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Exercícios aula passada: 5- O touro Juvenal e a vaca Estrela são naturalmente mochos. Mas, 1/4 das suas crias podem desenvolver chifres quando adultas. a) Considerando que essa característica seja governada por um único gene com dois alelos diferentes, qual deve ser o genótipo desse casal? Mocho: Cc Chifre: cc Parentais: Cc x Cc 3 : 1 ccCcCcCC Exercícios aula passada: b) Represente na figura a seguir como esse loco deve segregar na meiose destes animais: c) Que tipos de gametas e em quais proporções serão produzidos por Juvenal e Estrela para essa característica? - 4 tipos de gametas: C; C; c; c - 50% de chance de ser c e 50% de chance de ser C d) Explique o motivo da proporção de crias chifrudas e mochas encontrada na prole desse casal. cc Cromatides-irmãs:CC Cromatides –irmãs:cc cc c c C C Exercícios: 6- Juvenal e Estrela apresentam pelagem preta. Suas crias, independente do sexo, podem nascer com a pelagem preta ou vermelha, na proporção 3 pretas para 1 vermelha. Usando as mesmas regras utilizadas para explicar a herança da presença/ausência de chifres, procure explicar a herança da cor preta/vermelha nesses animais. Se é independente do sexo quer dizer que os cromossomos segregam de forma independente; e a proporção segue a primeira lei de mendel com indivíduos dominante para cor preta PP ou Pp e recessivo para cor vermelha pp. ESTRUTURA DO DNA E CROMOSSOMOS Profa. Dra. Ana Flávia Leal Specian Cronograma da aula: 1. Histórico da descoberta do DNA como mólecula de hereditariedade; 2. Composição dos ácidos nucléicos; 3. Estrutura do DNA e RNA; 4. Estrutura cromossômica.. Histórico da descoberta do DNA • Em 1868 o suiço Johann Friedrich Miescher isolou solou uma substância de elevado peso molecular – nucleína; O novo polímero era constituído por C, O, H, N e fósforo (ausente em proteínas); Descoberta da Nucleína Histórico da descoberta do DNA • Anos depois foi chamado de ácido desoxirribonucleico (DNA) porque ele foi isolado no núcleo da célula e apresenta caráter ácido; • Não era reconhecido como o material genético; Este papel pensava-se ser desempenhado pelas proteínas que, aparentemente, tinha maior potencial de variação de 20 aminoácidos ao invés de apenas quatro diferentes como as bases nitrogenadas dos nucleotídeos. DNA É O MEDIADOR DA TRANSFORMAÇÃO 1928 - Frederick Griffith Snustad e Simmons, cap. 9 (2017). Histórico da descoberta do DNA Estrutura e função do DNA • Antes de 1953 os cientistas não sabiam que os genes estavam nos cromossomos; - O que se sabia: Cromossomos = DNA + proteínas; • 1953 - James Watson e Francis Crick postularam o modelo da estrutura de dupla hélice, informação que desvendou o quebra cabeça; • Estrutura e a função dos genes podem ser compreendidas a nível molecular. Estrutura e função do DNA • Antes de 1953 os cientistas não sabiam que os genes estavam nos cromossomos; - O que se sabia: Cromossomos = DNA + proteínas; • 1953 - James Watson e Francis Crick postularam o modelo da estrutura de dupla hélice, informação que desvendou o quebra cabeça; • Estrutura e a função dos genes podem ser compreendidas a nível molecular. Estrutura do DNA – composição Análise química: - A quantidade de A é igual à de T (A = T) -A quantidade de C é igual à de G (C = G) Chargaff et al (1950): isolou DNA de diferentes espécies e analisou a sua composição: Com base nos dados obtidos estabeleceu a regra: Estrutura do DNA Difração por raio X: - Franklin e Wilkins (1951): Estrutura do DNA Difração por raio X: - Franklin e Wilkins (1951): Watson e Crick (1953): a partir destas pesquisas eles postularam a dupla-hélice. Composição do DNA: O DNA é um ácido núcleico composto de unidades repetidas, ligadas, chamadas nucleotídeos; - Cada nucleotídio tem um açúcar, um fosfato e uma base nitrogenada (A, T, G e C). Base nitrogenada (A, T, G ou C) Grupo Fosfato Pentose: desoxirribose Estrutura do DNA – composição: Snustad e Simmons, cap. 9 (2017). • Duas cadeias longas de nucleotídeos = 2 fitas • Cada fita é composto por polinucleotídeos que são constituídos por: um esqueleto de açucar-fostato, mantidas juntas por ligações covalentes (fosfodiester); Estrutura do DNA – composição Snustad e Simmons, cap. 9 (2017). Snustad e Simmons, cap. 9 (2017). Estrutura do DNA – composição Polinucleotídeos O esqueleto de DNA é invariável e consiste de moléculas de desoxirribose ligadas pelos grupos fosfatos Estrutura do DNA – composição Polinucleotídeos Estrutura do DNA – composição Polinucleotídeos Estrutura