Questões respondidas sobre Cromatografia

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Questões sobre Cromatografia 
 
1. Defina cromatografia. No que ela é fundamentada? 
Resposta: A cromatografia é um processo de separação e identificação de componentes de 
uma mistura, que se fundamenta na migração dos compostos através de suas diferentes 
interações com a fase móvel e a fase estacionária. 
 
2. Em uma análise cromatográfica em camada delgada (CCD) de um extrato 
hexânico foi utilizado sílica gel como fase estacionária e a mistura de acetato de etila e 
hexano 20:80 v/v como fase móvel. A placa cromatográfica obtida após a eluição está 
ilustrada abaixo. Calcule os respectivos fatores de retenção (Rf) para os compostos 1, 2 e 
 
Resposta:​ Composto 1 → Rf = Dr/Dm → Rf = 3,5/12 → Rf = 0,2916 
Composto 2 → Rf = Dr/Dm → Rf = 6,75/12 → Rf = 0,5625 
Composto 3 → Rf = Dr/Dm → Rf = 10/12 → Rf = 0,833. 
 
3. Explique o que é fase móvel e fase estacionária. Cite ao menos duas fases 
estacionárias e sua utilização com relação aos tipos de compostos. 
Resposta: A fase móvel e a fase estacionária são componentes imiscíveis da cromatografia. 
A fase estacionária é formada de um material escolhido para reter de forma diferenciada os 
componentes da amostra que se deseja separar. A fase móvel é o material que se desloca pela 
fase estacionária, arrastando os componentes da amostra. 
Fase estacionária: fase fixa onde a substância que está sendo separada ou identificada fixa-se 
na superfície de outro material. Como fase estacionária são empregados sólidos e líquidos. 
Fase móvel: nesta fase as substâncias que queremos isolar são arrastadas por um solvente 
fluido, que pode ser líquido ou gasoso. 
A fase estacionária é considerada, normalmente, polar. Sendo a sílica gel (SiO2) e óxido de 
alumínio (Al2O3) as fases mais utilizadas. Essas duas fases tem afinidades por substâncias 
polares. Dessa forma, substâncias apolares (ex: Hidrocarbonetos) não terão afinidades pelo 
adsorvente, portanto, não serão retidas, deslocando-se com a fase móvel. Enquanto as 
substâncias polares (ex: substâncias aromáticas) serão retidas pela fase estacionária 
(adsorvente) polar, não se deslocando. 
A sílica é um dos adsorventes mais utilizados, apresenta caráter fracamente ácido e é 
utilizada na separação de compostos lipofílicos como ácidos graxos, terpenóides esteróides, 
alcalóides, etc. 
A alumina é o mais utilizado depois da sílica, tem como caráter levemente básico e é 
utilizado na separação de compostos lipofílicos como alcalóides, hidrocarbonetos 
policíclicos, aminas e vitaminas lipossolúveis. 
 
4. Quanto ao potencial de aplicação, em que área pode ser aplicada a 
cromatografia? 
Resposta: ​A cromatografia pode ser utilizada para a identificação de compostos, por 
comparação com padrões previamente existentes, para a purificação de compostos, 
separando-se as substâncias indesejáveis e para separação dos compostos de uma mistura. 
 
5. Quais as técnicas cromatográficas mais utilizadas nos dias atuais? 
Resposta: Entre as técnicas mais utilizadas estão a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência 
(CLAE) e a Cromatografia em Fase Gasosa (CG). 
 
6. Qual o tipo de cromatografia mais utilizada quando se deseja isolar um produto 
natural ou um componente bioativo? Explique a escolha da técnica. 
Resposta: ​A cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), uma vez que esta técnica 
possui uma grande versatilidade devido ao grande número de fases estacionárias existentes, 
as quais possibilitam análises e separação de uma ampla gama de compostos com alta 
eficiência. 
 
7. Sabe-se que as fases móveis, usadas para cromatografias por adsorção, têm 
dupla função: como solvente precisa solubilizar os componentes da amostra e como 
eluente possui a finalidade de conduzir os componentes da amostra de interesse e, ao 
mesmo tempo, removê-los (dessorver) da fase estacionária. Assim, observando a figura 
a seguir, identifique quais são as prováveis fases móveis usadas, respectivamente, nas 
cromatoplacas 1 e 2, compreendendo que a amostra A é um composto apolar e a 
amostra B é polar. 
 
Resposta: ​Na cromatoplaca 1: uma possível fase móvel é o Hexano uma vez que este é um 
eluente com baixa polaridade e baixa força de eluição. Dessa forma, a amostra B fica mais 
retida devido a sua polaridade, enquanto a amostra A é “arrastada” pela fase móvel devido a 
sua apolaridade. 
Na cromatoplaca 2: uma possível fase móvel é o metanol uma vez que este é um eluente com 
alta polaridade e alta força de eluição. Dessa forma, a amostra B é mais “arrastada” pela fase 
móvel devido a sua polaridade, ao passo que a amostra A fica mais retida na fase estacionária 
devido a sua apolaridade.