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Objetivos: 1. Material genético em células Procariotas e Eucariotas 2. Diferenciar DNA e RNA 3. Explicar e esquematizar os processos celulares de a) Replicação do DNA b) Síntese de RNA mensageiro (TRANSCRIÇÃO) c) Síntese de Proteínas (TRADUÇÃO) 4. Descrever os processos de geração de diversidade genética a) Mutação b) Recombinação GENÉTICA MICROBIANA Material Genético em Procariotos Nucleoide (DNA Cromossomal) Genes essenciais à vida da bactéria Genes constitutivos DNA Plasmidial Genes não essenciais mas que dão vantagem à bactéria Exemplo: Genes de Resistência a drogas Plasmídeo Material Genético em Procariotos Nucleoide e Plasmídeos MAPA DO CROMOSSOMO E. coliEXEMPLO DE UM PLASMÍDEO Genes que dão vantagem à bactéria Exemplo: Genes de Resistência a drogas DNA extracromossomal e circular NÚCLEO EUCARIÓTICO = Núcleo Verdadeiro Material Genético em Eucariotos (Cario = Núcleo) (Teca = Envoltório)(Eu = Verdadeiro) Núcleo Organizado 1. Carioteca ou Envelope nuclear – presença de poros 2. Nucléolo – organização dos ribossomos 3. Nucleoplasma – solução aquosa com íons, ATP, enzimas dentro do núcleo 4. Cromatina – DNA associado às Histonas Material Genético emEucariotos DNA Nuclear emCromossomos DNA emMitocôndrias DNA emCloroplastos 2 1 4 3 DNA e RNA são ÁCIDOS NUCLÉICOS Polímeros ou Longas Cadeias deNucleotídeos Cadeias extensas de unidades monoméricas, que se repetem, conhecidas por NUCLEOTÍDEOS PENTOSES DO DNA E RNA RNA DNA PENTOSES – CarboidratosDE 5 CARBONOS Ácido DesoxirriboNucleotídeo DNA INGLÊS - ADNPORTUGUÊS Ácido RiboNucleotídeo RNA - ARN B A SE S N IT R O G EN A D A S Uma consequência da estrutura de nucleotídeos é que uma cadeia de polinucleotídeos tem direcionalidade, ou seja, ela tem duas extremidades diferentes uma da outra. Na extremidade 5', ou início, da cadeia, o grupo fosfato 5' do primeiro nucleotídeo da cadeia se sobressai. Na outra extremidade, chamada de extremidade 3', a hidroxila 3' do último nucleotídeo adicionado à cadeia é exposta. Quando nucleotídeos são adicionados a uma fita de DNA ou RNA, a fita cresce em seu final 3', com o fosfato 5' de um nucleotídeo que entra se ligando ao grupo hidroxila no final 3' da cadeia. RNA DNA Ligação por Pontes de Hidrogênio entre bases nitrogenadas das duplas fitas L ig a çã o F o sf o -d ié st e r e n tr e n u cl e o tí d e o s 3’ 5’ A T C G DNA= AGCT Fita dupla Pentose = Desoxiribose RNA= AGCU Fita simples Pentose = Ribose A U C G A T C G Exon – Região codificadora Intron – Região NÂO codificadora – Presente somente em Eucariotos Modelo da dupla hélice do DNA (Watson & Crick, 1953) Importância do DNA IMPORTÂNCIA DO RNA É a molécula intermediária entre o DNA e a Proteina Sequência de DNA determinará uma sequência de Proteina Como? Transcrição é o processo que forma o RNA mensageiro DNA é transcrito em RNA mensageiro e este é traduzido em Proteina Tradução é o processo que forma a proteína Sequência DNA – RNA m – Sequência aminoácidos (proteina) T ra n s c riç ã o T ra d u ç ã o 2 3 1 Autoduplicação DNA Fonte: www.sobiologia.com.br 1.Abertura da dupla fita (Desnaturação do DNA) 2.Pareamento de um iniciador e depois nucleotídeos soltos no meio (complementariedade de bases) Nucleotídeo A pareia com T e vice versa Nucleotídeo G pareia com C e vice versa 3. Pela ação da enzima DNA polimerase 1. Replicação do DNA http://www.sobiologia.com.br/ 1. Duplicação DNA Semi-Conservativa Fonte: www.japassei.pt http://www.japassei.pt/ REPLICAÇÃO DO DNA Fases da replicação: iniciação, alongamento e terminação Processo bioquímico complexo que envolve inúmeras enzimas DNA polimerase DNA ligase Primase Topoisomerase Helicase Proteínas estabilizadoras de DNA Sistema DNA replicase ou Replissomo 1. Duplicação DNA Semi-Conservativa Como as sequências de nucleotídeos (Genes) determinam sequências de aminoácidos? TRANSCRIÇÃO TRADUÇÃO CÓDON CÓDON CÓDON CÓDON 2. Transcrição