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Controle de crescimento microbiano e métodos de desinfecção Professor: Gustavo Holanda Disciplina: Microbiologia e Imunologia Esterilização •É a remoção ou destruição de todas as formas de vida microbiana. •Agentes utilizados em processos de esterilização são denominados esterilizantes. Esterilização •Nomes dos tratamentos que causam a morte direta dos micro-organismos possuem o sufixo –cida. • Biocida • Germicida • Fungicida • Viricida • Inibem o crescimento e a multiplicação de bactérias. • sufixo -stático ou –stase • Bacteriostase • Sepse - do termo grego para estragado ou podre • Asséptico significa que um objeto ou área está livre de patógenos. Taxa de morte •Quanto mais micro-organismos existem mais tempo é necessário para eliminar a população. •Micro-organismos em biofilmes sobre superfícies são mais difíceis de serem atingidos com eficiência pelos biocidas – Melhor em condições de calor. •Gorduras e proteínas são protetoras do microrganismo. •Os antimicrobianos químicos requerem exposição prolongada. Ações dos agentes de controle •Ataque a membrana plasmática • Danos aos lipídeos ou proteínas. • Extravasamento do conteúdo celular no meio circundante e interferem no crescimento da célula. •Danos a proteínas e aos ácidos nucléicos. • Rompimento das pontes de hidrogênio por calor. • Rompimento das ligações covalentes por calor ou substâncias químicas. • Danos ao DNA e ao RNA são mortais para o organismo. Métodos Físicos •Temperatura • Ponto de morte térmica (PMT) - é a menor temperatura em que todos os microrganismos em uma suspensão líquida serão mortos em 10 minutos. • Tempo de morte térmica (TMT) - o tempo mínimo em que todas as bactérias em uma cultura líquida serão mortas, em uma dada temperatura. • Tempo de redução decimal (TRD) - é o tempo, em minutos, em que 90% de uma população de bactérias em uma dada temperatura serão mortas. •Esterilização por calor úmido • Fervura ou vapor. • Mata a maioria dos patógenos. • Vapor tem que entrar em contato com toda a superfície sólida. •Esterilização por calor seco • Chama direta do fogo e Incineração • Ar quente Métodos Físicos •Esterilização por calor úmido •Autoclave • Como se fosse uma panela de pressão maior. Métodos Físicos - Pasteurização •Pasteurização lenta (LTLT). • baixa temperatura longo tempo • 63˚C por 30 min •Pasteurização rápida (HTST). • alta temperatura e curto tempo • 72˚C por 15 seg •Pasteurização muito rápida (UHT). • temperaturas ultra altas • 130˚C a 150˚C por 3 a 5 seg •Em seguida deve ser rapidamente resfriado. •O aquecimento é menos eficiente em alimentos mais viscosos. •Teste da fosfatase - Se o leite sofreu pasteurização, a fosfatase foi inativada. Métodos Físicos •0°C a 7°C - a taxa metabólica da maioria dos micro-organismos é reduzida que eles não podem se reproduzir ou sintetizar toxinas. •O congelamento lento é mais nocivo às bactérias • Cristais de gelo - rompem a estrutura celular e molecular bacteriana. • Alguns microrganismos necessitam de vários dias congelados para morrer. •Alta pressão • Desnatura proteínas e evita o crescimento do microrganismo. •Dessecação • Liofilização - Secagem seguida de congelamento (utiliza compostos do leite). •Pressão osmótica • Utilização de sal para tornar o meio externo hipertônico, saindo água do microrganismo. Métodos Físicos •Radiação ionizante • Raios gama, raios X ou feixes de elétrons de alta energia. • Ionização da água que forma radicais hidroxila altamente reativos que reagem com os componentes orgânicos celulares, especialmente o DNA. •Radiação não ionizante • Luz ultravioleta (UV). • Causa danos ao DNA Métodos Químicos •Não existe um desinfetante apropriado que mate tudo. • Sempre ler o rotulo para saber contra quais microrganismos utilizar. •Considerar a diluição, pH e a