Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA)

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Tipos de Resistência
A avaliação do comportamento dos
microrganismos é feita in vitro
Teste de Sensib ilidade aos Antim icrobianos (TSA)
O TSA permite detectar quais
antimicrobianos são eficazes f rente a um
determinado microrganismo (e cepa)
Resistência Bacteriana aos
Antimicrobianos
Natural ou Adquirida (cromossômica e
plasmidial)
☼ Resistência Adaptativa ( justifica
diferença in vivo e in vitro)
☼ Destruição/inativação enzimática do
fármaco 
☼ Prevenção da entrada no sítio-alvo do
microrganismo
☼ Alterações no sítio-alvo do fármaco
☼ Efluxo rápido do antimicrobiano
☼ Biofilmes
Objetivos
Nortear escolha dos antimicrobianos
adequados e predizer chance de sucesso
de um esquema terapêutico
Metodologias
Qualitativa Quantitativa
Fitas de Gradiente (ETEST® - Biomériux) Automatizados
☼ Teste de Hodge Detecção de
Carbapenemases. Usar disco de
meropenem ou ertapenem; imipenem
não permite detecção de
carbapenemases (Nota Técnica ANVISA
01/2013)
☼ Detecção de Metalo-Beta-Lactamases O
EDTA quelante do zinco é um cofator para
reação de hidrólise do anel beta-lactâmico
*Bactéria pode apresentar vários
mecanismos de resistência
Leitura das Placas
Leitura do halo de inibição Régua ou paquímetro sobre fundo da
placa
Placas de MH com sangue Cuidado ao ler zona de inibição (e não
zona de hemólise)
✔ Amostras de Proteus spp. podem ter pequeno véu dentro do halo
de inibição. Este deve ser ignorado e leitura feita onde inicia
crescimento
♦ Colônias pequenas no halo de inibição devem ser verificadas
(clones ou contaminação) ♦
Fita de plástico inerte e transparente com 5,5 mm de
largura por 60 mm de comprimento
 Escala de CIM em μg/mL
 Gradiente exponencial do
antimicrobiano seco e estabilizado, com concentração
g/mL ou 0,002 a 32 μg/mL (depende do
Método combina princípios da difusão do disco e da
 Pode ser utilizado para leveduras e anaeróbios ♦
 Mesmos empregados pelo método
da diluição (BrCAST/EUCAST/CLSI)
Teste MIC Evaluator - Oxoid possui mesma configuração
 Os meios usados são os mesmos utilizados no disco-
difusão ♦
 As fitas devem ser armazenadas entre 8 a 20ºC
 Preparo do inóculo, inoculação e incubação das placas
seguem mesmas recomendações da técnica disco-difusão
 Máximo seis fitas
 Máximo uma fita
 A menor concentração do antimicrobiano fica no centro
da placa e deve-se pressionar levemente com a pinça toda
a extensão da fita ♦
 A fita não deve ser removida após colocada → difusão
Leitura das Placas
Cepas que apresentam
hidrólise Ler inibição do
crescimento e não zona de
hemólise
Colônias pequenas dentro dos
halos Verificar se são clones
resistentes ou contaminação
Amostras de Proteus spp.
Presença ocorrente de
pequeno véu dentro do halo
de inibição. Desconsiderar e
ler ponto em que crescimento
do microrganismo encontra
fita
Interpretar CIM de acordo com
critérios do BrCAST/CLSI
Oferecem CIM
aproximada →
Empregam apenas um
número determinado de
antimicrobianos com
algumas concentrações
p r e e s t a b e l e c i d a s
(semiquantitativo)
Vantagem Rapidez na
liberação dos resultados
(quatro a seis horas,
dependendo do
microrganismo testado)
Controle de Qualidade
Feito com cepas padrão de coleções Principais Causas de Erro do Teste de
Metodologia mais comum