Práticas Funcionais - Bioquímica UCV

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Maria Eduarda Zen Biz – 2020.1 
Células do Sangue 
É um tecido conjuntivo líquido que circula pelo sistema 
cardiovascular dos animais vertebrados; tem como 
funções: 
 O transporte de oxigênio, gás carbônico, 
nutrientes, excretas e hormônios pelo corpo; 
 Regulação do pH, temperatura e pressão 
osmótica; 
 Proteção contra doenças 
 
Os glóbulos vermelhos são as células que existem em 
maior quantidade no sangue e são responsáveis pela 
coloração deste. No interior das hemácias encontra-se 
um pigmento avermelhado, denominado hemoglobina, 
que realiza o transporte de oxigênio. São produzidos na 
medula óssea e, após 120 dias, destruídos no baço. 
Diminuição de hemácias: afeta o fornecimento de O2 aos 
tecidos 
Aumento de Hemácias: dificulta a circulação sanguínea 
 
 
Os glóbulos brancos, ou leucócitos, distinguem-se em 
cinco variedades, chamados neutrófilos, eosinófilos, 
basófilos, linfócitos e monócitos. Os leucócitos são, ao 
contrário dos eritrócitos, nucleados e constituem a parte 
celular do sistema imunológico ou de defesa do 
organismo contra substâncias estranhas e 
microrganismos patológicos (vírus, bactérias, fungos, etc). 
Também participam das reações alérgicas, produzindo 
histamina. 
 
 Leucócitos: 
 
Neutrófilo – fagócitos; principal barreira do sistema imune 
inato; bactérias; infarto agudo do miocárdio; inflamação 
aguda; podem ser encontrados no sangue como 
bastonetes e como segmentado; apresentam curto 
tempo de vida (cerca de 8-12 horas) no sangue; 
Aguda → são recrutados por macrófagos nas fases de 
captura, rolamento, adesão e transmigração. 
Crônica → persistência de neutrófilos no tecido, sejam 
ativados ou mortos. 
Neutrofilia: infecções (pneumonia ou meningite), diabetes, 
hemorragia, cancro maligno, stress; 
Neutropenia: infecções (bacterianas ou virais), Linfocitose 
absoluta 
 
Eosinófilo – Eosinofilia: parasitas; asma; alergias. 
Eosinopenia: medicamentos corticoides, estresse e 
processos inflamatórios agudos; contém grânulos com 
histamina e proteína (mediadores químicos); são 
desenvolvidos na medula óssea; 
 
Basófilo – infecções virais; não tem em grande 
quantidade na corrente sanguínea. Libera heparina 
(anticoagulante) e histamina (vasodilatadora). O aumento 
está relacionado com alergias e processos de defesa do 
organismo. Basofilia: infecções virais agudas. Aumento 
 
Monócito – Monocitose: infecção viral crônica; mais 
característico de algumas doenças como herpes, 
mononucleose; etc Monocitopenia: infecção sanguínea, 
quimioterapia ou distúrbio na medula óssea. São formados 
na medula óssea e quando se deslocam a outros tecidos 
são denominados macrófagos. 
 
Linfócito – célula de defesa contra infecção viral, aguda 
ou crônica; tem em grande quantidade. Linfocitose: 
aumento absoluto dos linfócitos; infecções, estresse, 
esporte, tabagismo, drogas, etc. Linfopenia: 
imunodeficiência. A contagem de latentes e crianças são 
mais altas que adultos. 
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 Tipo T: vírus, fungos e bactérias; diferenciam 
células do organismo de corpos estranhos; 
 Linfócito Natural Killer: defensor contra infecções 
e células cancerígenas. 
 Tipo B: reconhecem antígenos e se tornam 
células plasmáticas produtoras de anticorpos 
 
 
As plaquetas são fundamentais no mecanismo da 
hemostasia e coagulação do sangue. As plaquetas não 
são células, mas apenas fragmentos de megacariócitos 
(células especiais nativas da medula óssea) liberados na 
circulação. 
 Plaquetose: aumento, trombos 
 Plaquetopenia: diminuição; dengue 
Formação do Trombo Plaquetário: 
Adesão → formação de uma camada plaquetária que 
reveste a superfície lesada; 
Secreção → mudança da forma das plaquetas – 
aumento do número de plaquetas ativadas; 
Agregação → interação interplaquetária (fibrinogênio) 
Deixar o tampão mais forte → forma polímeros de 
fibrina que tem função pró-coagulante 
 
