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Sophya de Almeida – S2 - MICROBIOLOGIA – 20/09/2019 MICROBIOLOGIA – 20/09/2019 METABOLISMO E CRESCIMENTO MICROBIANO METABOLISMO • Processo de síntese e degradação de nutrientes, base da vida, permite crescimento, reprodução, manutenção de estrutura e resposta ao meio. • Termo usado para referir a soma de todas as reações químicas dentro de um organismo vivo. • É visto como ato de balanceamento de energia, uma vez que reações químicas liberam ou requerem energia. • Divide-se em duas classes de reações químicas: catabólicas e anabólicas. CATABOLISMO • Quebra de compostos orgânicos complexos em compostos mais simples. • Reações catabólicas ou degradativas são reguladas por enzimas, e normalmente liberam energia. • Normalmente acontecem por hidrólise (reações que usam a água e nas quais ligações químicas são quebradas) e são exergônicas (produzem mais energia do que consomem). • Ex.: quando células quebram açucares em dióxido de carbono e água. ANABOLISMO • Construção de moléculas orgânicas complexas a partir de moléculas mais simples. • Reações anabólicas ou biossintéticas são reguladas por enzimas, e normalmente requerem energia. • Envolvem reações de síntese de desidratação (reações que liberam água) e são endergônicas (consomem mais energia do que produzem). • Essas reações geram os materiais para crescimento celular. • Ex.: formação de proteínas a partir de aminoácidos. REAÇÕES CATABOLISMO DE CARBOIDRATOS • Maioria dos microrganismos oxida carboidratos como sua fonte primaria de energia celular. • Glicose: fonte mais comum de energia de carboidratos utilizada pelas células. • Para produzir energia a partir de glicose, os microrganismos utilizam dois processos: respiração celular (glicose completamente quebrada) e fermentação (glicose parcialmente quebrada) (ambas iniciadas por glicólise). anabolismo catabolismo Sophya de Almeida – S2 - MICROBIOLOGIA – 20/09/2019 RESPIRAÇÃO CELULAR • Processo bioquímico celular. Quebra as ligações entre as moléculas, o que libera energia. • Aeróbica: utiliza oxigênio. • Anaeróbica: não utiliza oxigênio e ainda pode ser morto por ele. Respiração aeróbica: 𝐶6𝐻12𝑂6 + 6𝐻2𝑂 + 6𝑂2 → 6𝐶𝑂2 + 6𝐻2𝑂 + 𝑒𝑛𝑒𝑟𝑔𝑖𝑎 Glicose + água + oxigênio > gás carbônico + água (sai 38 ATP de energia). Respiração anaeróbica: • O rendimento de ATP sempre é menor porque apenas uma parte do ciclo de Krebs funciona. • Desta forma, os anaeróbicos tendem a crescer mais lentamente que os anaeróbicos. 𝐶6𝐻12𝑂6 + 4𝑁𝑂2 → 2𝐶𝑂2 + 6𝐻2𝑂 + 2𝑁2 + 𝑒𝑛𝑒𝑟𝑔𝑖𝑎 Glicose + nitrato > gás carbônico + energia. Fermentação: • Liberam energia de açúcares ou moléculas orgânicas através da oxidação. • Não requer oxigênio, mas algumas vezes pode ocorrer na presença deles. • Não requer uso de uma cadeia de transporte de elétrons ou ciclo de Krebs. • Utiliza uma molécula orgânica como aceptor final de elétrons. • Produz pequenas quantidades de ATP. FERMENTEÇÃO ÁCIDO LÁCTICO • Homolácticos ou homofermentativos. • Uma molécula de glicose é oxidada em duas moléculas de ácido pirúvico e no final gera duas moléculas de ácido láctico. BIOFILME • Superfície. • População microbiana – estreptococos grupo mutans – S. mutans ou S. sobrinus. • Matriz de polissacarídeos. • Formação do biofilme dental cariogênico: CÁRIE • Desmineralização x remineralização do dente. MATRIZ DE POLISSACARÍDEOS • Propriedades viscoelásticas • Enzimas glicosiltransferase. matriz sacar ose strepto coccus mutans enzimas glicosiltra nsferase glicanos issolúve is Sophya de Almeida – S2 - MICROBIOLOGIA – 20/09/2019 • Papel na adesão e co-agregação de outras bactérias. ENZIMAS • São proteínas envolvidas em quase todas as reações químicas biologicamente importantes. • A via metabólica da célula é determinada pelas enzimas que por sua vez são determinadas pelas características genéticas da célula. ENZIMAS E REAÇÕES QUÍMICAS • As enzimas servem de catalisadores (substâncias que apressam uma reação química