EBOOK Principais técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de parasitos gastrintestinais de cães e gatos

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M a n u a l d i d á t i c o d a s
p r i n c i p a i s t é c n i c a s
c o p r o p a r a s i t o l ó g i c a s
CÃES E GATOS
Janilene de Oliveira Nascimento
Parasito Vet
 Técnica de Faust.................................................5
 Técnica de centrifugo-sedimentação..............6
 Índice
 Exame Direto...................................................... 3
Técnica de Willis - Molay..................................4
 Técnica de Hoffman, Pons e Janer ou Lutz....7
Técnica de FLOTAC............................................8
Técnica de Mini FLOTAC...................................10
Parasito Vet
 O exame direto a fresco permite visualizar a motilidade de trofozoítos dos protozoários
em fezes frescas e é muito bom para observar estruturas císticas. Para a identificação de
cistos de protozoários e larvas de helmintos, a preparação pode ser corada com lugol. em
comparação com outras técnicas, não é muito sensível para detecção de ovos de
helmintos. 
 No método direto as fezes são examinadas ao microscópio, entre lâmina e
lamínula (uma pequena quantidade de fezes para 1 gota de solução fisiológica).
Espalhar as fezes, fazendo um esfregaço e examinar ao microscópio (10x e 40x). A
espessura do esfregaço não deve impedir a passagem de luz.
Procedimento
 Exame Direto
Parasito Vet
1. Misturar em um Becker uma pequena quantidade de fezes em 10ml de solução saturada.
2. Filtrar em gaze, com auxílio de um tamisador (peneira) para outro Becker;
3. Colocar em um pequeno tubo (10ml) de bordo perfeito, o filtrado, até que o líquido forme um
menisco no bordo do tubo;
4. Colocar sobre o tubo uma lamínula, de modo que entre em contato com o líquido;
5. Deixar repousar durante 15 min;
6. Retirar a lamínula com movimento uniforme, colocando-a sobre uma lâmina;
7. Examinar ao microscópio, iniciando com objetiva de pequeno aumento.
Método de Willis - Molay (1921)
Procedimento
 É um método usado para identificação de ovos e larvas de alguns tipos de nematódeos
e oocistos de protozoários. Nessa técnica, é utilizado o princípio da flutuação em solução
saturada (cloreto de sódio ou solução de açúcar). A solução empregada faz com que os
ovos dos helmintos e oocistos de protozoários flutuem, aderindo à parte inferior de uma
lamínula colocada na superfície do líquido.
 Esta técnica é indicada para diagnóstico de nematódeos cujos ovos são leves, tais
como: Ancylostoma spp, Toxocara sp; e também pode ser usada para oocisto de coccídios
(Cystoisopora, Sarcocystis, Toxoplasma) e cistos de Giardia sp.. É importante que
mencionar que o uso do cloreto de sódio pode distorcer a morfologia de cistos de Giardia
sp, sendo o mais recomendado uma solução de sulfato de zinco (densidade 1,18 g/ml). 
Parasito Vet
1 Diluir 10g de fezes em 20 ml de água
2- Homogeneizar bem.
3- Filtrar em gaze dobrada em quatro, num copo plástico, e transferir para um tubo.
4- Centrifugar por um minuto a 1.500 rpm (2 - 3 min).
5- Desprezar o líquido sobrenadante (caso necessário faça uma nova centrifugação com água) e
ressuspender o sedimento com uma solução de sulfato de zinco a 33%, densidade de 1,18 g/ml.
8- Centrifugar novamente por um minuto a 1.500 rpm (2 - 3 min).
9 - Os cistos e os ovos leves presentes estarão na película superficial; a mesma é recolhida com
alça de platina, colocada numa lâmina junto com uma gota de Lugol e coberta com lamínula.
Técnica de Faust
 Fundamenta-se em centrífugo-flutuação de cistos, oocistos, ovos leves e larvas em
solução de sulfato de zinco, na densidade 1,18g/ml. Para fezes preservadas recomenda-se
a densidade de 1,20g/ml. Tem as mesmas indicações da técnica anterior, porém necessita
de uma centrífuga. É a técnica preferencial para pesquisa de Giardia sp., pois o sulfato de
zinco não distorce os cistos do protozoário.
Procedimento
Parasito Vet
1 Homogeneizar 2g de fezes em 10 ml de água
2. Tamisar a amostra (com gaze dobrada)
3. Colocar a amostra em um tubo de centrifugação (15 mL) e em seguida, são centrifugar a 1.500
rpm durante 1 min., desprezando o sobrenadante (pode repetir o passo 3 até que o sobrenadante
fique claro). 
4. Adicionar no sedimento, 3 ml de acetato de etila, tampar o tubo e agitar (20x)
5. Centrifugar a amostra por 2.000rpm (1 min);
6. Descartar o sobrenadante e transferir parte do sedimento para uma lamina de microscopia (para
aumentar a sensibilidade do teste, examinar pelo menos a metade do sedimento. 
Técnica de centrifugo-sedimentação (Ritchie)
 Dentre as diversas técnicas existentes para a análise parasitológica, tem-se o Método de
Ritchie (1948), que se baseia no método de centrífugo-sedimentação e no emprego do éter
para a lavagem do material. O éter é um solvente orgânico que forma uma fase apolar e
retém os artefatos vegetais e a gordura contida na amostra, durante a centrifugação da
suspensão de fezes.
 O inconveniente dessa técnica é a utilização do éter, agente químico inflamável, volátil e
explosivo. Por isso, algumas modificações têm sido sugeridas, como por exemplo, a
substituição do éter pelo acetato de etila, que além de ser menos inflamável, aumenta a
eficácia do método na detecção global de formas evolutivas de parasitos, especialmente de
cistos de Giardia sp sem ocasionar distorções morfológicas nas mesmas. 
 
