descreva todas as fases da pipetagem com pipeta de vidro, saliente as mais importantes Escolher a pipeta com o volume igual ou mais próximo possível do que será utilizado. Utilizar pipetas sem avarias ou trincas por exemplo. Acoplar o dispositivo de pipetagem e ajustá-lo conforme especificação Colocar a pipeta na vertical e inserir no líquido a ser aspirado Não é necessário colocar até o fundo do recipiente mas é importante que não haja bolhas durante o processo Aspirar lentamente até a marca desejada (volume) Com os olhos em frente a pipeta verifique e ajuste o menisco (para líquidos incolores o menisco inferior deve ficar na linha da calibração enquanto para líquidos coloridos deve ficar na linha superior do menisco. Transfira a pipeta para o recipiente que receberá o material (se necessário limpe a parte externa da pipeta) Libere lentamente o líquido Para pipetas com 1 traço (escoamento total) não é necessário liberar a última gota enquanto que pipetas com 2 traços (escoamento parcial) deverá ser dispensada a última gota. Aula prática e teórica pipetagem 2 - Misturando-se 20 gramas de Cloreto de sódio em 300 gramas de água: Pergunta-se: a) Qual será o título e porcentagem em massa dessa solução? T = m1 = 20 = 0,06 m1+ m2 320 % massa = 0,06 x 100% = 6% b) Como podemos classificar essa solução quanto a natureza do soluto? Explique: Soluções iônicas são aquelas que apresentam íons dissolvidos. São chamadas também de soluções eletrolíticas, pois conduzem corrente elétrica. Classificação das soluções – natureza do soluto • Soluções iônicas: são aquelas que apresentam íons dissolvidos. São chamadas também de soluções eletrolíticas, pois conduzem corrente elétricas e podem ocorrer por: Dissociação iônica: Aula de preparo de soluções 3 - Evapora-se totalmente o solvente de 750 mL de uma solução aquosa de MgCl2 de concentração 11,5 g/L. Quantos gramas de soluto são obtidos? C = m v 11,5 = m 0,75 11,5 x 0,75 = m 8,625 g 4 - Calcule o título e a porcentagem em massa de uma solução feita a partir da dissolução de 465g de HCl em 1,3 kg de água. T = m1 m1+m2 T = 465 465+ 1300 T= 0,26 % em massa = 0,26 x 100% = 26% Entenda as Avaliações A1 = Já realizada vale de 0 a 10 A2 faremos em forma de atividades (problemas e cálculos) no blackboard , data 08/05/2020 e vale de 0 a 10 A3 faremos avaliação prática se estivermos presencial em 15/05/2020 (aguardaremos a posição das autoridades governamentais) Vale de 0 a 10 Ao final as 3 notas serão divididas por 3 e essa será a nota N1 que tem peso de 40% média bimestral. A4 - deve ser realizada até a data 30/04/2020 que é a APS e é feita pelo blackboard tem peso 1 na N2 A5 - Avaliação teórica final que será realizada no final do semestre, data 12/06/2020, tem peso 9 na N2 Ao final a somatória da N2 vale 10 e tem peso de 60% na nota final. IMPORTANTE: QUALQUER ALTERAÇÃO ENVOLVENDO DATAS OU ATIVIDADES SERÃO COMUNICADAS VIA BLACKBOARD E / OU PELOS MEIOS DE COMUNICAÇÃO INSTITUCIONAL PRÁTICAS BIOMÉDICAS profª. Ana Goulart Aula 14 - Técnicas/ cálculos – diluição seriada, Titulação Relembrando Diluição simples - fórmulas Relembrando - Diluição simples É o processo de diminuição da concentração de uma solução pela adição de solvente. Ao aumentar o volume de solução, as moléculas de soluto passam a ter um maior espaço para ocuparem, de modo que ficam mais espalhadas A massa do soluto continua a mesma (massa ou em mol). A variação é do volume (aumenta) e a concentração (diminui). SEMPRE LEMBRAR QUE DILUIR DIMINUI A CONCENTRAÇÃO Relembrando diluição simples em g/l Ao diluir 100 ml de uma solução de concentração 15g/L ao volume final de 150 ml, a nova concentração será? C inicial = 15 g/l V inicial = 100 ml ou 0,1 l C final = ? V final = 150 ml ou 0,15 l Ci . Vi = Cf . Vf 15 . 0,1 = Cf . 0,15 Cf = 1,5 0,15 Cf = 10g/L Relembrando - diluição simples em mol Foram adicionados 35 ml de água destilada a 15 ml de uma solução 0,50 M em KMnO4. A molaridade dessa nova solução é: Molaridade inicial – 0,50 em mol Volume inicial – 15 ml Molaridade final - ? Volume final – 15+35 = 50 ml = 0,5 x 15 = M2 x 50 7,5 = M2 x 50 7,5 = M2 50 M2 = 0,15 M O que é Fator de diluição O fator de diluição corresponde à relação entre o volume da solução depoisde ser diluída e o volume da solução antes de ser diluída. Pode ser feito também com a concentração usando a relação entre concentração da solução após ser diluída e concentração da solução antes de ser diluída Ci . Vi = Cf . Vf Ci = concentração antes de ser diluída Cf = concentração depois de ser diluída Exemplo 1 - Como aplicar na fórmula No exercício anterior: C inicial = 15 g/l V inicial = 100 ml ou 0,1 l C final = 10 g/l V final = 150 ml ou 0,15 l