Enzima RNAPolimerase Ribonucleotídeo sendo adicionado Fita de DNA que não éMolde Fita de DNAMolde Direção daTranscrição É a formaçãode uma fita de RNA mensageiro a partir de uma fita de DNA Molde 2- Transcrição: a mensagem do DNA é passada para o RNA Fonte: biologia-no-vestibular.blogspot.com RNA mensageiro Fita simples Contem U Pós Transcrição há o Processamento do RNA mensageiro ou Splicing Splicing ocorre somente em Eucariotos Proteínas são polímeros deAMINOÁCIDOS 3. Tradução ou Síntese deproteínas DNA TRÊS TIPOS RNA RNAmensageiro RNAtransportador RNAribossômico Conceitos importantes para compreender a Tradução Proteica RNA mensageiro ecódons RNA Transportador e anticódons Código Genético RNAribossômico e Ribossomo No RNAm, trincas de nucleotídeos são CÓDONS AMINOÁCIDO ANTICÓDON RNAtransportador Numa exterminada tem-se uma trinca de nucleotídeos (ou ANTICÓDON) Numa exterminada tem-se um AMINOÁCIDO correspondente ao anticódon AMINOÁCIDO RNA t ANTICÓDON DO RNA t RIBOSSOMO CÓDONs no RNA m RIBOSSOMO RIBOSSOMO Ribossomo: 3 sítios: um para RNA m e 2 sítios para RNA t 1 2 CÓDIGO GENÉTICO Cada códon irá codificar um único aminoácido. Mas um aminoácido pode ser codificado por mais de um códon (CÓDIGO redundante ou DEGENERADO) Ribossomo Esquema da tradução UAA UAG UGAAUG 1. AUG = UAC METIONINA 2. UUU = AAAFENILALANINA 3. GGA= 4. UUC= 5. ACA= 6. GAC =... 1. AUG = UAC METIONINA 2. UUU =AAA FENILALANINA 3. GGC = CCG GLICINA 4. AGA= 5. GAA= 6. CCU = ... 1.AUG = UAC METIONINA 2.UUU =AAA FENILALANINA 3.GGC = CCG GLICINA 4.AGA = UCU ARGININA 5.GAA = 6. CCU =... MUTAÇÃO DIVERSIDADE GENÉTICA O que é variabilidade genética e qual sua importância evolutiva? Variabilidade genética ou diversidade genética é a ocorrência de alterações e diferenças no DNA ou RNA entre indivíduos de uma população. Ela é a matéria-prima sobre a qual a seleção natural atua. MUTAÇÃO RECOMINAÇÃO VARIABILIDADE Mutação são alterações aleatórias nas bases do DNA ou RNA Pode espontânea, por erros na replicação, transcrição Pode ser induzida por mutagênicos (químicos e físicos) São classificadas como: • Mutações gênicas: alteram sequências de nucleotídeos por substituição de bases, deleção e inserção. • Mutações cromossômicas: modificações na estrutura e número dos cromossomos. Alterações genéticas pontuais em um organismo, que ocorrem em poucos pares de bases nitrogenadas, alterando OU NÃO a expressão de determinado gene. Mutação por SUBSTITUIÇÃO DE UMA SÓ BASE DE DNA MUTAÇÃO POR DELEÇÃO MUTAÇÃO POR INSERÇÃO CONSEQUÊNCIAS DAS MUTAÇÕES Células Somáticas – alteram o controle de sua multiplicação -> neoplasias. Células Germinativas – transmitidas para a próxima geração. Mutação silenciosa é a alteração não determina a alteração do aminoácido, devido à redundância do código genético. Estas mutações são muito comuns e responsáveis pela diversidade genética, que não é expressa fenotipicamente. Mutação com troca de sentido: a conformação da proteína pode ser alterada. Mutação sem sentido (nonsense): pode originar uma proteína inativa mais curta ou mais longa do que a proteína normal. RECOMBINAÇÃO, ASSIM COMO MUTAÇÃO, CONTRIBUÍ PARA A DIVERSIDADE GENÉTICA DE UMA POPULAÇÃO ÇÃO GENÉTICA Rearranjo da informação genética dentro de e entre moléculas de DNA Tipos de recombinação: (1) homóloga, (2) sítio-específica e (3) transposição de DNA 3. Transposição de DNA: pequenos fragmentos de DNA com capacidade de “mover-se” dentro de ou entre cromossomos. A movimentação de transposons é pouco frequente, realizada por enzimas e muito regulada 2. Recombinação sítio-específica: em regiões específicas do DNA. Funções: reparo do DNA e regulação da expressão gênica 1. Recombinação Homóloga: moléculas deDNA homólogas, na reparação do DNA e na conjugação (bactérias). Em eucariotos, no reparo e na meiose (crossing over) TRANSFORMAÇÃO MECANISMOS DE TROCA DE GENES ENTRE BACTÉRIAS TRANSFORMAÇÃO; CONJUGAÇÃO; TRANSDUÇÃO CONJUGAÇÃO BACTERIANA