natureza do material que será desinfetado. Métodos Químicos • Fenol (ácido carbólico) e compostos fenólicos • Irrita a pele e possui um odor desagradável. • concentrações acima de 1% (como em alguns sprays para a garganta), tem um efeito antibacteriano significativo. • Os compostos fenólicos exercem atividade antimicrobiana lesando as membranas plasmáticas lipídicas (sabão, detergente). •Bifenóis • Ingrediente da loção pHisoHex (hexaclorofeno) - usada em procedimentos de controle microb iano cirúrgico e hospitalar. • Triclosano – Sabão bactericida e pasta de dente. •Biguanidas • Clorexidina – Destrói a membrana celular. • Composto presente também em sabão e detergentes. Métodos Químicos •Halógenos • Iodo (povidona) - Impede a síntese de algumas proteínas e causa alterações nas membranas celulares microbianas, formação de complexos com aminoácidos e ácidos graxos. • Cloro - ácido hipocloroso (HOCl) que se forma quando o cloro é adicionado à água. Forte agente oxidante que impede o funcionamento de boa parte do sistema enzimático celular. • Hipoclorito de sódio (NaOCl) - desinfetante doméstico e alvejante. • Dióxido de cloro – utilizado na indústria alimentícia. • Cloraminas (Cloro + Amônia) – Utilizado na água de consumo e nos esgotos. •Alcoóis • Matam efetivamente as bactérias e os fungos, mas não os endosporos e os vírus não envelopados. • Desnaturação de proteínas, rompimento de membranas e dissolvimento de lipídeos. • 60% a 95%. Métodos Químicos •Metais pesados • Prata, o mercúrio e o cobre. • Íons rápidos destroem a membrana celular. • Nitrato de prata (1%) • Embalagens com prata • Sulfadiazina de prata – Utilizada em queimaduras • Cloreto de mercúrio – Bacteriostático, porém tóxico. • Sulfato de cobre – Limpeza de tanques e piscinas. • Cloreto de zinco – Bochecho. Métodos Químicos – Agentes de Superficie • Sabões e detergentes • Pouco valor como antisséptico • Remoção mecânica dos micro-organismos pela esfregação. • Emulsificação - Rompe o filme oleoso em gotículas pequenas. • Sanitizantes ácido-aniônicos • Porção carregada de ânions que reagem com a membrana plasmática. •Compostos quaternários de amônio (quats). • Detergentes catiônicos. • Afeta a membrana plasmática. • Bactericidas fortes contra as bactérias gram-positivas. • Fungicidas, amebicidas e viricidas (envelopados). Métodos Químicos •Conservantes químicos de alimentos. • Retardar deterioração do alimento. • Ácidos orgânicos considerados seguros em alimentos. • Dióxido de enxofre, ácido sórbico, sorbato de potássio e o benzoato de sódio – Impedem o crescimento de bolores. • Interfere no metabolismo fúngico e modifica a membrana plasmática. • Nitrato de sódio e o nitrito de sódio - adicionados a muitos produtos derivados de carne. Formação de substância cancerígena Nitrosamina. •Antibióticos • Nisina – Adicionada ao queijo. • Natamicina – antifúngico. •Esterilizantes gasosos • Óxido de etileno – Nitrogênio + dióxido de carbono, mata tudo, porém possui risco de explosão. • Propiolactona – Mais forte, porém mais tóxico. •Aldeídos • Antimicrobianos mais efetivos. • Formaldeído (formalina) e glutaraldeído - inativam proteínas formando ligações cruzadas covalentes com vários grupos funcionais orgânicos nas proteínas. • Conservar amostras biológicas e desinfetar instrumentos hospitalares e de laboratório. •Ácidos inorgânicos e Orgânicos • Ácido bórico – Muitos casos de intoxicação. • Ácido acético, ácido láctico, ácido benzoico, ácido sórbico, ácido cítrico – Preservação de alimentos. • Ácidos graxos – antifúngico •Agentes oxidantes • Liberação de oxigênio extremamente reativo – modifica o sistema enzimático. • Água oxigenada (3%) – Lavagem de feridas e mucosas • Ozônio – Utilizado em água pra consumo. Métodos Químicos Características do controle
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