 
 
*Leucopenia: ocorre em quimioterapia 
 
 
Bactérias 
Classificação: 
 Cocos - alguns cocos organizam-se em pares 
(diplococos), alguns em cadeias (estreptococos), 
e outros em agrupamentos semelhantes a 
cachos de uvas (estafilococos). 
 Bacilos 
 Espiroquetas 
 
Coloração de GRAM 
Classificação 
A camada de peptideoglicano é muito mais espessa em 
bactérias gram-positivas que em gram-negativas. Em 
contrapartida, os organismos gram-negativos possuem 
uma camada externa complexa, consistindo em 
polissacarídeos, lipoproteínas e fosfolipídios. 
 Positivas: coram-se em azul; normalmente se 
apresentam em cocos 
 Negativas: coram-se em vermelho; 
normalmente se apresentam em bacilos 
Importância 
A vantagem da coloração de Gram em relação aos 
outros métodos é a rapidez e o baixo custo. Os 
resultados dela podem orientar na escolha de antibiótico 
adequado para o melhor tratamento do paciente. 
 
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Infecção do Trato Urinário 
Solicitar: 
 Parcial de Urina → vai acusar “microbiota intensa” 
 Urocultura → identificar a bactéria; “nome e 
sobrenome” 
 TSA ou Antibiograma → teste de sensibilidade; 
qual antibiótico usar para tratar 
 
Virulência: é uma medida quantitativa da patogenicidade 
relativa ao número de microrganismos necessários para 
causar uma determinada doença. As doenças causadas 
por bactérias podem ter a virulência maior se comparada 
a certas doenças virais. As gram-negativas são, 
geralmente, mais virulentas que as gram-positivas (a 
depender do sítio) 
As bactérias podem provocar doenças por meio de dois 
mecanismos principais: 
 Produção de toxinas 
o Endotoxinas (lipopolissacarídeos; apenas 
em bacilos e cocos gram-negativos; 
provocam febre e choque) 
o Exotoxinas (polipeptídios liberados pela 
bactéria) 
 Invasão e inflamação - multiplicam-se de forma 
intensiva e localizada, induzindo uma resposta 
inflamatória caracterizada pela presença de 
eritema, edema, hipertermia e dor. 
Em 75% dos casos de cistite, o agente é a E. coli. Através 
da coloração de GRAM que pode ser solicitada 
juntamente com o parcial de urina e posteriormente 
com a Urocultura, pode-se definir a via de tratamento. 
 
Urocultura: identifica qual bactéria está causando a 
doença e juntamente com este exame realiza-se o 
Antibiograma ou TSA (Teste de Sensibilidade a 
Antimicrobianos) que tem a finalidade de indicar os 
antibióticos sensíveis e resistentes para uso, de acordo 
com cada paciente e principalmente com a bactéria 
causadora. 
 
 
 
 
 
 
 
Maria Eduarda Zen Biz – 2020.1 
Meios de Cultura para Bactérias 
 Ágar-Sangue: crescem BGP e BGN; é um meio 
rico 
 Ágar-Cled: crescem BGP e BGN; é originalmente 
azul, com lactose e glicose; 
 MacConkey: só cresce BGN; possui lactose e 
inibidor de BGP. 
 
Prova Bioquímica: série de 5-8 testes para testar qual é 
a bactéria; tem uma série específica para BGP e uma 
para BGN 
 
 Enriquecido - caldo ou meio sólido contendo um 
grande suprimento de nutrientes que promove 
o crescimento dos microrganismos fastidiosos. 
o O Ágar-Sangue é um exemplo de meio 
sólido enriquecido utilizado 
rotineiramente nos laboratórios de 
bacteriologia clínica. 
o O meio de Thayer-Martin, outro meio 
de cultura enriquecido, auxilia no 
crescimento de bacte ́rias como N. 
gonorrhoeae. 
 Seletivo - permite o crescimento de certos tipos 
de microrganismos e inibe o crescimento de 
outros microrganismos. Ele contém inibidores, 
geralmente antibióticos, que tornam inviável o 
crescimento de certos microrganismos, sem 
inibir o crescimento do microrganismo alvo. 
o O Ágar eosina-azul de Metileno (EMB) é 
um meio seletivo que inibe o 
crescimento de organismos gram-
positivos, enquanto suporta o 
crescimento de organismos gram-
negativos. Distingue fermentadores de 
lactose, como a Escherichia coli, dos 
organismos gram-negativos não 
fermentadores de lactose, 
como Pseudomonas aeruginosa. 
 Diferencial - diferenciar microrganismos ou 
grupos de microrganismos em um meio. A 
presença de determinados corantes ou de 
produtos químicos nos meios produzirãocertas 
alterações características ou padrões de 
crescimento que são utilizados para a 
identificação ou a diferenciação de 
microrganismos. 
o O Ágar MacConkey é frequentemente 
utilizado para diferenciar vários bacilos 
gram-negativos isolados de amostras 
 Cromogênico - à utilização de substratos 
cromogênicos (reação de cor), ou seja, o 
resultado do cultivo pode ser observado através 
da alteração de cor na placa; têm maior 
sensibilidade e ainda podem reduzir a 
necessidade de outros testes, como subculturas 
e confirmação. 
 