Procedimento
Parasito Vet
1 Diluir as fezes em 200 mℓ de solução fisiológica ou água no béquer. 
2 Tamisar a suspensão no cálice de sedimentação
3. Deixar em repouso por 120 min;
Alguns protocolos deixam 15 min de repouso e vai retirando o sobrenadante (3 repetiçoes) 
 4. Coletar, com uma pipeta, algumas gotas do sedimento 
5. Examinar ao microscópio entre lâmina e lamínula em aumento de 100 vezes.
Se o primeiro resultado for negativo, montar mais três lâminas com o sedimento.
Técnica de Hoffman, Pons e Janer ou Lutz
 Pela sedimentação espontânea, este método baseia-se na diluição das amostras fecais
em água e filtração através de uma tira de gaze em um vidro de sedimentação cônico. O
método é utilizado para detectar a presença de ovos, larvas de helmintos e cistos de
protozoários. É utilizado para detecção de ovos mais "densos", como os de alguns gêneros
de Trematoda e Cestoda.
 
Procedimento
Parasito Vet
1Homogenize 2 gramas de fezes em 18 mL de água;
2 Tamisar a amostra (com gaze dupla) e depositar em tubo falcon;
3 Centrifugar a 1.500 r.p.m por 3 minutos. 
4 Após a centrifugação, retira-se o sobrenadante e adiciona 5 ml Cloreto de Sódio ou sulfato de
zinco (se for usar as duas soluções, fazer em duplicata os passos 1, 2 e 3). 
5 A amostra é previamente homogeneizada com o precipitado e colocada na câmara de FLOTAC
para centrifugação a 10.000 r.p.m. em centrífuga de placas durante 5 minutos.
6 Após a centrifugação, a câmara de FLOTAC é levada ao microscópio óptico para leitura nas
objetivas de 10x e 40x. 
Técnica de FLOTAC
 A técnica de FLOTAC é método de diagnóstico quantitativo e qualitativo mais eficaz
para detecção e contagem de ovos, oocistos, cistos e larvas de parasitos gastrintestinais e
broncopulmonares em fezes de animais domésticos e silvestres, além do homem. É
baseada na flutuação de elementos parasitários após a centrifugação, e um aparato que
permite a leitura copromicroscópica. 
 Sua vantagem está no fato que elementos parasitários são separados dos restos fecais,
facilitando a identificação e enumeração dos ovos de helmintos. 
Procedimento
Parasito Vet
Montagem da Câmara de FLOTAC
Parasito Vet
Técnica de Mini FLOTAC
 A técnica Mini-FLOTAC foi desenvolvida desde 2013 como um novo método direto para
o diagnóstico de parasitos gastrintestinais. Esse método se desenvolveu com sensibilidade
boa tanto quanto o FLOTAC, na qual possui mais praticidade, não necessitando de
centrífuga, permitindo maior acessibilidade aos laboratórios de menor poder aquisitivo. Além
disso, requer menos de 15 minutos de preparação antes da análise microscópica. 
 Estudos demonstram que essa técnica pode ser considerada umaalternativa válida para
a detecção de larvas metastrongilóides de cães e gatos, superando a limitação de tempo
exigida pelo teste de Baermann.
1 Adicionar 18 ml de solução de flutuação (por ex: cloreto de sódio e sulfato de zinco) no Fill - Flotac
Pode optar por usar as duas soluções (1 em cada Fill - Flotac)
2 No tubo coletor adicione 2 g de fezes e feche o Fill - Flotac
3 Homogenizar e colocar na Câmara de Mini Flotac;
4 Aguardar 10 min e fazer a rotação para leitura em microscopia óptica (10x e 40x). 
Parasito Vet
Procedimento
BOWMAN, Dwight D. Parasitologia veterinária Georgis. 9ª ed. RIO DE JANEIRO:
Elsevier, 2010. 
CRINGOLI, G. et al. FLOTAC: new multivalente techniques for qualitative and
quantitative copromicroscopic diagnosis of parasites in animals and humans.
Nature Protocols, v.5, p.503-515, 2010.
CRINGOLI, G. et al. The Mini-FLOTAC technique for the diagnosis of helminth and
protozoan infections in humans and animals. Nature Protocols, v.12, p.1723-1732,
2017.
IANNIELLO, Davide et al. Por que usar o Mini-FLOTAC para detectar larvas
metastongilóides em cães e gatos?. Acta parasitologica , v. 65, n. 2, pág. 546-549,
2020.
MONTEIRO, Silvia Gonzalez. Parasitologia na medicina veterinária. São Paulo: Roca,
2017. 356 p. 
RITCHIE LS. An ether sedimentation technique for routine stool examination.
Bulletin of the United States Army Medical Department. 1948;(8):326.
Referências bibliográficas
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coproparasitológicas para o
diagnóstico de parasitos
gastrintestinais de cães e gatos.
 
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