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17/09/2020 1 CLASSIFICAÇÃO DOS ANIMAIS DE LABORATÓRIO Prof. Me. Raphael Chiarelo Zero ANIMAIS DE LABORATÓRIO ? 17/09/2020 2 CRONOGRAMA • INTRODUÇÃO • CLASSIFCAÇÃO DOS ANIMAIS DE LABORATÓRIO • Status sanitário • Status genético • Animais transgênicos • Principais espécies utilizadas • CONSIDERAÇÕES FINAIS INTRODUÇÃO • Utilização de animais: • Pesquisas • Teste • Ensino • Novos fármacos • Técnicas cirúrgicas • Descoberta de novos protocolos de tratamento • Descoberta de doenças genéticas 17/09/2020 3 INTRODUÇÃO • Animais geneticamente modificados: • Animais transgênicos: ESPERANÇA PARA CURA • Alzheimer • Esclerose múltipla • Diabetes • Hipersensibilidade • Dentre outras CLASSIFICAÇÃO DOS ANIMAIS DE LABORATÓRIO • Diferentes critérios: • Status sanitário • Status genético 17/09/2020 4 CLASSIFICAÇÃO DOS ANIMAIS DE LABORATÓRIO • STATUS SANITÁRIO: • Métodos de criação e manutenção • ANIMAIS LIVRES DE QUALQUER FORMA DE VIDA ASSOCIADA (MICROBIOTA) • Vírus • Bactérias • Fungos • Parasitas CLASSIFICAÇÃO DOS ANIMAIS DE LABORATÓRIO • STATUS SANITÁRIO: • Quanto mais eficiente as barreiras sanitárias • Menores as chances de contaminação dos animais • Classificação quanto ao status sanitário ou ecológico: • Prevenir erros induzidos • Classificação das barreiras disponíveis: três grupos • Convencionais, Livre de patógenos específicos e Gnotobióticos 17/09/2020 5 CONVENCIONAIS OU HALOXÊNICOS • Animais de padrão sanitário convencional • Microbiota indefinida • Ambiente: • Desprovido de barreiras sanitária rigorosas CONVENCIONAIS OU HALOXÊNICOS • Criação: • Princípios básicos de higiene • Limpeza • Desinfecção do ambiente e material utilizado 17/09/2020 6 CONVENCIONAIS OU HALOXÊNICOS • Pessoal técnico: • Em geral: • Apenas troca de uniforme • Manejo ou trabalho com os animais LIVRES DE PATÓGENOS ESPECÍFICOS OU HETEROXÊNICOS • Conhecidos como SPF: • Specific Patogen Free • Ou seja: • Animais que não apresentam microbiota capaz de lhes determinar doença • Albergam somente m.o não patogênicos 17/09/2020 7 LIVRES DE PATÓGENOS ESPECÍFICOS OU HETEROXÊNICOS • Criação: • Ambientes protegidos por barreiras sanitárias rigorosas: • Cada vez que se entra nas áreas com animais: • Técnico tem que tomar banho • Uniforme esterilizado • Esterilização de todo material de uso: • Vestuário, ração, gaiolas, cama, água e outros LIVRES DE PATÓGENOS ESPECÍFICOS OU HETEROXÊNICOS • Esterilização: • Altoclavagem • Câmara com gás esterilizante • Tanques de passagem com soluções desinfetantes • Criação dentro de isoladores** 17/09/2020 8 GNOTOBIÓTICOS • Animais que possuem microbiota associada definida: • Criados em ambientes com barreira sanitária absoluta • Alto padrão sanitário: • Manutenção em isoladores GNOTOBIÓTICOS •Gnotobiótico = vida conhecida • Animais livres de germes • Contaminados com um ou mais organismos detectáveis 17/09/2020 9 CLASSIFICAÇÃO DOS ANIMAIS DE LABORATÓRIO • STATUS GENÉTICO: • Dois grandes grupos: • Outbred – Não-consanguíneos heterogênicos • Inbred – Consanguíneos ou isogênicos • Híbridos congênitos • Mutantes • Geneticamente modificados - transgênicos ANIMAIS OUTBRED – NÃO-CONSANGUÍNEOS • São animais que: • Apresentam na constituição genética • Alta heterozigose • Em uma mesma colônia: • Grande diversidade genética • Vários alelos • Reprodução de populações naturais 17/09/2020 10 ANIMAIS INBRED – CONSANGUÍNEOS OU ISOGÊNICOS • Produto de 20 gerações consecutivas: • Acasalamento entre irmãos ou pais e filhos • Obtenção de homozigose – até 99% • Cada linhagem consanguínea: • Conjunto único de características que as difere entre si • Genes que sofrem menor ou maior grau de influências ambientais • Manutenção rigorosa das linhagens: variações mínimas • Mutações; Híbridos (duas linhagens inbred) e transgênicos (Segmento de DNA de outra espécie) ANIMAIS TRANSGÊNICOS 17/09/2020 11 ANIMAIS TRANSGÊNICOS • Genoma modificado • Introdução de sequência de DNA de um outro organismo • Engenharia genética: Mistura de pedaços de DNA • Diversas origens • Diferentes modelos animais: • Transgênicos por adição ou modelo de superexpressão de um gene • Modelo Knockout ou Knockin ANIMAIS TRANSGÊNICOS • Transgênicos por adição ou modelo de superexpressão de um gene: • Várias cópias desse gene • Endógeno ou de outra espécie • Adicionados ao genoma 17/09/2020 12 ANIMAIS TRANSGÊNICOS • Modelo Knockout: • Gene endógeno é inativado • Modelo Knockin: • Gene endógeno é previamente modificado ou substituído no genoma ANIMAIS TRANSGÊNICOS • Poderosas ferramentas de pesquisa: • Descoberta e desenvolvimento de novos tratamentos para várias doenças humanas • Final da década de 1960: • Primeiros trabalhos sobre transgênicos • Desde então: • Técnicas de genes recombinantes: produção de animais transgênicos 17/09/2020 13 Rato Hairless: pelado com mais de 12 mutações (A); Camundongo Nude: ausência de linfócito T e resposta imune (B); Rato Zucker: obeso e diabético tipo II (C). Fonte: PESQUERO; BAPTISTA , 2002. PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS 17/09/2020 14 17/09/2020 15 17/09/2020 16 17/09/2020 17 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Cães (Canis familiaris) PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Hamster chinês (Cricetulus griseus) 17/09/2020 18 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Hamster sírio (Mesocricetus auratus) PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Macaco Rhesus (Macaca mulatta) 17/09/2020 19 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Cobaia ou porquinho-da-Índia (Cavia porcellus) COBAIAS 17/09/2020 20 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Coelho (Oryctolagus cunicullus) COELHOS 17/09/2020 21 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Camundongos (Mus musculus)/linhagem* UFMS, 2020 CAMUNDONGOS 17/09/2020 22 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Rato (Rattus norvegicus) 17/09/2020 23 RATOS 17/09/2020 24 PRINCIPAIS ESPÉCIES UTILIZADAS • Zebrafish (Danio rerio) DÚVIDAS???
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