Artrite Reumatoide 
A Artrite Reumatoide é uma doença auto imune 
caracterizada por inflamação crônica multissistêmica, 
reconhecida como a mais comum das artrites 
inflamatórias. 
Esta patologia provoca o acometimento de articulações 
diartrodiais, que resulta em grande disfunção e 
deformidade articulares. 
Os pacientes com AR possuem muitos anticorpos 
direcionados contra antígenos próprios. 
 
Os testes para diagnóstico discorrem sobre a pesquisa 
de fatores reumatoides que são autoanticorpos de classe 
IgM (maioria), IgG ou IgA. A literatura estabelece que 
cerca de 80% dos pacientes com Artrite reumatoide 
apresentam Fator Reumatoide positivo (dosagem de 
Fator Reumatoide). 
 
O exame: 
Está demonstrado que os soros de pacientes que sofrem 
de Artrite Reumatoide apresentam um anticorpo Fator 
Reumatoide (FR). A detecção do FR no soro é feita pela 
prova de Waaler-Rose (WR), ou pela aglutinação de 
partículas de látex. 
Tem como alvo a região Fc de IgGs (de memória – se 
mantém ativo em crônicas) 
Esses fatores são encontrados em pacientes com outros 
enfermidades autoimunes, não autoimunes e infecciosas, 
bem como em indivíduos saudáveis – portanto, ele é um 
exame muito sensível. 
 
O resultado: 
Analisar a olho nu sob uma fonte de luz branca de boa 
intensidade: 
 O Controle negativo não deverá apresentar 
aglutinação; 
 O Controle positivo deverá apresentar 
aglutinação; 
 Será considerado positivo amostras com 
aglutinação visível e deverão ser submetidas à 
prova quantitativa para ter seu título 
determinado. 
 O positivo pode: 
o Com sintomatologia, ser AR 
o Sem sintomatologia, não ser AR ou ser 
AR controlada (que já foi tratada) 
 
https://kasvi.com.br/wp_kasvi/produtos/?ref=K25-610005&desc=agar-sangue-base.-frasco-500g
https://kasvi.com.br/produtos/?ref=K25-610022&desc=meio-gc.-frasco-500g
https://kasvi.com.br/produtos/?ref=K25-610019&desc=agar-eosina-azul-de-metileno-(emb-levine).-frasco-500g
https://kasvi.com.br/wp_kasvi/produtos/?ref=K25-610028&desc=agar-mac-conkey.-frasco-500g
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Exame de anti-CCP: para diagnóstico da AR é 
recomendado; consiste na dosagem de anticorpos anti-
peptídeos citrulinados cíclicos. É muito específico para ar. 
A combinação dos dois marcadores (FR e anti-CCP) 
melhora a exatidão do diagnóstico, em especial no caso 
da artrite reumatoide precoce. 
 
Parasitoses Intestinais 
Causadas por protozoários e helmintos. Os protozoários 
são eucariontes e unicelulares, enquanto os helmintos 
são eucariontes e pluricelulares. 
 
Exemplos: 
Protozoários → Trypanossoma cruzi (Doença de 
Chagas) 
Helmintos → Ascaris lumbricoides 
 
Exame de Fezes: 
Método de Hoffmann, Pons e Janes ou Método de 
Sedimentação Espontânea – forma mais simples de 
análise de material fecal. O método consiste em proceder 
a diluição do material fecal com água e posteriormente 
transferir para um cálice, filtrando com gaze. Esperar 
sedimentar entre 4 e 24 horas. Realizar a leitura em 
Microscópio óptico através de lâmina e lamínula. 
 
