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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 02: Bioquímica Clínica NOME: SONALIA DINIZ VIANA MATRÍCULA: 01327199 CURSO: FARMACIA POLO: CAMPINA GRANDE-PB PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): JHONATTA ALEXANDRE BRITO DIAS TEMA DE AULA: DOSAGEM BIOQUÍMICA EM SORO ATENÇÃO: Realizado Dosagem Bioquímica de Ureia e Creatinina, Descrito em Relatório. Conforme aula prática em 15/ 05/ 2003. Ureia Protocolo - Dosagem de Ureia (Marcadores Renais) Objetivo do teste: Realizar a dosagem de ureia em fluidos biológicos (soro). Importância clínica: A ureia é o produto final do metabolismo das proteínas no homem, sendo formada pela conversão da amônia em ureia no fígado. QTD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS QTD REAGENTES E SOLUÇÕES 03 Tubos de ensaio (para cada dosagem 300 ml Álcool 70% 300 ml Água destilada QTD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO QTD EQUIPAMENTOS POR GRUPO 03 Tubo de coleta seco Banho maria à 37°C 01 Algodão Fotômetro 03 Blood stop Pipeta 01 Seringa + Agulha Cronômetro 01 Kit de dosagem bioquímica ATENÇÃO: Esse PAP foi baseado nos kits da LABTEST. É recomendado a verificação da marcada e do encarte disponibilizado pelo fabricante, devido as alterações que podem ocorrer quanto a diferentes metodologias ou uso dos reagentes. Verificar a preparação dos reagentes antes do teste. 1. Coletar por punção venosa 5 ml de sangue em tubo seco; 2. Centrifugar para a obtenção do soro; 3. Utilizar três cubetas do fotômetro para o branco, teste e padrão; 4. Nomear um tubo como “teste” ou “padrão”; 5. Adicionar 1ml do reagente de trabalho (solução do reagente 1 + reagente 2); 6. Adicionar 1 μL da amostra; 7. Misturar e ler em fotômetro em 340nm ➔ Ao; 8. Ler posteriormente em 30 segundos (A30) e 30 segundos (A90); 9. Utilizar a diferença entre as absorbâncias de A30. A90 para o valor final da absorbância; 10. Repetir o mesmo para ter o valor do padrão (não é recomendado realizar as duas medições ao mesmo tempo, devido ao curto tempo de espera); 11. Cálculo: Ureia (mg/dL ) = Absorbância teste ----------------------------- x 70 Absorbância padrão Técnica: Procedimentos: para dosagem no soro 1. Ajustar o comprimento de onda do espectrofotômetro para 520 nm (filtro verde 490-530 nm); Obs.: Etapa realizada pelo professor antes do início da aula e que deverá ser conferida pelo aluno no momento da leitura. 2. Conferir se ocorreu a retração do coágulo no tubo utilizado para coleta (tubo seco); 3. Centrifugar por 5-10 min a 3500 rpm; 4. Durante a centrifugação, identificar 3 tubos de ensaio limpos e secos como B (branco), P (padrão) e T (teste); 5. Após a centrifugação, observar a separação do coágulo e do soro; 6. Realizar as reações de acordo com as quantidades indicadas; 7.Homogeneizar os reagentes batendo suavemente com as mãos nos tubos; 8. Incubar em banho -maria por 5 min a 37ºC; 9. Deixar as amostras a TA (temperatura ambiente) até o momento da leitura; No equipamento: 10. Conferir o comprimento de onda ajustado previamente pelo professor; 11. Utilizar o tubo branco para zerar/tarar o equipamento; 12. Ler e anotar a absorbância dos tubos padrão e teste; 13. Efetuar os cálculos descritos a seguir; 14. Fazer a interpretação dos resultados obtidos; 15. Fazer o relatório. Cálculos conforme coletas realizadas na aula prática: Ureia (mg/dL ) = Absorbância teste ----------- ------------------ x 70 = 0,93 + 0,98+ 0,92 x 70= 70,7mg/dl Absorbância padrão ------------------------ 0,93 CREATININA 1. Coletar por punção venosa 5ml de sangue em tubo seco; 2. Centrifugar para obtenção do soro; 3. Nomear os três tubos como: branco, teste e padrão; 4. Proceder a pipetagem como no quadro abaixo: Branco Teste Padrão Tampão n°2 2 mL 2 mL 2 mL Amostra (soro) ------------- 250 μL ---------- Água deionizada ou destilada 250 μL ----------- ---------- Padrão n°3 ------------- ----------- 250 μL Ácido Pícrito n°1 500 μL 500 μL 5. Misturar e incubar em banho-maria a 37°C por 10 min; 6. Ler em fotômetro em 510nm ➔ A1; 7. Preparar três novos tubos, nomeados A2, seguindo o quadro abaixo: Branco Teste Padrão Acidificante n°4 100 μL 100 μL 100 μL 8. Cálculo: Creatinina (não corrigida) = A1 - A2 x 4,00 md/dL Absorbância do padrão Creatinina corrigida = Creatina - índice de correção (0,25 mg/ dL) 1º Tubo – B = 0,73 2º Tubo – T = 0,92 3º Tubo – P = 0,20 Resultados obtidos a partir de testes na aula prática: A2 1º Tubo – B = 0,14 2º Tubo – T = 0,13 3º Tubo – P = 0,17 Creatinina (não corrigida) = A1(0,73) - A2 (0,14) x 4,00 =2,56-0,25 = 2,31 md/dL Absorbância do padrão(0,92) Conclusão e avaliação do resultado clínico. Creatinina e ureia são duas substâncias presentes na corrente sanguínea, que podem ser dosadas através de exames de sangue quando se pretende fazer uma avaliação da função dos rins. Os valores normais de referência para os níveis de creatinina no sangue podem variar de acordo com o laboratório, mas normalmente são: · Mulheres: entre 0,5 a 1,1 mg/dL; · Homens: entre 0,6 a 1,2 mg/dL. Quando os valores de creatinina no sangue estão acima do normal podem indicar uma lesão nos vasos sanguíneos dos rins, uma infecção renal ou redução do fluxo de sangue para os rins. Elevações nos níveis sanguíneos de ureia são um sinal de mau funcionamento dos rins. Geralmente dosamos ambas as substâncias para avaliar a função dos rins, mas a creatinina é mais específica e confiável. De acordo com o resultado obtido do paciente com referência de creatinina foi de 2,31 md/dL e a uréia 70,7 ambos apresentando alterações, devendo o mesmo levar os resultados para um médico especialista. Os valores do exame de ureia podem variar de acordo com o laboratório e técnica utilizada para a dosagem, no entanto os valores de referência normalmente considerados são: · Para crianças até 1 ano: entre 9 e 40 mg/ dL; · Para crianças acima de 1 ano: entre 11 e 38 mg/ dL; · Para adultos: entre 13 e 43 mg/ dL. FOTOS REFERENTES A AULA PRÁTICA REFERENTE AO DIA 15/05/2021 TRANSFERENCIA DA AMOSTRA DE SORO PARA OS TUBOS CENTRÍFUGA BANHO MARIA MATERIAL PARA LEVAR PARA FOTÔMETRO FOTÔMETRO REFERÊNCIAS: Disponível em:< https://www.tuasaude.com/exame-de-ureia/ > Acesso em: 26 de maio de 2021. Disponível em:<https://www.tuasaude.com/creatinina/> Acesso em: 26 de maio de 2021. AULA PRÁTICA DE ACORDO COM AS ORIENTAÇÕES DO PROFESSOR: JHONATTA ALEXANDRE BRITO DIAS
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