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CENTRO UNIVERSITÁRIO DE BRASÍLIA – UniCEUB FACULDADE DE CIÊNCIAS DE EDUCAÇÃO E SAÚDE – FACES DISCIPLINA: bioquímica PROFESSOR: CLÁUDIO HENRIQUE CERRI E SILVA ALUNOS: MATHEUS MÁXIMO, NATHALIA BRITO E PAULO SENA CAMPUS TAGUATINGA II – ENFERMAGEM – TURMA A – 2º SEMESTRE Relatório de Aula Prática: Análise Quantitativa de Proteínas 1. Introdução As proteínas são polímeros formados por aminoácidos, e são macromoléculas abundantes nas células vivas (Nelson; Cox, 2006). Desempenham papéis fundamentais para o bom funcionamento de um organismo, suas funções são diversas como: catalise enzimática, nutrição, motilidade do organismo ou celular, dentre outras. O espectrofotômetro foi o instrumento utilizado para a análise quantitativa de proteínas e Segundo Motta (2009, p.15), a fotometria e a espectrofotometria estudam a medição das grandezas relativas à emissão, à recepção e à absorção da luz, ou seja, as propriedades da interação da luz com uma matéria para fazer a analise quantitativa e qualitativa de uma substância, existem vários métodos utilizados para fazer esse tipo de análise. Na bioquímica clínica esse método é utilizado para a compreensão de patologias no metabolismo. 2. Metodologia No procedimento de análise quantitativa de proteínas, foram utilizados tubos de ensaio com as seguintes soluções: Tubo B(branco)- 2ml de água destilada + 2ml de reagente de biureto, tubo P(padrão)- 2ml da substância padrão(albumina) + 2ml de reagente de biureto, e nos tubos de teste (T1, T2, T3) 2ml de uma amostra desconhecida + 2ml de reagente de biureto, os tubos de teste foram divididos em tubos A e B, nos tubos A(A1,A2,A3) foram misturados 2ml de reagente de biureto + 2ml de uma amostra A, e nos tubos B(B1,B2,B3) foram misturados 2ml de reagente de birureto + 2ml de uma amostra B, após realizar as soluções foi preciso esperar 10 minutos e nos tubos pôde-se observar uma coloração púrpura que indica a presença de proteína. No espectrofotômetro foi colocado primeiramente o tubo branco para calibra-lo a 0 de absorbância e 100% de transmitância e a onda do aparelho foi ajustada para 540nm, em seguida foram analisadas a absorbância das amostras dos tubos. 3. Resultados e discussões Na analise das proteinas no espectrofotometro foi verificado os seguintes resultados: Tubo Resultado Tubo Resultado Bc0 (branco) 0000 A3 0,158 P (padrão) 0,320 B1 0,084 A1 0,159 B2 0,087 A2 0,153 B3 0,079 Respostas questionário: · Qual o princípio da espectrofotometria? Método de analise óptico no qual consiste em medir substancias quantitativamente ou qualitativamente através da absorção de luz por moléculas dispersas nas soluções. · Qual o objetivo do tubo branco? O tubo branco serve para obter um fator de calibração do aparelho, para que ele esteja apto a realizar a leitura de absorbância das amostras. · O que é uma soluçao padrão? É uma solução na qual a sua concentração é conhecida, e a absorbância dessa substância é usada para traçar uma curva de calibração. A espectrofotometria faz analises quantitativas atraves da absorção de luz e essa medição é útil para a análise e compreenção de disfunções metabolicas. Podemos compreender que a absorbância é igual à quantidade de luz absorvida e a transmitância é a fração total de luz transmitida, no caso da análise de proteína com o método do biureto podemos determinar a concentração total de proteínas em uma amostra. 4. Considerações finais A espectrofotometria é uma técnica muito útil para análises laboratoriais, podendo ser diagnosticado várias enfermidades através da absorção de luz como método de medição de concentrações químicas, como foi o caso da análise de proteínas no qual analisamos a taxa quantitativa de proteínas em uma solução. 5. Bibliografia FOGAÇA, Jennifer Rocha Vargas. "Composição Química das Proteínas"; Brasil Escola. Disponível em <http://brasilescola.uol.com.br/quimica/composicao-quimica-das-proteinas.htm>. Acesso em 29 de outubro de 2016. NELSON, David L. Lehninger: princípios de bioquímica. 4° edição. Sarvier,2006. OLIVEIRA, Marcus Vinícius Paiva de. APLICAÇÕES DE ESTUDOS BIOQUÍMICOS QUANTITATIVOS EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE. http://www.fara.edu.br/sipe/index.php/renefara/article/viewFile/54/44. Acesso em: 31 de outubro de 2016.
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