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1 FACULDADE ESTÁCIO – CAMPUS ALAGOINHAS GRADUAÇÃO EM MEDICINA - PRIMEIRO PERÍODO DISCIPLINA DE BASES MOLECULARES RELATÓRIO DAS PRÁTICAS: EFEITO DO PH E DA TEMPERATURA NA ATIVIDADE ENZIMÁTICA DOCENTES: PROFESSORA DAYANA CORREIA, PROFESSORA JÉSSICA VASCONCELOS E PROFESSOR IGOR FRAGA. GABRIELA PEREIRA REZENDE ALAGOINHAS, 24 DE NOVEMBRO DE 2020. 2 GABRIELA PEREIRA REZENDE RELATÓRIO DAS PRÁTICAS: EFEITO DO PH E DA TEMPERATURA NA ATIVIDADE ENZIMÁTICA Relatório da aula prática do dia 17/11/2020, com professor Igor Fraga, na faculdade Estácio De Sá em Alagoinhas, disciplina de Bases Moleculares, visando apresentar o efeito do pH e da temperatura na atividade enzimática. ALAGOINHAS, 24 DE NOVEMBRO DE 2020. 3 SUMÁRIO 1.0 INTRODUÇÃO...................................................................................................04 2.0 OBJETIVOS........................................................................................................05 2.1 GERAL....................................................................................................05 2.2 ESPECÍFICO...........................................................................................05 3.0 METODOLOGIA................................................................................................05 3.1 MATERIAIS............................................................................................05 3.2 MÉTODOS..............................................................................................05 4.0 RESULTADOS...................................................................................................08 5.0 DISCUSSÕES.....................................................................................................09 6.0 CONCLUSÃO.....................................................................................................10 7.0 REFERÊNCIAS...................................................................................................10 4 1.0 INTRODUÇÃO Na aula laboratorial de ph e temperatura enzimática é necessário o acesso ao fígado, para realização das práticas. Enzimas são classes de proteínas que catalisam as reações metabólicas no organismo. Ou seja, aumentam a velocidade em que uma determinada reação ocorre, de modo que o produto dessa reação seja formado em menos tempo. A função enzimática está totalmente relacionada com sua estrutura. A conformação da enzima precisa ser precisa para que o reagente da reação (aqui chamado de substrato) consiga se ligar na região chamada de sítio ativo ou centro ativo. Algumas enzimas precisam ser ativadas por outras moléculas, chamadas de cofatores quando são íons inorgânicos e de coenzimas quando são moléculas orgânicas, como as vitaminas. Uma vez ligados, o complexo enzima + substrato reage para a formação do(s) produto(s), com a enzima acelerando essa reação. As enzimas humanas podem operam em pH neutro (7), embora existam proteínas operando em pH ácido (enzimas que operam no estômago, em pHs próximos de 2) ou em pH básico (enzimas operando no Duodeno, com pH próximo de 9 ou 10). pH ótimo é o pH em que a atividade enzimática é máxima. O aumento de temperatura promove maior agitação entre átomos e moléculas, isso não é diferente com as enzimas. Temperaturas muito baixas dificultam a movimentação e interação das moléculas, assim como temperaturas elevadas que podem quebrar ligações mais fracas, fazendo com que a enzima, que é uma proteína, perca suas estruturas quaternária, terciária e secundária. . https://querobolsa.com.br/enem/biologia/estomago 5 2.0 OBJETIVOS 2.1 GERAL O objetivo principal do trabalho é observar a diferença dos três béqueres após a adição da água oxigenada para entender na prática o processo do pH e da temperatura na ação enzimática. 2.2 ESPECÍFICO ✓ Aprender utilizar todos os materiais. ✓ Saber os passos a passo da ação. ✓ Observar a ação em cada fígado. ✓ Relacionar a teoria com a prática. ✓ Entender a importância da ação enzimática. ✓ Entender a função de cada material utilizado. 3.0 METODOLOGIA 3.1 MATERIAIS ➢ Água Oxigenada volume 10. ➢ Três béqueres. ➢ Dois pedaços de fígados crus. ➢ Um pedaço de fígado cozido. ➢ Pipeta. ➢ Um béquer grande com HCl. 3.2 MÉTODOS O método do trabalho no pH e na temperatura na atividade enzimática foi separada em etapas, na qual representa todo o caminho percorrido para obter um resultado: 6 BÉQUER 1: - Primeiro passo: Coloque o fígado cru e adiciona água oxigenada. BÉQUER 2 -Primeiro passo: Coloque o fígado cozido e adiciona água oxigenada. 7 BÉQUER 3 -Primeiro passo: Coloque o fígado cru e adiciona HCl. -Segundo passo: Jogue o HCl fora e coloque a água oxigenada. 8 -Terceiro passo: Na visualização do béquer, encontra-se bolhas (oxigênio). 4.0 RESULTADOS Ao observar o resultado das etapas, percebe-se que: Primeiro Béquer – O fígado cru ao adicionar água oxigenada, começou a borbulhar e criou espuma, na qual essas bolhas seria o oxigênio. A enzima não é 9 consumida durante a catalase e quando se adiciona mais água oxigenada o processo continua. Segundo Béquer – O fígado quando está cozido, no momento da adição de água oxigenada, não ocorre nada, nenhum efeito. Terceiro Béquer – O fígado cru durante a adição do HCl percebe-se visivelmente que ele deu uma leve ‘cozinhada’ na sua camada de fora, mas após jogar fora o HCl e adicionar a água oxigenada ainda assim é possível notar as bolhas de oxigênio. 5.0 DISCUSSÕES Ao analisar o livro Princípios de Bioquímica de Lehninger e a obtenção de resultados, percebe-se que: ➢ As vezes por conta da quantidade de produto que é colocado na solução, dificulta a visualização das bolhas de oxigênio e normalmente elas se concentram embaixo, regiões onde não foi atingida pelo HCL. ➢ pH- Catalase. ➢ Temperatura- Ponto de saturação. 10 6.0 CONCLUSÃO Conclui-se que o efeito do pH e temperatura na atividade enzimática que interfere no grau de ionização da proteína pode ocorrer desnaturação. A temperatura é um agente desnaturante que trabalha no rompimento das pontes de sulfeto, ocorrendo a quebra de ligações. O HCl em contato não garante que todo filtro de peroxido se encontra na enzima, a parte na qual não teve acesso ao ácido, aparecem as bolhas, ou seja, libera o oxigênio, isso que ocorre no béquer 3. O fígado quando está cozido, não apresenta liberação de oxigênio, por isso, não apresenta bolhas. 7.0 REFERÊNCIAS - Nelson, David L.; Cox, Michael M. Princípios de Bioquímica de Lehninger - 6ª Ed. 2014. Editora Artmed.https://www.todamateria.com.br/dna/
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