Protozoários: eucariontes, unicelulares; formam cistos 
 Giardia duodenalis 
 Entamoeba histolytica 
 Gênero Cryptosporidium 
 
Helmintos: eucariotos, pluricelulares; formam ovos e 
larvas; têm simetria bilateral e são classificados em 
platelmintos e nematelmintos 
 Cilíndricos: 
o Ascaris Lumbricoides 
o Necator americanos 
o Ancylostoma duodenalis 
o Enterobius vermicularis 
 Chatos: 
o Taenia Solium 
o Taenia Saginata 
o Schistossoma mansoni 
 
Resposta Imune à Parasitos 
Eosinofilia: Os eosinófilos produzem enzimas oxidativas e 
hidrolíticas que são tóxicas para os parasitos; principais 
causadores: nematódeos, cestoides e trematódeos. A 
principal defesa contra os helmintos é mediada por 
linfócitos Th2, resultando na produção de IgE e ativação 
de eosinófilos. A interleucina 4 (IL-4) estimula a produção 
de anticorpos IgE e a IL-5 a ativação e desenvolvimento 
de eosinófilos e mastócitos. 
Os protozoários causam hipersensibilidade no local em 
que se alojam, desencadeando um processo inflamatório 
no qual ocorre a produção das imunoglobulinas IgA e IgE. 
Assim, promovem a ativação de células efetoras, os 
eosinófilos, que identificam o corpo estranho e estimulam 
o processo de citotoxicidade, na qual os anticorpos 
eliminam o patógeno. 
 
 
 
 
Eosinofilia (hemograma) 
 
Parasitas e exames 
Enterobius vermicularis (oxiúros) – larga tem a asa 
cefálica; coceira anal; melhor exame: método da fita 
gomada; há também a coleta com swab 
 
Giardia lamblia ou duodenale – exame: pesquisa de ELISA 
para Giardia 
Maria Eduarda Zen Biz – 2020.1 
 
Ascaris lumbricoides 
 
Entamoeba coli – não causa muitos problemas pro 
homem; quando presente, geralmente há outros 
parasitas presentes. 
 
Trypanossoma cruzi – encontrado no sangue, 
principalmente, sob a forma de tripomastigota; 
 
 
EPF (exame parasitológico de fezes): é o mais utilizado, 
consiste na análise de pequenas amostras de fezes do 
paciente. 
 
Método de Ritchie/Sedimentação: formol e éter para 
fixação e concentração de estruturas parasitárias e 
separá-las dos detritos e gorduras fecais. 
 
Método de Hoffmann: permite o encontro de larvas e 
ovos de helmintos e de cistos de protozoários; 
identificação genérica 
 
Método de Kato-Katz: concentração de ovos através de 
filtração das fezes em tela metálica ou naillon 
 
Método do Esfregaço de espesso de celofane 
 
Método de Willis: indicado para pesquisa de ovos leves 
(flutuação espontânea); baseia-se na diferença de 
densidade entre os ovos e de helmintos, cistos de 
protozoários e o material fecal. 
 
Método de Blagg: uso para pesquisa de ovos de larvas 
de helmintos, cistos e alguns oocistos de protozoários; 
por centrifugação 
 
Método de Baermann e Moraes: utiliza as fezes para 
isolamento de larvas de estrongolóides (Strongyloides 
stercoralis) e acompanhamento do tratamento; 
específico para larvas. 
 
Método de Rugal: específico para larvas, por utiliza o hidro 
e termotropismo das larvas. 
 
Método de Faust: pesquisa de vistos e alguns oocitos de 
protozoários, permitindo também o encontro de ovos 
leves 
 
Método de Graham/fita gomada: baseia-se na utilização 
da fita gomada na apreensão de estágios evolutivos de 
parasitos, localizados na região perianal. PADRÃO OURO 
 
Parasitológico de fezes 3 amostras: coletar três amostras 
de fezes em dias diferentes, preferencialmente em dias 
alternados, para resultados mais objetivos. 
 
Pesquisa de Giardia por ELISA: baseada na presença de 
um antígeno específico – GSA65 – produzido pela 
multiplicação intestinal da Giardia lamblia ou intestinalis 
 
Swab Anal para pesquisa de Oxiúros: não é um método 
tão eficaz quanto a fita gomada para detecção de ovos 
e fêmeas de oxiúros.