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Larissa Cristina de Oliveira Ra: 004201703662 ATIVIDADE SUBSTITUTIVA – PRÁTICA CROMATOGRAFIA Após assistir a video-aula da prática realizada, responder às questões abaixo e postar aqui na sala virtual 1) O extrato de espinafre pode ser separado em frações, compostas das moléculas abaixo: a) Sabendo que as frações foram obtidas após separação em coluna aberta, contendo sílica como fase estacionária e hexano:acetona (8:2) como fase móvel, determine a ordem de eluição das moléculas mostradas acima, de acordo com a polaridade. Veja a foto a seguir das frações obtidas experimentalmente. Resp: 1ª banda (Beta-caroteno): de cor amarela (Apolar) Obteve mais afinidade pelos solventes usados que foram o Hexano e Cetona correndo na frente. Os compostos Apolares passam pela coluna com mais facilidade. 2ª banda (Clorofila): de cor verde (Polar/Apolar) Obteve menos afinidade pelos solventes, e mais afinidade pela sílica que é Polar, demorando mais para correr. 3ª banda (Xantofila): de cor verde (Polar) Obteve menos afinidade pelos solventes do que a banda 2, e mais afinidade pela sílica que é Polar, demorando mais que as duas bandas para corre pela característica de suas moléculas. Ocorreu uma forte interação com a Fase Estacionaria que é Polar. b) Sabendo que a placa utilizada era de sílica e com base na polaridade das moléculas, determine qual das moléculas acima corresponde à fração 1, 2 e 3 respectivamente. Justifique sua resposta. As frações de 1 à 3 mostradas na placa abaixo contém as frações de A à C. Resp: A placa contendo sílica é a Fase Estacionaria sua polaridade é POLAR. E a Fase Móvel sua polaridade é APOLAR, os corantes que tem mais afinidade pela FE vai ficar retidos e os que não tem serão arrastados pela FM, ou seja quanto maior a interação do corante com cada fase, mais rápido ou mais lento será a eluição. Frações: 1- Betacaroteno (A) Sua polaridade é Apolar, sendo assim esta fração é representada pela cor amarela que tem mais afinidade pela Fase Móvel (solventes usados). Essas Moléculas vão sair primeiros pela interação com o solvente que é Hexano e Cetona por eles serem Apolares. 2- Clorofilas tipo A e tipo B (C) Sua polaridade é Apolar/Polar; As moléculas menos polar vai sair primeiro pela interação com o solvente (HEXANO e CETONA), pois eles são apolares 3- Xantofila (B) Sua polaridade é Polar, sendo assim este fração representada pela cor verde que tem mais afinidade pela Fase Estacionaria que é a sílica Polar, ficando assim retido na placa. c) Sabendo que a mancha representada na placa com a letra B é um padrão de -caroteno, em quais frações da placa acima este composto pode ser observado? Resp: Este composto é observado na Fração 1, por ter o mesmo perfil do Betacaroteno. 2) Complete as sentenças abaixo: Fase Normal FE: Polar SOLVENTE FORTE: Polar AUMENTAR TR: Usar em FM Orgânica Fase Reversa FE: Apolar SOLVENTE FORTE: Orgânico AUMENTAR TR: Usar em FM Polar
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