Núcleo interfásico

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Perguntas – Núcleo Interfásico.
1-O que é núcleo interfásico?
2-Quais estruturas do núcleo interfásico são distinguíveis na microscopia óptica? E quais só podem ser observados em microscopia eletrônica? 
3-Qual a importância do núcleo da célula?
4-O que define a posição nuclear, formato do núcleo e o tamanho do núcleo? 
5-Quais são os componentes do núcleo interfásico? 
6-Descreva o envoltório nuclear.
7-Quais são as funções do envoltório nuclear?
8-Por que é possível encontrarmos proteínas no espaço perinuclear?
9-Como é formado o complexo de poro e para que ele é útil para a célula? 
10-Como que as moléculas de ate 60 KDa passa pelo complexo de poro nuclear?
11-Descreva o mecanismo de importação e exportação de grandes moléculas pelo complexo de poro.
12-Qual a importância das moléculas de GTP e GAP no processo de importação e exportação de grandes moléculas pelo complexo de poros?
13-Como que a Ran-GTP é formada?
14-Como é constituída, qual a localização e qual a importância da lâmina nuclear?
15-Qual é a relação da lâmina nuclear com o que acontece com o núcleo durando a divisão celular?
16-O que é cromatina?
17-O que é um nucleossomo? 
18-Como é organizada a fibra de cromatina de 10 nm? E a de 30 nm? Elas representam o mesmo estado de atividade? Justifique.
19-Fale sobre a eucromatina e a heterocromatina.
20-Descreva os compartimentos do nucléolo.
21-Por que a presença do nucléolo pode estar associada com a atividade de síntese proteica da célula?
22-O que é nucleoplasma? 
Respostas:
1-É o núcleo entre as divisões celulares.
2-Microscopia eletrônica:
	-Envoltório nuclear.
	-Complexo de poro.
	-Lâmina nuclear.
Microscopia óptica:
	-Cromatina.
	-Nucléolo.
	-Nucleoplasma.
3-Separação do processo de transcrição e tradução.
-Organização espacial do material genético.
-Proteção mecânica e nuclear.
-Tamanho é proporcional ao conteúdo de DNA e atividade metabólica da célula.
4-Posição nuclear: interação com citoesqueleto.
Formato do núcleo: formato da célula.
Tamanho do núcleo: metabolismo e quantidade de DNA.
5- Envoltório nuclear, com poros nucleares, lâmina nuclear, nucléolo, cromatina, nucleoplasma.
6-Composto por duas unidades de membrana concêntricas lipoproteicas que não são contínuas devido a presença do complexo de poro nuclear.
-Membrana nuclear interna: associada a lâmina nuclear e com a cromatina.
-Membrana nuclear externa: com ribossomos aderidos e continuidade com o RER.
-Espaço perinuclear: entre as duas membranas, com proteínas solúveis.
7-Separar o núcleo do citoplasma (barreira seletiva).
-Realiza manutenção do núcleo como compartimento distinto.
-Permite controle ao acesso do material genético.
8-Porque na membrana externa tem ribossomos associados que estão participando da síntese proteica.
9-Presente entre o envoltório nuclear é composto por mais de 100 moléculas proteicas chamadas nucleoporinas (sendo 30 proteínas diferentes) que compõem dois anéis proteicos: anel citoplasmático, com filamentos citoplasmáticos, anel nuclear, com filamentos nucleares que se organizam em cesta de basquete, entre esses dois anéis tem o canal central com filamentos proteicos. Esse complexo de poro é útil para célula por regular o trânsito de macromoléculas entre núcleo e citoplasma.
10-Moléculas com < 50 KDa passam por difusão simples, ou seja, sem gasto de energia, tendo equilíbrio entre citosol e núcleo e sem interações com o complexo do poro. 
Já moléculas entre 50KDa – 60KDa fazem difusão facilitada, também sem gasto de energia, com equilíbrio entre citosol e núcleo, porém, com interação com o complexo de poro.
11-Moléculas com mais de 60KDa para serem transportadas precisam expressar sequência de localização nuclear (NLS) para entra no núcleo, ou sequência de exportação nuclear (NES) para sair do núcleo, sequencias essas que serão reconhecidas por receptores responsáveis pela importação (importina) e exportação (exportina). Todo esse processo envolve gasto de energia (quebra de GTP → GDP) e interação com o complexo do poro.
