Diagnóstico diferencial do HIV

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Diagnóstico diferencial do HIV
01
Doença caracterizada por uma
disfunção grave do sistema
imunológico do indivíduo infectado
pelo HIV
Sua evolução é marcada por uma
considerável destruição de linfócitos
TCD4 +. 
Receptor - glicoproteína CD4 celular
Co Receptor celulares (receptores de
quimiocina)
O HIV possui tropismo celular (propensão
que um vírus tem em infectar
determinado tipo de célula) por:
A síndrome da imunodeficiência
adquirida que é causada pelo vírus HIV.
AIDS
Número de linfócitos T CD4 + < 200
células/mm3.
 Aumento da carga viral (alta viremia);
 Destruição do tecido linfóide;
População viral homogênea;
HIV
AIDS
Os métodos laboratoriais usados para a detecção da infecção pelo HIV são
os que aval iam a presença de resposta humoral , ou seja, anticorpos
específ icos:
I n i c i a l m e n t e , a i n f e c ç ã o
c a r a c t e r i z a - s e p o r a l t o s
n í v e i s d e a n t í g e n o s R N A
v i r a l e a n t í g e n o p 2 4
p r e c e d e n d o a p r o d u ç ã o
d e a n t i c o r p o s .
Diagnóstico laboratorial do HIV
O c o r r e p r o d u ç ã o d e
a n t i c o r p o s a n t i - H I V
e s p e c í f i c o s , i n i c i a l m e n t e
I g M , s e g u i d o s d e I g G .
A p e s q u i s a é r e a l i z a d a a t r a v é s : D a p e s q u i s a d e a n t i c o r p o s n a s a l i v a e
d a p e s q u i s a d e a n t í g e n o s e a n t i c o r p o s n o s a n g u e .
Janela imunológica
O período referido é conhecido como a janela imunológica e refere-se ao tempo após
a infecção, em que ela ainda não pode ser evidenciada pelos métodos laboratoriais.
D e t e c ç ã o d e R N A H I V : 7 - 1 0 d i a s
( q P C R )
D e t e c ç ã o d e a n t í g e n o p 2 4 : 1 5 -
1 7 d i a s ( E L I S A – 4 ª g e r a ç ã o )
A n t e s d a s o r o c o n v e r s ã o :
 
T e s t e I n i c i a l / T r i a g e m :
T e s t e c o n f i r m a t ó r i o : 3 0 d i a s
( W e s t e r n B l o t , I m u n o b l o t ) .
A p ó s a s o r o c o n v e r s ã o :
 
- - > D e t e c ç ã o d e a n t i c o r p o s I g M : 2 2
d i a s ( E L I S A – 3 ª o u 4 ª g e r a ç ã o )
- - > D e t e c ç ã o d e a n t i c o r p o s I g G : 3 0
d i a s ( E L I S A – 3 ª o u 4 ª g e r a ç ã o )
O diagnóstico da infecção pelo HIV é realizado com pelo menos dois testes:
- O primeiro para Triagem com máxima Sensibilidade
- O segundo Confirmatório com máxima Especificidade
Período de detecção
Teste imunoenzimático.
Teste padrão para triagem, sendo capaz
de detectar anticorpos contra
antígenos do HIV.
Permite a detecção de anticorpos (Ac) e
antígenos (Ag) específicos no
soro/plasma sanguíneo.
1.Elisa
 
Os ensaios de aglutinação de partículas são
métodos mais simples que detectam a ligação
antígeno-anticorpo sem a necessidade de
leitura colorimétrica.
Tem um perfil de sensibilidade e
especificidade semelhante ao ELISA e são de
mais fácil execução e como menor
necessidade de equipamentos.
2. Ensaio de aglutinação de partículas
Resultado em 30 minutos
Amostra: Saliva, Sangue, Soro/Plasma 
S >99,5% e E > 99%
Uso restrito: situações em que o diagnóstico é
essencial para a conduta imediata
(parturientes, acidente ocupacional, mutirões).
Regiões sem infraestrutura laboratorial ou de
difícil acesso;
3. Testes rápidos
Pode-se detectar o antígeno viral p24, presente na
infecção aguda pelo HIV, utilizando-se uma
metodologia ELISA adaptada especificamente com
preparações de IgG policlonal de pacientes
infectados.
Níveis elevados desse antígeno ocorrem no
período inicial da infecção pelo HIV, especialmente
precedendo a produção de anticorpos específicos.
4. Detecção de antígenos virais por métodos
sorológicos
5. Detecção de ácidos nucleicos
O uso de exames que detectam ácidos
nucleicos virais vem como um
adjuvante e não como substituto dos
exames sorológicos convencionais
Testes de rastreamento
Nesse teste, proteínas recombinantes ou
peptídeos sintéticos, representativos de regiões
antigênicas do HIV-1 e HIV2, são imobilizados por
uma tira de nylon.
Além das frações virais às tiras contêm regiões de
bandas controles (não virais), que são
empregadas para estabelecer por meio de uma
comparação um limiar de reatividade para cada
banda viral presente.
2. Imunoblot.
Exame padrão-ouro para confirmação de
HIV.
Especificidade superior a 99%.
Esse exame detecta a reatividade sorológica
aos diferentes antígenos do HIV. 
Consegue identificar a presença de
anticorpos IgG específicos contra as
diferentes proteínas virais.
1.Western Blot
 
É uma técnica clássica no diagnóstico virológico
aplicado ao vírus HIV, que consiste em identificar
anticorpos na sua habilidade em ligar-se a
antígenos virais expressos em células infectadas.
Os anticorpos são visualizados em incubação com
uma substância anticorpo fluorescente.
Requerem equipamento especial e treinamento
para serem utilizados.
3. Imunofluorescência
Técnica que permite a amplificação da
quantidade de cDNA/DNA específico
utilizando a enzima Taq DNA polimerase,
dNTP, sequências iniciadoras específicas
(primers) e variações de temperatura
controladas.
Responsáveis pela localização da sequência
alvo (Ex. DNA, RNA).
4. PCR
Testes confirmatórios
Estima o número de cópias do genoma viral circulando no paciente.
Expresso em número de cópias do RNA de HIV/mL.
Há vários métodos - PCR quantitativo (qPCR).
>= 5.000 cópias/ML Reagente (positivo)
< 5.000 cópias/mL Indeterminado.
Limite de detecção/quantificação <= 50 cópias/mL (negativo ou não
detectável).
PCR – Diagnóstico Molecular para HIV em Banco de Sangue (Obrigatório).
Maior que 500 células/mm3 = estágio da infecção pelo HIV com
baixo risco de doença;
Entre 200 e 500 células/mm3 = estágio caracterizado por
surgimento de sinais e sintomas menores 
Entre 50 e 200 células/mm3 = estágio com alta probabilidade de
surgimento de doenças oportunistas 
Menor que 50 células/mm3 = estágio com grave
comprometimento de resposta imunitária. 
Função: monitorar a eficácia do tratamento antirretroviral.
 Periodicidade: Em média 3x / ano 
 Metodologia: Citometria de Fluxo (imunofluorescência)
Diferenciação das populações de linfócitos T através da
identificação de moléculas expressas na superfície (CD), com uso
de anticorpos monoclonais conjugados a fluorocromo.
Monitoramento do HIV
De acordo com a carga viral
De acordo com a contagem de
linfócitos TCD4+
De acordo com a contagem
CD4/CD8