CONJUGAÇÃO Fator F = Plasmideo Cromossomo Plasmideos TRANSDUÇÃO BACTERIANA DNA bacteriano é transferido de uma célula doadora a uma receptora por um bacteriófago TRANSDUÇÃO Os nucleotídeos podem ter um único grupo fosfato, ou uma cadeia de até três grupos fosfato. Em uma célula, um nucleotídeo prestes a ser adicionado ao final de uma cadeia de polinucleotídeos estará ligado a uma série de três grupos fosfato. Explique porque em uma cadeia de DNA ou RNA, cada nucleotídeo tem apenas um grupo fosfato. Resposta : porque Quando o nucleotídeo se junta a cadeia crescente de DNA ou RNA, perde dois grupos fosfato. RNA transportadores (tRNA) são exemplos de moléculas de RNA que não codificam proteínas. Qual a importância da seqüência de bases de um tRNA? Qual impacto pode ocorrer na tradução se ocorrer mutação na seqüência de bases do DNA que dará origem a algum tipo de tRNA? Resposta : A importância da sequência de bases nucleotídicas de um tRNA está diretamente ligada à sua função, ou seja, na correspondência entre uma sequência de anticódons e o respectivo aminoácido que carrega, com base nas correspondências ditadas pelo Código Genético. Uma alteração mutacional na sequência do DNA o qual transcreverá um RNA transportador (em especial) alterará a sequência do anticódon. Esta alteração poderá ou não, trocar o aminoácido correspondente que o RNAt original carregava. Contudo, na tradução proteica, por esta mutação do RNAt, não haverá impacto, pois tem-se diferentes RNAts transportadores, os quais se encaixam segundo a informação ditada pelo RNA mensageiro, e esta última estará correta. As bases nitrogenadas se estendem para o interior da dupla hélice do DNA, como os degraus de uma escada, em pares As duas fitas da hélice vão em direções opostas, isto é, o final 5' de uma fita é pareado como final 3' de sua fita correspondente. (Nos referimos a isto como orientação antiparalela e é importante ao copiar o DNA.) As duas fitas de DNA transportam a mesma informação genética? Justifique sua resposta. Não. Justificativa: As duas fitas da hélice vão em direções opostas, isto é, o final 5' de uma fita é pareado com o final 3' de sua fita correspondente, como uma orientação antiparalela. Assim, as informações são complementares, sendo assim os mRNA transcritos de cada fita serão diferentes e consequentemente terão diferentes aminoácidos e as proteínas também terão funções diferentes. a) De que modo a ordem no código genético minimiza a letalidade mutacional? A ordem no código genético minimiza a letalidade mutacional porque as muitas substituições de bases que ocorrem na terceira posição dos códons não mudarão o aminoácido correspondente. Além disso, aminoácidos com propriedades semelhantes têm códons que diferem em apenas em uma base, o que ameniza os efeitos deletérios, em casos de substituições. b). Explique como a mutação em cada uma das situações pode levar a alterações na cadeia polipeptídica: inserção de bases, deleção de bases, mutação de sentido trocado e mutação sem sentido. A inserção e / ou deleção de bases nucleotídicas, numa sequência, alterarão o código de leitura dos códons no RNA mensageiro e estas mutações (inserção e / ou deleção) poderão afetar a sequência da cadeia polipeptídica, quando a sequência dos novos códons formados, a partir destas mutações, corresponderem a uma sequência de aminoácidos distinta da original (sem a mutação). Se esta alteração mudar a sequência em um ou poucos aminoácidos, então esta é uma mutação de sentido trocado, na qual a sequência de aminoácidos é diferente do original. Por outro lado, se esta alteração mudar a sequência enormemente, por exemplo, inserindo um códon de terminação no início ou muito tardiamente na sequência, ocorrerá, consequentemente, a redução ou o aumento do tamanho da proteína, respectivamente, caracterizando uma mutação nonsense ou mutação sem sentido.
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