No caso da importação, no citoplasma a molécula expressa NLS que é reconhecida pela importina que se liga a ela formando um complexo que entra no núcleo após interação com o complexo no poro. No núcleo, a molécula de Ran-GTP se liga à integrina, permitindo que a molécula se solte e fique no núcleo, enquanto que a integrina é induzida a voltar para o citoplasma, onde, pela ação da GAP a Ran-GTP é hidrolisada formando Ran-GDP + Pi e deixando a integrina livre para outro ciclo de importação. 
No caso da exportação, no núcleo a exportina reconhece o NES expresso pela molécula, então, se liga a ela. Para que o complexo formando saia do núcleo é necessário a ligação da Ran-GTP na exportina também, no citoplasma, a GAP atua hidrolisando a Ran-GTP em Ran-GDP + Pi causando a liberação da proteína no citosol e a exportina fica livre para retornar ao núcleo.
12-A GAP está presente no citosol e é importante para hidrolisar a Ran-GTP em Ran-GDP permitindo que as proteínas carreadoras se tornem livres.
Já a Ran-GTP é importante na importação pois ao se ligar a importina permite a liberação da molécula que está sendo importada, ao mesmo tempo em que também promove a volta da importina para o citosol. Na exportação a Ran-GTP é importante por levar o complexo exportina + molécula para fora do núcleo.
13-O excesso de Ran-GDP no citosol, devido hidrolise pela GAP, retorna para o núcleo pelo complexo de poro, onde sofre fosforilação pela enzima GEF formando Ran-GTP novamente. 
14-A lâmina nuclear é constituída por filamentos intermediários, laminas A/C e B, os quais conseguem entrar no núcleo porque apresentam NLS. A lâmina nuclear está localizada associada à superfície interna do envoltório nuclear, sendo de grande importância para:
-Manutenção da forma e suporte estrutural nuclear.
-Associação de fibras cromatinicas ao envoltório.
-Participação no controle da expressão gênica, na manutenção do citoesqueleto e na sobrevivência da célula.
15-Na divisão celular a lâmina sofre fosforilação se fragmentando e como ela é responsável pela manutenção da forma e pelo suporte estrutural nuclear, acaba que o envelope nuclear também se fragmenta, expondo os cromossomos para que ocorra a divisão. No final da telófase a lâmina nuclear é desfosforilada, permitindo sua reorganização e a formação no núcleo interfásico.
16-É DNA + histonas, sendo que sua organização é bem dinâmica, podendo estar condensada (heterocromatina) ou descondensada (eucromatina).
17-É uma unidade básica da cromatina, formando por 200 pares de base de DNA + octâmero de histonas (1 tetrâmero de H3-H4 e 2 dímeros H2A e H2B).
18-Fibra de 10 nm:
-DNA de ligação (não associado a histonas) + centro do nucleossomo (octâmero de histonas + 146 pb de DNA).
-Primeiro nível de compactação da cromatina.
-Eucromatina ativa.
Fibra de 30 nm:
-Histonas H1 se associam a dois segmentos de DNA de ligação.
-2º nível de compactação.
-Eucromatina inativa.
As fibras de 10 nm e 30 nm não representam o mesmo estado de atividade, visto que a 10 nm é menos condensada, então, está ativa, enquanto a de 30 nm se apresenta mais condensada, sendo inativa.
19-Eucromatina: distribuída por todo o núcleo de forma descondensada, constituída por genes que condificam proteínas, ou seja, genes transcricionais.
-Heterocromatina: encontra-se preferencialmente na periferia do núcleo, constituída por sequências de DNA que não codificam proteínas, permanecendo altamente condensada.
20-Estrutura esférica não envolvida por membrana, possui os seguintes compartimentos:
a) Centro fibrilar: rDNA sendo transcrito em rRNA pela RNA polimerase I.
b) Componente fibrilar denso: processamento das moléculas de rRNA e associação do rRNA com proteínas especificas.
c) Componente granular: processamento final de rRNA e montagem das subunidades ribossômicas. 
Depois de passar por todos esses processos ocorre a exportação das subunidades ribossômicas para o citoplasma.
21-Porque é no nucléolo que as subunidades de rRNA são formadas. Quanto maior a demanda da célula por síntese proteica, maioro nucléolo.
22-Solução aquosa de proteínas, RNA, nucleosídeos, nucleotídeos e íons, onde estão mergulhados nucléolo e cromatina.