do DNA – composição Polinucleotídeos Estrutura do DNA – Dupla-hélice Snustad e Simmons, cap. 9 (2017). • As duas fitas são mantidas juntas por ligação de pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas (A, G, C, T) • Cada fita de DNA que compõe a dupla-hélice tem uma “direção” • Em uma extremidade, o átomo de carbono terminal no esqueleto é o átomo de carbono 5’ do açúcar terminal • Na outra extremidade, o átomo de carbono terminal é o the 3’ do açucar terminal • Em uma dupla hélice, as fitas são antiparalelas. Dupla-hélice - Mecanismo da hereditariedade: As seqüências de bases ao longo da cadeia carrega a informação genética. Estrutura do DNA – Dupla-hélice Alberts., cap. 4 (2017). Essa “polaridade oposta” dos filamentos complementares de uma dupla-hélice de DNA é importante na replicação, na transcrição e na recombinação do DNA. Estrutura do DNA – Dupla-hélice Alberts., cap. 4 (2017). Estrutura do DNA – Dupla-hélice Pares de bases: Estrutura do DNA – Dupla-hélice Pares de bases: Estrutura do DNA – Dupla-hélice Estrutura do DNA – Dupla-hélice Sulco maior Sulco menor Comformação da estrutura do DNA – Dupla-hélice B-DNA é a conformação adquirida pelo DNA em condições fisiológicas. Cada volta apresenta 10,4 nucleotídeos. Diferentes conformações Depende da sequência de bases e das condições nas quais está inserida: ➔ DNA-B Ambiente abundante em água Mais estável Alfa-hélice ➔ DNA-A Ambiente com pouca água Alfa-hélice Menor e mais larga ➔ DNA-Z Hélice com giro para esquerda Ambiente com muito sal C e G alternados sob condições fisiológicas 1. A molécula consiste de dois filamentos com bases transversais. Os filamentos se torcem um sobre o outro na forma de uma dupla hélice, de tal maneira que se assemelham a uma escada retorcida; 2. As pontes verticais da escada de DNA consistem de grupos fosfatos alternados com porções de desoxirribose dos nucleotídeos; 3. Os degraus da escada contêm bases nitrogenadas pareadas. A adenina sempre pareia com a timina e a citosina sempre pareia com a guanina. Atividade - complementaridade entre as bases nitrogenadas: Se timina compõe 15% das bases em uma certa fita de DNA, qual seria a percentagem de citosina neste mesmo DNA? timina = 15%, então adenina = 15% A + T = 30%, então G + C = 70% Assim, citosina é 1/2 of 70% = 35% Atividade - complementaridade entre as bases nitrogenadas: Um certo segmento de DNA tem a seguinte sequência de nucleotídeos em uma fita : 5’ ATTGGCTCT 3’ Qual seria a sequência da outra fita nas direções 3’ e 5’? 5’ ATTGGCTCT 3’ 3’ TAACCGAGA 5’ - Habilidade para transferir uma cópia fiel desta informação para as células filhas; - O esqueleto açucar-fosfato é muito estável ao ataque químico; - A ausência de –OH na posição 2 no açúcar faz o DNA muito resistente a condições alcalinas; - As bases altamente empilhadas excluem quase toda a água protegendo a informação dos compostos solúveis em água que poderiam reagir com os grupos carregados. Propriedades que fazem o DNA ideal para armazenar a informação genética: Replicação Transcrição Tradução Proteína Ácido Desoxirribonucleico Ácido Ribonucleico Fluxo da Informação Genética DNA X RNA: DNA X RNA: DNA X RNA: DNA RNA Estrutura do RNA: Composição química e estrutura do RNA: Composição química e estrutura do RNA: Conformação do DNA em cromossomo Estruturado DNA dentro do núcleo: Estrutura do DNA dentro do núcleo: DNA nuclear de eucariotos é empacotado em cromossomos individuais: DNA + proteínas Procariotos (organismos unicelulares sem núcleo) tem cromossomo único circular. Eucarioto (organismos com núcleo) tem um número específico de cromossomos por espécie. O material genético está na forma de cromatina: • Em células eucariontes, o DNA se complexa com proteínas específicas, constituindo a cromatina. Sua organização é dinâmica, pois se altera de acordo com a fase do ciclo celular e com o seu grau de atividade; • No núcleo interfásico (células que não estão em divisão), a cromatina se apresenta compactada e/ou descompactada. • A CROMATINA É A PORÇÃO DO NUCLEO QUE SE CORA E É VISIVEL AO MO núcleo Cromatina: • Formada pelos nucleossomos - unidade repetitiva da cromatina; • Nucleossomo: consegue compactar em até 7 vezes uma molécula de DNA Cada partícula do cerne nucleossômico individual consis- te em um complexo de oito proteínas histonas – duas moléculas de cada uma das histo- nas H2A, H2B, H3 e H4 – e a fita dupla de DNA, com 147 nucleotídeos de comprimento. . Na formação do nucle- ossomo, primeiro as histonas ligam-se umas às outras para formar