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Eritrograma

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Quando o animal apresenta alteração na coloração das
mucosas.
Sangramento sem causa identificada, hemorragia.
Antes de alguma cirurgia ou procedimento, para avaliar se
os valores estão nos parâmetros fisiológicos. 
Avaliar se o organismo do animal está reagindo bem a um
tratamento medicamentoso.
Caracterizar o quadro clínico do animal após algum tipo de
trauma.
O exame detecta os tipos de leucócitos, sendo de grande valia
para auxiliar no diagnóstico de outras condições, como uma
alergia ou asma.
Nos animais saudáveis, o hemograma pode ser pedido
apenas como um exame de rotina.
Na solicitação do exame é necessária adequada identificação
da amostra: 
Rótulo no frasco de colheita, ficha contendo nome do
proprietário, data, espécie animal, raça, sexo, idade, hora da
colheita, diagnóstico provisório, tratamento, história clínica
resumida, nome, assinatura e CRMV do requisitante e do
examinador. 
O processo de eritrogênese que resulta na formação de
eritrócitos maturos é conhecido como eritropoiese, levando
em torno de sete a oito dias para se completar. O núcleo
eritrocitário é expulso no decorrer do processo de
desenvolvimento nos mamíferos e fagocitado por
macrófagos locais. Enquanto nas aves, peixes, anfíbios e
répteis as hemácias são nucleadas. 
A fase de proliferação, compreendida entre a célula
pluripotencial até o metarrubrícito, leva de dois a três dias,
enquanto o restante consiste na fase de maturação, levando
em torno de cinco dias.
A eritropoiese é formada na medula óssea a partir de uma
célula pluripotencial de origem mesenquimal chamada
célula tronco ou célula mãe que é estimulada a proliferar e
diferenciar-se em “burst” de unidade formadora eritróide
(BUF-E) pela IL-3 e fator estimulante de colônia granulocítica-
monocítica na presença da eritropoietina (EPO). Esta
diferenciação ocorre sob influência do microambiente
medular local e por citocinas produzidas por macrófagos e
linfócitos T ativados. A proliferação e diferenciação da BUF-E
para unidade formadora de colônia eritróide (UFC-E) resulta
da presença destes mesmos fatores e pode ser potencializado
por fatores de crescimento adicional.
A eritropoiese normal envolve um mínimo de quatro
mitoses: fase de rubriblasto, estágio de pró-rubrícito e duas
no estágio de rubrícito basofílico. 
A denucleação do metarrubrícito leva à formação de
reticulócito, o qual finalmente matura-se, dando origem ao
eritrócito.
A nomenclatura das células eritróides é:
Rubriblasto
Pró-rubrícito
Rubrícito basofílico 
Rubrícito policromático 
Metarrubrícito 
Reticulócito
Eritrócito.
O VETERINÁRIO PODE SOLICITAR O EXAME EM VÁRIAS
SITUAÇÕES:
ERITROPOIESE: Os reticulócitos podem permanecer na medula óssea por
dois a três dias antes de entrar no sangue através de
células endoteliais. A sua liberação para o sangue é
controlada por um número de fatores que agem em
conjunto, incluindo a concentração de eritropoietina.
Variações interespécies podem ocorrer em consideração
ao número de reticulócitos liberado no sangue sob
condições fisiológicas e patológicas. Por exemplo, o
equino não libera reticulócitos para o sangue periférico,
mesmo em anemia severa. Cães e gatos respondem
vigorosamente com reticulocitose no sangue durante
anemia regenerativa, porém os ruminantes geralmente
têm uma leve resposta.
Os reticulócitos maturam-se em eritrócitos 24-48 horas na
circulação ou no baço, onde podem ser sequestrados
temporariamente. O processo de maturação envolve a
perda de algumas superfícies de membranas, redução do
tamanho celular e mudança de forma para o aspecto
bicôncavo.
ERITROGRAMAERITROGRAMAERITROGRAMA
Andriely de Almeida @dicas.deumavet
Uma contagem corrigida de reticulócitos acima de 1% em
cães e gatos indica eritropoiese ativa (anemia regenerativa).
Usualmente há necessidade de um período de 3 a 4 dias para
que uma significante reticulocitose, seja encontrada no
sangue periférico após uma hemorragia aguda e a resposta
máxima pode levar de 1 a 2 semanas ou mais. Em uma
anemia hemolítica severa, entretanto, uma rápida liberação
de reticulócitos pode levar somente 1 ou 2 dias e ser seguida
de uma intensa eritropoiese. Após hemorragia a resposta da
medula óssea pode ser avaliada a partir do 3 dia após a
perda de sangue, pois este é o tempo mínimo necessário para
a liberação de células jovens após a hipóxia. 
