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UNIARP – Nucleo comum de Saude Disciplina: Práticas de Laboratório Aula de Microscopia. Objetivos: a) Conhecer partes que compõe o microscópio. b) Manusear o microscópio para visualização de preparados em lâminas c) Preparar lâminas de microscopia. Roteiro para aula prática de microscopia. 1. Antes da aula prática, identifique as estruturas no microscópio óptico: a.Charriot b.Lente ocular c.Objetivas d.Base ou pé e.Condensador f.Platina ou mesa g.Canhão ou Tubo h.Fonte de luz ou espelho i. Revólver ou tambor j.Botão liga/desliga k.Diafragma do condensador l.Braço, coluna ou estativa m.Botão de controle da intensidade luminosa n.Botão de movimentação do charriot, botão X e Y o.Botão macrométrico p.Botão micrométrico 2. Em sua bancada tem uma lâmina de microscopia com a letra A escrita. 3. Focalização: · Ligar o fio na tomada. · Abrir a presilha e posicionar a lâmina corretamente no charriot sobre a platina e sobre a fonte de luz utilizando o botão X e Y. · Ligar a luz, botão liga – desliga. · Ajustar a intensidade luminosidade no botão de base do microscópio. · Posicionar a objetiva de menor aumento (objetiva 4x) em posição de foco. · Posicionar os dois olhos abertos na ocular, movimentando-a de modo a enxergar apenas uma imagem. · Para focalizar, gire o botão macrométrico, subindo a platina e posteriormente o micrométrico, para ajuste fino do foco. · Para observar em objetiva maior (aumento maior), girar o revólver e posicionar a ocular de 10x (aumento de 100x). Girar o botão micrométrico para ajuste. Na objetiva de 40x, ajustar o foco utilizando apenas o botão micrométrico. Ampliar a imagem seguindo a ordem de tamanho das objetivas e caso perca o foco, reiniciar todo o processo do início. · Caso qualquer objetiva esteja suja, avisar a docente, para realizar a limpeza das objetivas com álcool éter ou gaze. 4. Preparo de lâminas a fresco: · Com uma pipeta Pasteur pingar uma gota de água sobre a lâmina. Com auxílio de uma alça retire uma pequena porção de levedura e coloque sobre a gota, espalhando-a. · Com a lâmina apoiada na bancada, segure a lamínula com uma das mãos e com o auxilio da alça na outra mão, baixe-a com cuidado para evitar a formação de bolhas. · Retire os excessos de líquido passando o papel filtro fora da área da lamínula. 5. Preparo de lâminas com corante: · Repita os passos do preparo anterior, utilizando o corante azul de metileno em vez de água. 6. Visualização de lâmina com aumento de 1000x · Para usar a objetiva de 100x, deverá ser usado óleo de imersão. Repetir os passos para visualização com as objetivas 4x, 10x e 40x. Após a visualização no aumento na objetiva de 40x, a objetiva é afastada e colocado uma gota de óleo de imersão sobre a lâmina/lamínula, e em seguida deslizado a objetiva de 100x. · A regulagem fina será feita usando o micrométrico. 7. Após o uso do microscópio: · Reduzir a luminosidade do microscópio. 8. Para desligar: · Posicionar a lamina de menor aumento na posição de foco. · Retirar a lâmina e verificar o lugar de descarte ou onde deve ser guardada. · Posicionar a platina na posição mais baixa. · Retirar a lâmina. · Desligar o botão liga/desliga. · Retirar o fio da tomada. 9. Guardar a lâmina ou descartar em local apropriado, conforme instruções recebidas.
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