os dímeros H3-H4 e H2A-H2B, e os dímeros H3-H4 combinam-se para formar tetrâmeros. Então, um tetrâ- mero H3-H4 se combina a dois dímeros H2A-H2B para formar o octâmero compacto do cerne, ao redor do qual o DNA é enrolado. - Cromossomo Eucariótico Nucleossomos: Alberts., cap. 4 (2017). Cromatina: • As histonas desempenham um papel estrutural importante na cromatina. Estão presentes na cromatina de todos os eucariotos em quantidade equivalente à quantidade de DNA. • Todos os vegetais e animais têm cinco tipos diferentes de histonas, chamados H1, H2a, H2b, H3 e H4. Essas proteínas são encontradas em quase todos os tipos de células. Regiões de empagotamento da cromatina: • Durante a interfase (fase estácionária da divisão celular e de intensa atividade metabólica) a cromatina aparente um colar de pérolas ou colar de contas. Estruturas da cromatina: • O Dna que compõe a cromatina é dividido em: Regiões de eucromatina e heterocromatina Cromatina: • Eucromatina: menos condensada (regiões codificantes); • Heterocromatina: mais condensada (regiões não codificantes). EucromatinaHeterocromatina Cromatina se condensa para formar o cromossomo: • Durante a divisão celular a cromatina deve passar por mais um nível de empacotamento para que sequencias de DNA não sejam perdidas durante a divisão; • Esse nível elevado de empacotamento da cromatina recebe o nome de CROMOSSOMO. Como ocorre este empacotamento? Pierce, 2016. Cromatina e cromossomos representam dois aspectos morfológicos da mesma estrutura: - Durante o estágio fisiológico da célula (INTERFASE) o DNA está na forma de cromatina para propiciar a atividade metabólica e replicação do DNA quando a celular for se dividir; - Durante a divisão celular o DNA está na forma de cromossomo, nível máximo de condensação para propiciar a divisão correta do material genético sem que ocorra perdas (HEREDITARIEDADE). Metafase Interfase Cromatina e cromossomos representam dois aspectos morfológicos da mesma estrutura: Interfase Cromatina Estrutura do DNA durante o ciclo celular: Cromatina Cromossomo Estrutura do DNA durante o ciclo celular Cromossomo CromatinaCromatina Cromossomos: • Condensação máxima do DNA durante a mitose • O genoma humano completo contem 2 metros de DNA (todos os 46 cromossomos) em cada célula; • Os 2 metros de DNA tem que ser empacotado dentro do núcleo com um diâmetro de ~6 um; • Existem cerca de 1013 células nos seres humanos; • A distância da terra ao sol é de 1,5 X 1011 m; • Existe bastante DNA no ser humano para ser esticado da terra ao sol e voltar cerca de 50 vezes! Braço Cromatides-irmãs Cromossomos: Centrômero Histona H3 Telômero Cromossomo Eucariótico Telômero: Snustad e Simmons, 2017. Telômeros de animais formam estruturas denominadas alças t, nas quais o filamento único na terminação 3' invade uma repetição telomérica no sentido 5' (upstream) (TTAGGG em mamíferos) e faz par com o filamento complementar, deslocando o filamento equivalente. O DNA nessas alças t é protegido pela shelterina, um complexo proteico telômero-específico, que atua contra degradação e/ou modificação por processos de reparo do DNA. Pierce, 2016. - Os cromossomos carregam os genes – unidades funcionais da hereditariedade. - Um gene normalmente é definido como um segmento de DNA que contém as instruções para produzir uma determinada proteína (ou uma série de proteínas relacionadas); Cromossomos: Cromossomo Eucariótico . Cerca de 1.000 degraus de DNA compreendem um gene, uma porção de um filamento de DNA que compõe o material hereditário das células. Os seres humanos possuem aproximadamente 100.000 genes funcionais que controlam a produção das proteínas corporais. Os genes determinam quais características herdamos, e controlam todas as atividades celulares durante ao longo da vida. Exercícios: 1- Uma cadeia da molécula de DNA contém 35% de A, quais são as proporções dessas mesmas bases esperadas na hélice dupla desse DNA? 2- Um certo segmento de DNA tem a seguinte sequência de nucleotídeos em uma fita : 5’ ATGCGTAAATCCGACCCTAGCGTTAAATGGCTCT 3’ , qual é a sequencia da fita 3’ 5’? Exercícios: 3- O que é o nucleossomo e quais seu componentes principais? 4- Quantas pontes de hidrogênio existem entre as bases Adenina e Timina, ou Guanina e Citosina? 5- Numere os carbonos das duas riboses nos nucleotídeos abaixo (que representam um processo de replicação. Vídeos: https://www.youtube.com/watch?reload=9&v=o_-6JXLYS-k https://www.youtube.com/watch?reload=9&v=o_-6JXLYS-k
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