Em quadros agudos a avaliação clínica do grau de anemia e
estimativa de perdas é muito mais útil que os parâmetros
laboratoriais isolados; deve-se, inicialmente estabilizar o
paciente com transfusão e fluidoterapia. 
A fragmentação nuclear ou extrusão incompleta dos núcleos
dos metarrubrícitos resultam na retenção de núcleo pequeno
remanescente chamado corpúsculo de Howell-Jolly. O
corpúsculo de Howell- Jolly é removido do reticulócito
quando este passa no baço e muitas vezes é encontrado em
indivíduos esplenectomizados ou quando a função do baço
está comprometida.
Diagnosticar/ avaliar distúrbios eritrocitários
Avaliar a progressão do paciente (melhora ou piora)
Existem dois tipos de distúrbios:
Anemias
Eritrocitose
Parte do hemograma utilizada para avaliar a série vermelha,
ou seja, as hemácias. O eritrograma é composto por:
Volume Globular ou Hematócrito (%)
Concentração de hemoglobina (g/dL)
Contagem total de eritrócitos (he/μL)
Avaliação Morfológica das Hemácias
Índices eritrocitários de Wintrobe
Volume Corpuscular Médio (VCM)
Concentração de Hemoglobina Corpuscular Médio (CHCM)
Hemoglobina Corpuscular Média (HCM)
Exame que determina a quantidade de hemácias em volume
de sangue. A quantificação pode ser realizada por métodos
manuais (hemocitômetro) ou em equipamentos
automatizados.
FINALIDADE DO ERITROGRAMA:
 
O QUE O ERITROGRAMA AVALIA:
CONTAGEM TOTAL DE ERITRÓCITOS:
Como é realizado:
Tomar o frasco com sangue mais anticoagulante e
homogeneizar;
Com a pipeta de Thoma para glóbulos vermelhos aspirar o
sangue até a marca 5μ;
Limpar o sangue da parte externa da pipeta;
Diluir em seguida com solução fisiológica (1000μ);
Agitar, desprezar as primeiras gotas e encher a câmara de
Neubauer por capilaridade; 
Contar as hemácias de cinco quadrados médios, multiplicar o
resultado por 10.000/μl.
Andriely de Almeida @dicas.deumavet
A hemoglobina (Hb) é uma proteína globular presente nas
hemácias cuja principal função é absorver, transportar e
liberar oxigênio aos tecidos.
Determinação da quantidade de hemoglobina em um
volume de sangue.
A dosagem de hemoglobina pode ser realizada por
métodos manuais utilizando espectrofotômetro ou por
automação em contadores hematológicos. O método mais
comumente utilizado para a dosagem de hemoglobina é o
cianometemoglobina:
Como é realizado o Método da cianometemoglobina: 
Diluição do sangue em solução contendo cianeto de
potássio e ferrocianeto de potássio (Reativo de Drabkin),
que convertem a hemoglobina em cianometahemoglobina.
Tomar o frasco com sangue mais anticoagulante e
homogeneizar. 
Preencher pipeta de Sahli com sangue. 
Limpar o sangue da parte externa da pipeta com gaze,
adicionar reativo de Drabkin e agitar por inversão. 
DETERMINAÇÃO DE HEMOGLOBINA:
Repousar por um mínimo de 10 minutos à temperatura
ambiente. 
Ler em espectrofotômetro, usando-se tubos específicos.
Obtém-se o resultado visualmente no aparelho na unidade de
g %. 
O valor do volume globular (ou hematócrito) é a
porcentagem do sangue total composta pelos eritrócitos. É
mensurado a partir de uma coluna de sangue que, após a
centrifugação, resulta na compactação máxima dos
eritrócitos.
O procedimento é realizado: 
O tubo de microematócrito é preenchido por capilaridade,
segurando-o horizontal ou levemente inclinado para baixo e
encostando-se a extremidadesuperior no sangue do tubo com.
Na sequência, possibilite que o tubo seja preenchido em 70 a 90%
de sua extensão. 
Segure o tubo horizontalmente para evitar que o sangue escorra
para fora e, então, sele uma das extremidades pressionando o
tubo contra o material selante por uma ou duas vezes. 
O tubo é então colocado na centrífuga de micro-hematócrito de
acordo com as instruções do fabricante. 