Ci = 15 g/l Cf = 10 g/l Fator de diluição: Ci = 15 = 1,5 O fator de diluição foi 1,5 e significa que Cf 10 1,0 a concentração final é 1,5 vezes menor que a inicial Fator de diluição usando volume Vi = 100 ml Vf = 150 ml Fator de diluição: Vf = 150= 1,5 O fator de diluição foi 1,5 quer dizer que Vi 100 1,0 o volume final é 1,5 vezes maior que o inicial Apenas para exemplo de substituição na fórmula. Atentem para os próximos exemplos que são mais reais para laboratório Exemplo 2- Como achar o Fator de diluição O frasco contendo o “soluto” é chamado também de alíquota. Tenho uma solução que foi diluída colocando 0,1ml do soluto e 9,9 ml do solvente ou diluente. Qual o meu fator de diluição? Então: 0,1 ml é meu volume inicial Primeiro passo: somar o soluto com o diluente para achar o volume final: 0,1 + 9,9 = 10 ml Segundo passo: aplicar a fórmula Vf/Vi Fator de diluição = Vf = 10 = 100 ou seja 1 Vi 0,1 100 Como achar o volume quando tenho o fator de diluição Volume inicial = volume final x fator de diluição Exemplo 3 - Como calcular o volume para um fator de diluição? Quero preparar 30 ml de uma solução que apresenta fator de diluição 1/20. Quanto devo colocar da minha alíquota e do diluente? Para saber o volume da alíquota Vi = Vf x fator de diluição Vi = 30 x 1 = 1,5 ml (da alíquota) 20 Para saber diluente: Vf – vi 30 – 1,5 = 28,5 Então, em uma diluição de 1/20 com volume final de 30mL, você usará 1,5mL de soluto (alíquota) e 28,5mL de diluente. Exemplo 4 – Como achar fator de diluição e volume Um suco concentrado apresenta na embalagem a orientação de diluir 1:5 com água. Qual o fator de diluição e quanto devo colocar de suco e de água? 1 O fator de diluição é 5 (total da solução) . 5 Como ler 1/5 = 1 ml do suco e completar com água até 5 ml Então coloco 1 ml do suco e 4 ml de água. E se eu quisesse 100 ml de suco? Acho o volume da alíquota (suco concentrado) Vi = 100 x 1 = 20 ml suco concentrado 5 Subtraio do meu volume total o volume da alíquota 100 ml – 20 ml = 80 ml de água Exemplo 5 – fator de diluição Exemplo: Dissolveram-se 35,5 g de sulfato de sódio (Na2SO4) em água e prepararam 200 ml da solução. Calcule a) O volume que devo retirar dessa solução para preparar 100 ml de uma solução diluída com fator de diluição 10. Solução inicial Exemplo 5 – fator de diluição a) Para saber quanto devo retirar da solução inicial: Volume inicial = volume final x fator de diluição Volume inicial = 100 x 1 = 10 ml 10 Devo retirar 10 ml da solução inicial e completar até 100 ml com água Exemplo 6 – fator de diluição Uma amostra de sangue total apresentou valores acima da linearidade do equipamento e precisa ser diluída 1/10 em solução fisiológica. Quanto devo colocar da amostra e da solução? Devo diluir 1 então o fator de diluição é 10 10 Para cada 1 ml do sangue devo completar até 10 ml com solução fisiológica. Mas e se quiser preparar apenas 1 ml? Volume inicial = volume final x fator de diluição Vi = 1 ml x 1 = 0,1 10 1 ml -------- 10 ml 1 0,1 ml x --------- 1 ml 10 Ou seja coloco 0,1 ml (100 ul) e completo até 1 ml com solução fisiológica. Veja de outra maneira - em laboratório é comum usar regra de três Diluição seriada Diluição seriada: Uma diluição que dá origem a outra criando uma sequência. O objetivo é diminuir progressivamente a quantidade de soluto em relação ao solvente. Exemplo: Tenho uma diluição 1:2 (então o fator de diluição é 2) Para fazer a diluição seriada multiplico por 2 : 1 , 1, 1, 1 ..... 2 4 8 16 Exemplo 1 – diluição seriada Preciso preparar uma pintura com cores degrade. Como fazer? Diluição seriada Exemplo 1 – diluição seriada Exemplo 2 - Diluição seriada envolvendo soro Em uma amostra foi realizado o exame VDRL (sífilis) que apresentou resultado positivo. Esse é um exame muito importante durante a gravidez quando é positivo e se não houver tratamento adequado a criança poderá nascer com sequelas graves como cegueira por exemplo. A gestante é tratada com ATB e o médico monitora através do valores obtidos nos exames a eficácia da medicação. O que devo fazer? Diluição seriada com solução fisiológica até que o resultado apresente-se negativo Exemplo 2 - diluição seriada envolvendo soro Como fazer? A amostra foi testada inicialmente pura ou seja 1:1 e minha primeira diluição foi 1:2 (fator de diluição 2) REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS GARÓFALO, D de A; CARVALHO, C. H. M. Operações básicas de laboratório de manipulação: Boas práticas. 1ª Ed. São Paulo: Érica, 2015. OTTO ALCIDES OHLWEILER – Química analítica quantitativa Peter Atkins – Princípios de Química – Questionando a vida moderna e o meio ambiente
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