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Curso FARMÁCIA (EAD)/NUTRIÇÃO (EAD) Disciplina: Microbiologia Geral Nota: Professor: João Damasceno Lopes Martins Aluno: Valesca Nunes Borges de Castro Turma: Semestre: 1º Valor: 2,0 ptos ATIVIDADE ONLINE PONTUADA Atenção aluno, São dois exercícios de entrega. 1ª Questão: Antes de realizarmos a coleta, uma paciente foi orientada a fazer assepsia da região genital e também, dispensar o primeiro jato, coletando apenas o jato intermediário de urina. Feito esse procedimento, a urina foi semeada em meio de cultura não seletivo, estéril e colocada em estufa à 37º C/48 horas. Após esse período a cultura se apresentou mista, com aspecto das colônias típicas de bactérias. A coloração de gram realizada revelou a existência de cocos gram positivos e cocobacilos gram negativos. O técnico de laboratório concluiu, após avaliação, que os gram positivos eram Staphylococcus sp e pertenciam à microbiota normal, enquanto os gram negativos se tratavam de Ureaplasma sp provável gênero relacionado com o quadro infeccioso. Então, ao ler o texto acima, responda: a) Caracterize, detalhadamente, a ultra-estrutura (composição química) da parede celular dos Staphylococcus identificados na cultura acima. Caracterizada por várias camadas de peptidioglicano (cerca de 90% da parede), ácido teicoico (polissacarídeo ácido com resíduo de glicerol fosfato ou ribitol fosfato) e o ácido lipoteicoico b) O Ureaplasma sp é uma bactéria sem parede celular. Por que então ela se mostrou como gram negativa? O Ureaplasma sp é uma bactéria sem parede celular porem possui membrana plasmática que tem muita semelhança com todas as membranas celulares, em relação à composição química e função associada. Membrana celular tem característica de revestimento, porém, difere da parede celular por sua menor permeabilidade, também classificada como permeabilidade seletiva. Também possui composição lipoproteica, formada por uma bicamada lipídica onde estão misturadas moléculas proteicas sendo assim ela é sensível ao uso de álcool e por existir uma membrana externa em sua parede, sendo ela constituída também por lipídeos, acaba se tornando mais permeável ainda. Ao aplicar o álcool, na forma de lavagem da lâmina, este tende a solubilizar estruturas lipídicas da célula. Exatamente por isso, torna mais permeável a membrana plasmática de ambos os tipos (Gram positivo e negativo). Por isso, os dois tipos celulares tendem a se descorar, porém, a Gram negativa, por ter uma parede celular mais fina, acaba se descorando mais, comparado ao Gram positivo. Após a lavagem com o álcool, lava-se a lâmina com água e aplica-se o contra- corante (Safranina O), conferindo cor às células que se descoraram mais, as Gram negativas. c) O que é uma cultura do tipo mista? Uma cultura de microrganismos é considerada uma cultura pura quando apenas um tipo de organismo está presente, já uma cultura mista é quando populações de organismos diferentes estão presentes. c) Um aluno da disciplina de Microbiologia geral, ao ver a mesma lâmina acima, corada pelo método de Gram, afirmou que os cocos Gram positivos observados, na verdade se tratavam de uma levedura, questionando o laudo anterior. O que pode ser observado nessa lâmina que esclareça essa dúvida, Coco ou levedura? Provavelmente o aluno se confundiu ao olhar a lamina pois os cocos e as leveduras são parecidas a olho nu, porém microscopicamente podemos observar a diferença, nas células de leveduras o formato é mais arredondado e, contém as pseudo-hifas (mais alongadas) e nas células de bactérias tem o formato circular (cocos), porém, menores que as leveduras. 2ª Questão: BIOLOGIA DA INFECÇÃO DE ZIKA VIRUS EM CÉLULAS HUMANAS O vírus Zika (ZIKV) é um flavivírus (família Flaviviridae) transmitido por Aedes aegypti e que foi originalmente isolado de uma fêmea de macaco Rhesus febril na Floresta Zika (daí o nome do vírus), localizada próximo de Entebe na Uganda, em 20 de abril de 1947. Esse vírus é relacionado ao vírus da febre amarela e dengue, e que causam febre hemorrágica. O vírus Zika tem causado doença febril, acompanhada por discreta ocorrência de outros sintomas gerais, tais como cefaleia, exantema, mal estar, edema e dores articulares, por vezes intensas. No entanto, apesar da aparente benignidade da doença, mais recentemente na Polinésia Francesa e no Brasil, quadros mais severos, incluindo comprometimento do sistema nervoso central (síndrome de Guillain-Barré, mielite transversa e meningite), associados ao Zika têm sido comumente registrados. Estruturalmente, este vírus apresenta genoma de RNA, fita simples e polaridade positiva. É envelopado e com capsídeo de simetria poliédrica. Haddow AD, Schuh AJ, Yasuda CY, Kasper MR, Heang V, et al. (2012) Genetic Characterization of Zika Virus Strains: Biology of Zika virus infection in human skin cells. J Virol 89:8880 –8896. Então, ao ler o texto acima, responda: a) O ZIKV, assim como descrito acima, é um vírus de RNA de polaridade positiva. O que isso significa? Quando os vírus cumprem a primeira via, seu genoma tem o mesmo senso do mensageiro. E por isso chama esse genoma de vírus de RNA de polaridade positiva. b) “Um vírus de capsídeo desnudo ou mesmo envelopado, quando perde, respectivamente, estas estruturas, perde também sua capacidade infectiva.” TRABULSI, 2010. Caracterize quimicamente o capsídeo e envelope viral e cite a etapa do processo de replicação viral dependente da presença destas estruturas. O capsídeo é um revestimento proteico e o envelope é um segundo revestimento, quimicamente, se mostra muito semelhante à membrana celular, com caráter lipoproteico e está presente na maioria dos vírus, sobretudo naqueles com genoma RNA. A etapa do processo de replicação viral é de adsorção.