Métodos Cromatográficos

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Métodos Cromatográficos 
e Espectrométricos
de Análises
Parte I
Parte 01
• Métodos Cromatográficos
• Tipos de Cromatografia
Parte 02
• Cromatografia e Métodos Espectroscópicos
• Quantificação de Compostos
Parte 03
• Cromatografia Gasosa
• Parâmetros
a) A=0,35 e B=2.
b) A=140 e B=200.
c) A=0.35 e B= 0.5
d) A=14 e B= 20.
e) A=27 e B=30.
Considere a seguinte cromatografia de camada delgada: 
Quais são os valores do fator de retenção (Rf ) para A e B, 
considerando que o valor de X = 20cm e que as distâncias 
percorridas por A e B foram 7cm e 10 cm, respectivamente. 
FATOR DE RETENÇÃO (Rf) = dA/dT
MIKHAEL SEMENOVICH 
TSWETT (1906) separação 
de folhas e gema de ovo (éter 
de petróleo) em coluna 
contendo carbonato de cálcio
Cromatografia
Princípio da separação
Migração diferencial da amostra através de uma
Fase Estacionária eluída por uma Fase Móvel
Eluição
1) Forma física do sistema cromatográfico
Cromatografia planar: fase estacionária 
disposta sobre uma superficie planar
Cromatografia em coluna: fase 
estacionária disposta em um tubo 
cilíndrico
2) Fase móvel empregada
Cromatografia gasosa: fase móvel é um 
gás
Cromatografia líquida: fase móvel é um 
líquido
Cromatografia supercrítica: fase móvel é 
um vapor pressurizado 
Fonte: Collins e col, 2006
Que critérios são 
utilizados na seleção da 
fase estacionária?
Deve-se levar em 
consideração a 
polaridade da fase 
estacionária e móvel 
em função da amostra
Análise qualitativa
FATOR DE RETENÇÃO (Rf) = 
dA/dT
Comparação com 
substâncias químicas de 
Referência
dT dA
Rf= 7cm/10cm 
0,7
Métodos 
cromatográficos são 
apenas utilizados 
nos processos de 
separação de 
compostos?
Não! Desde que 
acoplados a 
detectores, esses 
métodos podem ser 
utilizados 
quantitativamente.
.
Quantificação de substâncias
R² = 0,999
350000
450000
550000
650000
750000
850000
9,00 11,00 13,00 15,00
Á
r
e
a
Concentração
Anote aí!
Cromatografia
É uma técnica versátil e 
amplamente utilizada em 
vários ramos da Farmácia
✔ Análise de águas
✔Química Forense
✔Análises Clínicas
✔Indústria Farmacêutica 
✔Pesquisa de Novos Fármacos
✔Outros
Limpeza de amostras complexas
Utilizados na separação de compostos
Métodos Qualitativos e Quantitativos
a) cromatografia em camada delgada acoplada ao 
rotaevaporador.
b) espectroscopia na região do infravermelho acoplada 
a ultrassom.
c) cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao 
espectrômetro de massa.
d) arraste a vapor, somente.
e) ultrassom, somente.
Considere as etapas da produção de um extrato vegetal, 
apresentadas de forma resumida a seguir.
Separação das partes vegetais da planta (folhas, caule e raiz);
Trituração e moagem;
Extração com etanol por nove dias, realizando-se a trocado 
solvente a cada três dias;
Filtração;
Evaporação do solvente em rotaevaporador, viabilizandoa
obtenção dos extratos vegetais.
Caso uma das substâncias contidas nesse extrato desperte o 
interesse farmacológico, uma possibilidade viável de se 
separar, quantificar e identificar (definir a fórmula estrutural) 
tal substância é submetê-la a um(a): 
Cromatografia gasosa
FM: Gás Inerte
Colunas: Analíticas, preparativas e 
capilares 
Hidrogênio, 
nitrogênio e hélio 
Compostos 
Voláteis/semi 
voláteis PE até 300°C
Referências bibliográficas
COLLINS, C. H.; BRAGA, G. L.; BONATO, P. S.; Fundamentos de
cromatografia. Campinas, SP: UNICAMP, 2006.
MEYER, V. R. Practical high-performance liquid chromatography. 5th
ed. Chichester: John Wiley & Sons. 2010.
RAMBO, D.F.; BIEGELMEYER, R.; TOSON, N.S.B.; DRESCH, R.R.; MORENO,
P.H.; HENRIQUES, A.T. Box–Behnken experimental design for
extraction optimization of alkaloids from Erythrina verna Vell. trunk
barks and LC Method Validation. Ind. Crops. V. 133, 2019, Pages 250-
258
Foca no estudo!