Técnicas de semeadura de microrganismos

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Técnicas de semeadura 
 
As técnicas de semeadura são o método pelo qual se transfere inóculos 
bacterianos de um meio de cultura ou material a ser analisado (secreções, 
alimentos) para um outro meio de cultura. Para garantir que apenas o 
microorganismo desejado seja semeado, são utilizadas as técnicas assépticas: 
procedimentos que devem ser adotados visando a não contaminação de 
materiais, meios e culturas. 
 
 Crédito: GEOFF TOMPKINSON/SCIENCE PHOTO LIBRARY 
 
 
Semeaduras em meios sólidos em tubos 
 
 
 
Estria sinuosa: semear com alça ou agulha bacteriológica, em 
zig-zag, partindo da base para a extremidade do bizel (superfície 
inclinada do meio). 
Objetivo: obtenção de intensa massa de microorganismos. 
 
 
 
 
 
Estria Reta: semear com agulha bacteriológica, fazendo uma linha 
reta, com cuidado de não ferir o Agar, partindo da base para a 
extremidade do bizel (superfície inclinada do meio). 
Objetivo: obtenção de pequena massa de microorganismos. 
 
 
 
 
 
Picada Central: semear com agulha bacteriológica, no centro do 
Agar. Dependendo da finalidade, o inóculo deve penetrar até 2/3 do 
tubo ou até o fundo deste. 
Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em 
algumas técnicas. 
 
 
 
 
Picada em Profundidade: semear com agulha bacteriológica, no 
centro do Agar. Dependendo da finalidade, o inóculo deve penetrar 
até 2/3 do tubo ou até o fundo deste. 
Objetivo: é utilizado para verificar fermentação e motilidade em 
algumas técnicas. 
 
 
 
Semeaduras em meios sólidos em placas de Petri 
Pour-plate ou disseminação (método em 
profundidade):Transferir 1 ml da cultura para placa de 
Petri vazia, colocar 10 – 20 ml do meio fundido (e resfriado a 
cerca de 45 – 50°C) sobre a cultura e homogeneizar 
suavemente com movimentos circulares. 
Objetivo: contagem bacteriana. É utilizado também para 
análise de microorganismos anaeróbios, adicionando 
uma outra camada de meio fundido após o endurecimento da primeira camada. 
 
Estria simples: transferir uma alçada da cultura para meio 
sólido em placa e estriar com a alça bacteriológica sobre o 
meio. A estria pode ser realizada em movimento de zig- zag 
(estria sinuosa) ou como uma linha reta sobre o meio (estria 
reta). 
 
Objetivo: Essa técnica é muito utilizada para visualização 
de determinadas propriedades metabólicas, como a 
produção de enzimas hidrolíticas (hidrólise de substâncias 
do meio - gema de ovo, sangue...), e produção de pigmentos. 
 
Esgotamento em estrias ou estrias 
múltiplas: transferir uma alçada da cultura para meio 
sólido em placa e estriar com a alça bacteriológica sobre o 
meio. A placa é dividida em 4 quadrantes e a inoculação pode 
ser feita de 2 tipos: 
• 3 estrias: estriar em metade da placa, com movimentos de 
zig-zag. Quando atingir a metade, girar a placa 90° e estriar 
até a metade (1/4 da placa), girar mais 90° e estriar o meio 
restante. 
• 4 estrias: estriar até 2/3 da metade da placa, girar 90°, 
estriar 2/3 do próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90°, estriar mais 2/3 do 
próximo quadrante (1/4 da placa), girar 90° e estriar o restante do meio. 
Objetivo: obtenção de colônias isoladas. É importante não cruzar as estrias 
(não tocar a alça na estria anterior), para reduzir o inóculo a cada estria e obter 
as colônias isoladas. Pode-se, alternativamente, flambar a alça entre as estrias e 
tocar a ponta da estria anterior, arrastando um pequeno inóculo para a próxima 
estria. 
 
 
Spread-plate ou distensão: Transferir 0,1 ml da cultura 
para o meio sólido na placa e espalhar uniformemente com a 
própria ponta da pipeta, ou alça bacteriológica / swab / alça 
Drigalsky. 
Objetivo: obtenção de crescimento confluente, ou para 
contagem bacteriana. Esta técnica é muito utilizada na realização 
deantibiogramas. 
 
 
 
Semeaduras em meios líquidos 
Difusão: uma alçada da colônia (Agar em placa) ou da cultura (de 
outro meio ou líquido) é introduzida no meio líquido, com agitação 
da alça, para maior difusão dos microorganismos (da alça para o 
meio e homogeneização no meio). Pode-se inclinar o tubo a 30° e 
esfregar o inóculo na parede do mesmo, quando o tubo retornar à 
posição original o inóculo se difundirá no meio. Objetivo: é um repique 
genérico para crescimento bacteriano em meio líquido. 
 
Fonte: Aloysio de Mello e Raquel de Souza. Apostila de Aulas Práticas – Bacteriologia. 
UFF 2007.