sem que seja permanentemente alterada) biológicos. • Como catalisadores, as enzimas são especificas, atuando em uma substância específica, chamada substrato de enzimas ou substratos (quando há dois ou mais reagentes). • Ex.: sacarose é o substrato da enzima sacarase, que catalisa a hidrólise da sacarose à glicose e à frutose. • Substrato entra em contato som sítio ativo da enzima (forma complexo enzima-substrato). • A molécula do substrato é transformada pelo rearranjo dos átomos, pela quebra da molécula do substrato ou em combinação com uma outra molécula de substrato. • As moléculas de substrato transformadas são liberadas. • A enzima não carregada fica livre para nova reação. MECANISMOS DE AÇÃO ENZIMÁTICA FATORES QUE INFLUENCIAM A ATIVIDADE ENZIMÁTICA • Temperatura: velocidade aumenta com o aumento da temperatura (porém, existe o limite, acima disso ocorre desnaturação). • PH: o PH e que a atividade enzimática é máxima é conhecido como PH ótimo. • Concentração do substrato. • Inibidores: (competitivos – ocupam o sítio ativo do substrato; não competitivo – se ligam a outra região da enzima, o sítio alostérico, inibindo assim, o sitio ativo.) CRESCIMENTO MICROBIANO • Crescimento de uma população é o aumento do número de células. • Fatores necessários para o crescimento microbiano são divididos em duas categorias: • Físicos: temperatura, PH e pressão osmótica; • Químicos: fontes de carbono e nitrogênio, enxofre, fósforo, oligoelementos, oxigênio e fatores orgânicos de crescimento. MEIOS DE CULTURA • Material nutriente preparado no laboratório para crescimento microbiano; • Associação quantitativa e qualitativa de nutrientes. glica nos ade são agregaç ão das demais células Sophya de Almeida – S2 - MICROBIOLOGIA – 20/09/2019 • Existem vários tipos de meios de cultura para satisfazer as necessidades nutricionais de uma ampla diversidade dos microrganismos. • Inóculo: microrganismos são colocados em um meio de cultura para iniciar o crescimento. • Cultura: microrganismos que crescem e se multiplicam nos meios de cultura. • Classificação – finalidade bacteriológica: ricos, seletivos, diferencial. • Ricos: contém substâncias que permitem o crescimento de diversos microrganismos ao mesmo tempo. • Seletivos: contém substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos. São elaborados com o objetivo de favorecer o crescimento de bactérias de interesse. • Diferencial: contém substâncias que permitem estabelecer diferenças entre bactérias parecidas. • Classificação – estado físico: sólidos, semi-sólidos e líquidos, redutor, enriquecido. • Sólidos: contém agentes solidificantes. Agar (1-2%) é agente solidificante (polissacarídeo extraído de algas marinhas) utilizados nos meios de cultura. • Semi-sólidos: consistência intermediaria. Agar (0,5%). Verificação de mortalidade. • Líquidos: sem agentes solidificantes. Ativação cultural. • Redutor: contém reagentes capazes de reagir com oxigênio removendo-o. Ex.: tioglicolato de sódio. • Enriquecido: isolamento de bactérias presentes em pequeno número unto com outras que estão em grande quantidade. TEMPERATURA • Psicotrófilos: crescem em baixa temperatura. • Mesófilos: temperaturas moderadas. • Termófilos: altas temperaturas. • Hipertermófilos: temperaturas extremamente altas. PH • Maioria das bactérias crescem em PH dentro de pequenas variações, entre 6,5 e 7,5. • Bactérias acidófilas: alto grau de tolerância e acidez. • Neutrófilos. • Alcalófitos: PH alcalino. PRESSÃO OSMÓTICA • Depende da quantidade de água no meio e de substâncias dissolvidas – pressão. • Resistência a pressão devido à parece celular.• Plasmólise: perda de água por osmose, causando a diminuição (encolhimento) do citoplasma – meio hipertônico. • Organismos halofílicos toleram elevadas concentrações de sais. • Enzimas só trabalham em um meio aquoso. Desidratação mata. • Reações enzimáticas não acontecem – metabolismo para.
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