POP 14 - Determinao da Hemoglobina - Reagente de Drabkin

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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO 
Número : 
LAB - POP- 14 
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: 
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios 
 
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI 
 
DATA: 16/06/2017 
Revisão: 
00 
 
 
1 
 
1. AULA PRÁTICA 
 
• Determinação da Cianometahemoglobina 
 
2. OBJETIVO: 
 
• Método de referência para a determinação da Hemoglobina. Teste colorimétrico, somente 
para uso diagnóstico "in vitro". 
 
3. DISCIPLINA: 
 
• Hematologia Clínica 
 
4. MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO 
 
4.1. Amostra 
 
• Plasma obtido livre de hemólise, estável 07 dias entre 2 e 8°C. 
 
4.2. Materiais Utilizados 
 
QUANTIDADE DESCRIÇÃO DA VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS 
5 • Tubo de ensaio para coleta (Citrato) 
5 • Seringas com agulha (5 mL) 
1 • Garrote para coleta 
1 • Algodão (pacote) 
5 pares • Luvas 
5 • Bandagem de Proteção pós Coleta 
1 • Centrífuga para separação do soro 
1 • Pipeta de 1000µL 
1 • Pipeta de 20µL 
10 • Ponteiras para pipetas de 1000µL 
10 • Ponteiras para pipetas de 20µL 
1 • Estante para tubos de Ensaio 
1 • Cronômetro 
15 • Tubos de Ensaio 
 
QUANTIDADE REAGENTES/INSUMOS 
1 • Frasco de Álcool 70% 
1 • Solução de Drabkin 
1 • Kit Padrão de Hemoglobina 
 
 
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO 
Número : 
LAB - POP- 14 
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: 
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios 
 
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI 
 
DATA: 16/06/2017 
Revisão: 
00 
 
 
2 
 
1 • Reagente Citrato 
 
OBS: A quantidade material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A quantidade de 
grupos, por aula, deve ser definida pelo professor no momento do agendamento da aula prática. Sugerido 
03 - 06 alunos por grupo. 
 
4.3. Procedimento Técnico 
 
• Colher 5 mL de sangue por punção venosa; 
• Pipetar 5 mL do líquido diluidor de Drabkin em um tubo de ensaio; 
• Pipetar 0,02 mL de sangue total e transferir para o tubo contendo o líquido diluidor; 
• Homogeneizar e aguardar por cerca de 10 minutos; 
• Preparar um tubo BRANCO apenas contendo o líquido diluidor e um tubo PADRÃO com 
5 mL do líquido diluidor mais 0,02mL do Padrão de Hemoglobina. 
• Homogeneizar e aguardar 5 minutos à temperatura ambiente, fazer a leitura a 540 nm. 
 
• Cálculos 
 
Hemoglobina (g/dL) = 
 
 
4.4. Valores de Referência 
 
• Homens: 13,5 - 18g/dL 
• Mulheres: 12,0 - 16,0g/dL 
• RN: 13,5 - 19,5g/dL 
 
5. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO/ PARAMENTOS 
 
• Luva de Procedimento 
• Jaleco 
• Calçado fechado 
 
6. REFERÊNCIAS 
 
• CARVALHO, William de Freitas. Técnicas Médicas de Hematologia e Imuno-
Hematologia. 8ª Edição, Belo Horizonte: Coopmed Editora, 2008. 
 
• MOURA, Roberto de Almeita, et al. Técnicas de Labortório. 3ª Edição, São Paulo: Editora 
Atheneu, 2008. 
 
Abs. Teste x 10 
Abs. do Padrão 
 
 
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PRÁTICO 
Número : 
LAB - POP- 14 
CURSO: BIOMEDICINA Aprovação: 
DISCIPLINA: HEMATOLOGIA CLÍNICA Coordenação de Laboratórios 
 
ELABORADO POR: LEANDRO DOBRACHINSKI 
 
DATA: 16/06/2017 
Revisão: 
00 
 
 
3 
 
7. OBSERVAÇÕES