A centrífuga de micro-hematócrito é projetada para girar o leve
tubo a velocidades muito altas, produzindo força centrífuga
suficiente para agrupar e compactar os eritrócitos a maioria do
plasma (ou todo ele) é removida das camadas de eritrócitos.
Podem ser observadas três camadas distintas no tubo após sua
remoção da centrífuga: a coluna de plasma no topo, os eritrócitos
compactados na base e uma pequena papa leucocitária ao meio.
A papa leucocitária é constituída de células nucleadas
(predominantemente leucócitos) e de plaquetas e pode ser
levemente avermelhada caso a concentração de eritrócitos
nucleados estiver aumentada proeminentemente.
O volume globular é mensurado em um dispositivo de leitura, tal
como um cartão leitor para micro-hematócrito. O procedimento é
realizado posicionando-se a base da coluna de eritrócitos na linha
0 e o topo da coluna de plasma na linha 100. Faz-se então a
leitura, na escala, correspondente à posição do topo da coluna de
eritrócitos, obtendo-se o valor do volume globular.
O plasma obtido por este método pode ser empregado em
outros exames, como concentração de proteínas plasmáticas
totais e concentração de fibrinogênio plasmático, utilizando-
se a precipitação pelo calor e refratometria. 
HEMATÓCRITO:
Andriely de Almeida @dicas.deumavet
Proteínas plasmáticas por refratometria:
A concentração de proteínas plasmáticas é mensurada
utilizando-se a coluna de plasma do tubo de micro-
hematócrito. 
O tubo é quebrado no nível da papa leucocitária e a porção do
tubo contendo o plasma é utilizada para preencher o
refratômetro. 
O aparelho é então empunhado de maneira que uma fonte de
luz ambiente possa passar através do prisma embebido com o
plasma e então se lê o grau de refração da luz em uma escala
visível por meio da ocular.
Ao exame microscópico do plasma, podemos observar as
microfilárias e tripanossomas logo acima da camada
branca (capa flogística). 
 Microfilária Tripanossoma
Classificação quanto:
Tamanho
Forma
Coloração
Estruturas internas e epicelulares
Arranjo celular 
Para estimativa do tamanho das hemácias é utilizado um
índice hematimétrico denominado Volume Globular Médio
(VGM) ou Volume Corpuscular Médio (VCM). A determinação
do tamanho das hemácias é importante para auxiliar na
compreensão das causas das anemias. 
Com a utilização do VGM as hemácias podem ser
classificadas em normocíticas, macrocíticas e microcíticas. 
As hemácias normocíticas estão no intervalo de referência o
VGM para a espécie.
A macrocitose ocorre quando existe um predomínio de
hemácias grandes (macrocíticas), que aumentam o VGM.
A microcitose ocorre quando há predominância de hemácias
pequenas (microcíticas), diminuindo o VGM.
Quando são visualizadas no esfregaço sanguíneo hemácias
com diferenças marcantes de tamanho utiliza-se para
descrever esse achado o termo anisocitose, que significa
diferença de tamanho. 
Os modernos contadores hematológicos automatizados
calculam um índice denominado "Res cell distribution widht"
(RDW) que corresponde ao coeficiente de variação do
volume globular médio (VGM) e é um índice numérico de
anisocitose. A utilização do RDW avalia a anisocitose com
mais precisão, pois é mais sensível que o VGM e, por ser um
indice numerico, retira a subjetividade do analista.
Os valores de VCM pode ser calculado conforme fórmula a
seguir: 
A coloração tipica das hemácias é dada pelo teor de
hemoglobina da célula. 
Para estimar a concentração de hemoglobina é utilizado o
índice hematimétrico CHGM (CHCM) e, de acordo com
resultados obtidos, as células são classificadas em:
Normocrômicas: concentração de hemoglobina nos valores
de referência para espécie. 
Hipocrômicas: concentração de hemoglobina abaixo dos
valores de referência para espécie. 
Hipercrômica: concentração de hemoglobina globular média
acima dos valores de referência para espécie. Entretanto,
fisiologicamente não existem hemácias hipercrômicas, pois a
hemácia tem um grau de saturação para hemoglobina. Ou
seja, a hemácia não consegue carrear mais hemoglobina
então essa hemoglobina começa a extravasar para a corrente
sanguínea (hemolise).
A hemólise pode ser patológica ou erro pré- analitico.
AVALIAÇÃO MORFOLÓGICA:
ÍNDICES ERITROCITÁRIO:
Andriely de Almeida @dicas.deumavet
Os valores de CHCM pode ser calculado conforme fórmula
a seguir:

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